建立检测猕猴三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2的mRNA相对表达水平的RT-qPCR方法

目的本研究旨在建立一种实时荧光定量PCR方法,用于检测猕猴三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(adenosine triphosphate-binding cassette transporter protein G2,ABCG2)mRNA的基因转录水平。方法使用NCBI上GenBank数据库猕猴(Macaca mulatta)的ABCG2核苷酸序列号NM_001032919.1及内参GAPDH核苷酸序列号NM_001195426.1,借助Primer premier 5.0软件设计PCR引物。提取猕猴新鲜肾组织的总RNA,并反转录合成cDNA。接着,利用PCR引物进行实时荧光定量PCR扩增,并根据反应体系中荧光的变化情况定量分析ABCG2的mRNA相对表达水平。结果PCR产物测序结果显示,扩增的ABCG2和GAPDH核苷酸序列与NCBI上猕猴的序列同源性分别为90.91%和91.14%。ABCG2和GAPDH的扩增效率均达到80%~120%,实时荧光定量PCR标准曲线的熔解曲线为单峰,R2接近1。结论本研究建立的检测猕猴ABCG2 mRNA实时荧光定量检测方法,为研究高尿酸血症的发病机制以及新药开发奠定基础。

一种食用油质量的快速检测方法

本研究建立了一种可视化检测食用油质量的快速检测方法,制备了由聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDDA)和环状糊精(a或β或γ,或混合)同时修饰的纳米金复合探针溶液。当探针溶液与劣质油等体积混合时,劣质油中的杂质(如游离脂肪酸,氢过氧化物,醛类,酮类等)与其有特异性的非共价作用,使得纳米金探针从水相转至上层油时产生颜色变化,颜色变化的程度跟劣质油的含量成正比,通过肉眼观察颜色变化和两相分层情况即可定性的判断食用油的质量。结合紫外光谱630 nm处的扫描结果可定量的判断食用油的质量。研究发现:该方法的最低检测限可达食用油中勾兑比率为3.0%劣质油,勾兑比率大于5.0%的劣质油可准确测定出来。将上述方法分别应用于实际样品的检测,总准确率达到97%。因此,这种方法非常适用于市场的快速监督检验和基层的推广应用。

食品污染物残留的快速检测技术应用综述及展望

近年来,食品安全问题层出不穷,食品安全问题正受到人们前所未有的关注。食品中的有害物质严重威胁人类的身体健康,对其含量进行快速准确分析具有重要意义。快速检测技术比通常的检测技术具有更快的检测速度,且装置便携、易于实现在线现场检测,在食品安全分析中发挥了重要作用;本文简单介绍了快速检测技术在食品污染物残留检测中的运用,包括检测食品中的农药残留、兽药及饲料添加剂残留、重金属残留、生物性污染物残留等,对检测方法的优点和不足做了透彻的分析,并展望其发展方向,以期为进一步开展食品安全快速分析研究提供参考。

淮山乳酶解液化工艺条件优化

为解决淮山淀粉在淮山乳加工及贮藏中易出现老化沉淀等问题,采用耐高温α-淀粉酶对淮山淀粉进行水解,对影响液化效果的淮山乳浓度、酶用量、温度、时间、pH进行研究,在此基础上采用响应面确定最佳酶解条件,同时分析酶解对淮山乳风味的影响。结果表明:按淮山∶水=1∶9(m∶V)调成淮山乳,添加耐高温α-淀粉酶34U/g.原料,在95℃水解60min,所得淮山乳稳定性较好,有典型的淮山清香味。

柯萨奇病毒A组4型分离株全基因序列分析

目的分析1株柯萨奇病毒A组4型(coxsackievirus A4,CV-A4)毒株的全基因组序列和系统进化特征。方法使用细胞培养法对肠道病毒阳性标本中的病毒进行分离。提取病毒RNA,通过RT-PCR法分段扩增全基因组,经测序、比对和组装后获得CV-A4分离株的全基因组序列。利用MEGA7.0软件分别基于全长VP1序列和全基因组序列构建系统发育树;使用Geneious Prime 2020.1.2软件对全基因组及编码区各区段的核苷酸和氨基酸序列同源性进行分析,并对编码区氨基酸变异情况进行比较分析。结果从人类横纹肌肉瘤(human rhabdomyosarcoma,RD)细胞上分离到1株CV-A4分离株,命名为R09220/YN/CHN/2009。基于全长VP1序列的系统进化分析显示,该分离株属于C2基因亚型。在全基因组核苷酸序列上与其同源性最高的是CV-A4毒株CVA4/SZ/CHN/09(核苷酸为95.4%,氨基酸为98.7%)。与C2基因亚型内16株CV-A4代表株的全序列核苷酸相似性为88.4%~95.4%,氨基酸序列相似性为97.5%~98.7%。通过比较C2基因亚型内的23株CV-A4分离株的全基因组氨基酸序列,R09220/YN/CHN/2009共存在23个氨基酸变异位点,其中10个为其独有的变异位点。结论R09220/YN/CHN/2009为肠道病毒CV-A4,属于C2基因亚型,该亚型在中国大陆流行的CV-A4病毒中占据优势地位。

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗与不同包材的相容性

目的评价Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(sabin inactivated poliovirus vaccines,sIPV)与3种玻璃包材的相容性。方法将3批sIPV半成品分别分装至同批中性硼硅玻璃管制西林瓶(2 mL)、预灌封注射器及中性硼硅玻璃管制西林瓶(4 mL),将1批sIPV半成品分别分装至3批上述不同的包材中。分别于(37±2)℃保存14 d、(25±2)℃保存6个月、28℃保存36个月,对疫苗的外观、装量、pH、无菌试验、细菌内毒素、D抗原含量等指标进行检测。计算3种包材sIPV于不同温度下保存不同时间的D抗原回收率,并进行比较。结果3种包材分装的sIPV于不同温度下保存不同时间的各项指标检测结果均合格,且Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原回收率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论sIPV与3种不同玻璃包材均具有良好的相容性。