多孔止血淀粉的制备及其生物相容性

背景:目前临床应用的能对实质脏器迅速止血并且对其功能无影响的止血材料仍存在止血速度慢、具有毒性及价格昂贵等缺陷。目的:制备一种多孔止血淀粉,观察其在动物体内的生物相容性。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-03/04在解放军第三军医大学实验动物中心完成。材料:甘薯淀粉在淀粉酶作用下水解,并经交联、表面活性处理后,制成多孔止血淀粉。方法:健康KM小鼠60只随机分成实验组和对照组,每组30只。所有动物在右股划出长约1cm,深约0.5cm的条形切口,实验组将1g无菌多孔止血淀粉填入其中,对照组不填塞。主要观察指标:埋植后2,4,6,8,14d,2组各取6只,观察一般状况,检测血常规、肝肾功能及体液免疫学指标,并观察局部组织形态学变化。结果:制备的多孔止血淀粉为球径约15μm大小的白色球状颗粒,表面布满直径约为1μm的小孔,小孔由表面向中心深入,孔的容积占颗粒体积50%左右。实验组和对照组血生化和免疫学等指标无显著差异(P>0.05),肝肾组织切片显示无明显炎症反应,手术区肌肉组织第2天有少量炎性细胞浸润,4d后无明显炎症反应,未见明显纤维细胞包膜。结论:动物体内实验显示,多孔止血淀粉无急慢性毒性、无排斥反应、无免疫反应、无过敏反应,具有良好的生物相容性。

用地尔硫卓提高他克莫司在肾移植中的应用效能

目的探讨应用钙拮抗剂地尔硫卓(diltiazem,Dil)减少肾移植受者他克莫司(tacrolimus,Tac)用量并改善肾功能的可行性。方法肾移植术后3周,将Dil用于31例服用Tac的肾移植受者(Dil组),以未用Dil的22例为对照,检测Dil应用前和用后1周两组Tac血浓度谷值、受者淋巴细胞对供体树突状细胞的反应强度(LR);调整两组Tac血浓度在治疗窗范围内,观察两组术后6个月时LR,24个月时肌酐清除率(Ccr)降低值,两组急性排斥(AR)发生率和Tac用量。结果用Dil后1周,Dil组Tac血浓度平均升高57.2%,LR明显降低(7 709±1 257与9 965±1 908,P<0.01),与对照组上述指标变化差异无统计学意义(P>0.05)。术后6个月时两组LR差异无统计学意义(P>0.05)。术后24个月,Dil组Ccr降低值明显低于对照组为〔(27.5±9.2)mL/min与(34.7±8.2)mL/min,P<0.05〕。两组AR发生率差异无统计学意义(P>0.05),Dil组每例Tac总用量平均较对照组少443mg。结论Dil可显著提高肾移植后Tac免疫抑制效能并明显减少受者Tac用量;长期应用对移植肾功能具有保护作用。

多孔止血淀粉在肾脏中止血效果的初步实验研究

目的观察多孔止血淀粉(porous hemostatic starch,PHS)对肾脏出血的止血效果。方法选用成年家兔50只,在两侧肾脏表面各做约1cm×0.5cm大小的出血创面,以随机分组用PHS对一侧出血创面进行止血,以阿里斯泰(Arista)止血粉对另一侧同样创面的止血为对照,观察在不同压迫时间段内的止血情况,并记录即时止血时间及出血量。结果PHS和Arista止血粉能起到较好止血效果的最短压迫时间均为30s,止血时间分别为(74.0±12.94)s和(76.0±6.12)s,出血量分别为(0.80±0.158)mL和(0.84±0.114)mL;两组差异无统计学意义(P>0.05);其他不同压迫时间下,两组的止血时间和出血量差异也无统计学意义。结论PHS能达到与Arista止血粉相同的止血效果。

Foxp3体外诱导产生的调节性T细胞对小鼠心脏移植物存活的影响

目的研究Foxp3基因转染的受体na ve CD4+CD25-T淋巴细胞对小鼠同种异体心脏移植物存活的影响。方法将Foxp3重组逆转录病毒载体转染的CD4+CD25-T细胞于术前1d经尾静脉输入受体体内。实验分为3组:A组:Foxp3组,术前输入转染PLXSN-mFOXP3-IRES2-EGFP的受体CD4+CD25-T细胞;B组:调节性T细胞组,术前输入受体CD4+CD25+调节性T细胞;C组:空白对照组术前没有加任何干扰措施。术后第3天、第7天各组随机取2只小鼠,进行病理学检查。其余小鼠每日观察心脏移植物存活情况。结果4组移植物的存活时间分别为:A组(56.7±13.5)d(n=15),B组(59.1±11.5)d(n=15),C组(14.0±4.4)d(n=15)。A、B组移植物的存活时间较对照组显著延长,差异有统计学意义(P<0.01),但A、B两组之间差异无统计学意义(P>0.05),病理检查显示A、B组移植物排斥反应轻于C组。结论转染Foxp3基因的小鼠na ve CD4+CD25-T细胞,可以明显延长小鼠异位心脏移植物存活时间,其能力与自然发生的CD4+CD25+调节性T细胞相当。

前列地尔促进肾移植术后早期恢复的临床研究

目的探讨前列地尔能否促进肾移植患者术后康复。方法2003年1月至2006年8月,对298例肾移植受者术中及术后2周内每天静脉滴注前列地尔50μg,与同期内287例未使用前列地尔的肾移植受者进行对比,比较两组术后尿量、血肌酐(SCr)、肌酐清除率(Ccr)、血压、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、B超下移植肾血流阻力指数以及两组肾功能恢复延迟(DGF)和急性排斥反应的发生率。结果应用前列地尔的患者术后尿量和Ccr均明显大于对照组;高血压、ALT和(或)AST异常升高病例发生率明显低于对照组;SCr浓度、移植肾血流阻力指数亦明显低于对照组;前列地尔组DGF发生率为5.56%,显著低于对照组(10.10%)(P<0.01);两组急性排斥反应发生率差异无统计学意义(分别为10.41%、10.77%;P>0.05)。结论肾移植受者术中及术后早期应用前列地尔可促进移植肾功能的恢复,减少高血压和肝功能异常等常见的并发症。前列地尔对肾移植患者术后早期康复具有促进作用。

胰肾一期联合移植手术方法探讨

目的 探讨胰肾一期联合移植手术方法中有关问题。方法 采用原位低温灌注 ,整块切除的方法切取供胰。将供胰移植于病人的右侧髂窝 ,供肾移植于左侧髂窝 ,供体十二指肠与受者的膀胱侧侧吻合。结果 5例病人中 ,3例术后胰腺及肾脏功能满意 ,未使用胰岛素 ,进正常饮食 ,血糖一直在正常范围 ,肾功能良好 ,至今已分别生存 2 0月、1 4月、1 1月。其余 2例中 ,1例因排斥反应 ,于术后第 47天死于急性心功能衰竭。另 1例因血栓形成 ,于术后第 33天切除移植胰腺 ,但肾功能良好。

负压吸附式止血敷贴对肾脏出血的止血效果观察

目的观察负压吸附式止血敷贴对肾脏出血的止血效果。方法选用成年杂种犬,通过负压吸附试验,选择合适的负压,在两侧肾脏表面做面积约1cm×0.5cm大小的出血创面,以随机分组用负压吸附式止血敷贴对一侧出血创面进行止血,以阿里斯泰止血粉(Arista)对另一侧同样创面的止血为对照,观察止血情况,并记录即时止血时间及出血量。结果负压调整在0.04～0.07MPa时,止血敷贴可产生良好的吸附效果。负压吸附式止血敷贴和Arista止血粉止血时间分别为(48.48±1.423)s和(48.29±0.971)s;出血量分别为(0.683±0.073)mL和(0.581±0.032)mL;两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论负压吸附式止血敷贴可主动贴附出血创面并产生良好的止血效果。

肾移植术后长期应用硫氮唑酮对环孢素A用量和肾功能的影响

目的:观察钙通道阻滞药硫氮唑酮(Dil)长期应用对肾移植受者环孢素A(CsA)用量和肾功能的影响。方法:将Dil用于67例服用CsA的肾移植受者,以同期59例肾移植受者为对照,调整2组CsA血药浓度在治疗窗范围内,观察2组用药后36mo内CsA用量以及血肌酐变化。结果:术后第12、24、36moDil组每例CsA用量较对照组同期平均少14353、9656、7817mg;术后12mo内2组血肌酐无显著性差异,以后对照组血肌酐水平上升较快,术后18mo～36mo,Dil组血肌酐水平明显低于对照组同期(P<0.05)。结论:肾移植术后长期应用Dil不仅可明显减少肾移植受者的CsA用量,而且可以改善移植肾功能。

生物胶对兔肾脏创伤出血治疗效果的研究

目的观察生物胶在肾创伤出血中的止血效果。方法建立家兔肾划伤、肾部分切除伤和肾贯通伤模型,分别用生物胶和速效止血粉处理,观察记录出血量和止血时间。术后1个月取肾创面进行病理学检测,观察创面愈合情况。结果生物胶粘合伤口的止血效果明显优于速效止血粉,肾划伤模型中生物胶组和速效止血粉组出血量分别是(1.39±0.09)mL,(1.77±0.44)mL,差异无统计学意义(P=0.115);止血时间分别为(5.02±0.23)s、(66.40±7.35)s,差异有统计学意义(P<0.01)。肾部分切除伤及肾贯通伤模型中生物胶和速效止血粉两组中出血量分别是(2.07±0.25)mL、(11.42±1.33)mL,(2.01±0.36)mL、(3.95±0.39)mL,止血时间是(6.16±0.69)s、(139.38±8.97)s,(7.68±0.80)s、(144.26±9.27)s,差异均有统计学意义(P<0.01)。病理提示生物胶创面修复良好。结论生物胶对肾脏创伤的止血效果迅速且稳定,值得研究推广。

移植肾输尿管长段坏死的诊治

报告６例肾移植患者术后发生输尿管长段坏死，坏死长度均为８～１０ｃｍ。５例经Ｂ超发现。４例行移植肾输尿管与自体输尿管吻合及双Ｊ管作支架和内引流治愈，２例行移植肾切除。本文结果提示，Ｂ超用于诊治输尿管坏死简便实用，移植肾输尿管与自体输尿管吻合效果满意。

共刺激阻断剂与雷帕霉素联合应用对移植肾存活的影响

目的:探讨共刺激阻断剂CTLA4Ig与雷帕霉素(Rapamycin,RPM)联合应用对大鼠移植肾存活的影响。方法:肾移植大鼠分为对照组、CTLA4Ig组、RPM组和CTLA4Ig+RPM组,观察术后血肌酐和移植肾病理改变、移植肾存活时间。结果:与对照组相比,CTLA4Ig组、RPM组、CTLA4Ig+RPM组移植肾存活时间均显著延长(P<0.01),其中,CTLA4Ig+RPM组移植肾存活时间最长(76.5±17.1d),术后15天、30天该组血肌酐浓度最低;术后30天,仍然存活的CTLA4Ig组移植肾显示较多淋巴细胞浸润,CTLA4Ig+RPM组移植肾显示很少淋巴细胞浸润。结论:共刺激阻断剂与雷帕霉素联合应用可有效抑制排斥反应,显著延长大鼠移植肾存活时间。

共刺激阻断剂CTLA-4Ig基因修饰的树突状细胞对移植肾存活的影响

目的探讨共刺激信号阻断剂CTLA-4Ig基因修饰的树突状细胞(dendriticcells,DC)对移植肾存活的影响。方法以BN、Lewis大鼠为肾移植供、受体;用CTLA-4Ig基因重组腺病毒转染供、受体骨髓源性DC使之表达CTLA-4Ig;将供、受体DC于肾移植前24h经股静脉分别注入受体(设为组1、组2),供、受体DC混合后注入受体(组3),未注射DC的受体为对照组;观察各组移植肾存活时间,术后第20天,MTT法检测受体脾细胞对供体及无关抗原刺激的反应。结果与对照组相比,组1移植肾存活时间显著延长[(54.1!11.6)dvs(8.4!0.7)d,P<0.01),组3移植肾存活时间延长更为明显(77.5!15.7)d,P<0.001],组2移植肾存活时间无延长(8.1!0.7)d,P>0.05。术后第20天,组1、组3脾细胞对供体抗原刺激的反应均明显低于正常对照(0.27!0.07)and(0.23!0.06)vs(0.74!0.06),P<0.01,而对无关抗原刺激的反应与正常对照差异无显著性(0.68!0.04)and(0.71!0.05)vs(0.69!0.05),P>0.05。结论CTLA-4Ig基因修饰的供体DC可以明显延长大鼠移植肾存活时间,而受体DC则无此作用,但两种DC联合应用可以使移植肾获得更长的存活时间。

生物胶在兔肾部分切除术中的止血效果

目的观察生物胶在家兔肾部分切除术中的止血效果,以提高肾外科手术止血效率。方法 14只家兔按随机数字表法分为生物胶组和传统缝合组,每组7只,建立左肾肾部分切除模型,分别以生物胶和传统缝合处理伤口,观察记录出血量和止血时间,1个月后取左肾做病理检查,观察创面愈合情况。结果使用生物胶粘合伤口出血量更少,生物胶组:(2.13±0.66)mL,传统缝合组:(5.57±1.43)mL,差异有统计学意义(P<0.01);止血时间更短,生物胶组:(5.55±1.62)s,传统缝合组:(63.70±5.90)s,差异有统计学意义(P<0.01)。病理检查结果提示生物胶组创面愈合良好,慢性炎症细胞浸润明显少于传统缝合组。结论生物胶在肾部分切除术中的止血效果明显优于传统缝合,值得临床应用推广。

抗肾内动脉痉挛在肾移植术中供肾不明原因缺血时的应用

目的 探讨抗肾内动脉痉挛 (IRAS)在肾移植术中供肾不明原因缺血时的应用价值。方法 回顾性分析抗IRAS在 3 1例肾移植术中供肾不明原因缺血时应用的效果。结果 2 9例肾缺血完全消失 ,证实缺血由IRAS引起 ,术后肾功能完全恢复正常 ,其中 2 3例已随访 1年以上 ,移植肾 1、2、3、4年有功能存活率分别为 91.3 %、78.3 %、65 .2 %、65 .2 % ;治疗无效切除肾脏 2例 ,术后病理检查证实为超急性排斥。结论 在肾移植术中供肾出现不明原因缺血时采用抗IRAS措施 ,对其中的IRAS病例具有诊断和治疗的双重意义。

生物胶及缝扎法对兔肾创伤治疗效果的实验研究

目的对比生物胶与缝扎法在肾创伤模型上的治疗效果。方法家兔32只,均分为两组,切除右肾后分别建立左肾切割伤和部分切除伤模型,各模型均分为生物胶组和缝扎法组(n=8),记录各组出血量、止血时间,术前及术后1、2、3、4周分别检测血肌酐水平,术后1周超声检查,术后1个月取创面行病理检查。结果肾切割伤生物胶组和缝扎组出血量分别是(3.09±0.56)m L和(5.77±1.33)m L,止血时间分别是(10.02±1.48)s和(66.40±6.35)s;肾部分切除伤两组出血量分别是(4.67±0.73)m L和(7.42±1.65)m L,止血时间分别是(16.16±3.51)s和(179.38±18.72)s,生物胶组与缝扎组的出血量及止血时间差异有统计学意义(P<0.05)。肾切割伤和肾部分切除伤中术后各时间段肌酐值生物胶组均明显低于缝扎组(P<0.05)。术后1个月病理检查提示生物胶组肾创面愈合较好,肾单位损伤明显轻于缝扎组。结论生物胶相对于缝扎法在肾创伤治疗中对肾组织的损伤和肾功能的影响更小,止血效果更好,是一种更安全有效的止血方法。

小鼠异位心脏移植模型的改良

目的探讨小鼠心脏移植模型的建立与改良。方法供体采用BLAB/c小鼠,受体采用C57小鼠。用24GA Cuff管法套扎供心肺动脉与颈外静脉,用自制Cuff管套扎供心升主动脉与颈总动脉。结果供心冷缺血时间少于15 min,手术时间大大缩短,成功率明显提高。结论改进后的模型显著降低了手术难度,可用于移植免疫的各种研究。

地尔硫对肾移植受者他克莫司用量及肾功能的影响

目的:观察地尔硫革(Dil)减少肾移植受者他克莫司(Tac)用量、改善肾功能的效能。方法:肾移植术后3周,将Dil 用于36例服用Tac的肾移植受者,以同期30例受者为对照,观察两组用药后1年内Tac用量和肾功能变化。结果:用Dil后 1周,该组Tac血浓度平均升高56％,术后12月内,每例Tac用量平均较对照组少380 mg,两组Tac血浓度无显著差异(P> 0．05);12月时,Dil组血肌酐明显低于对照组(126．1±36．3 vs．145．8±41．5μmol·L-1,P<0．05)。结论:Dil可明显减少肾移植受者的Tac用量,对移植肾功能亦具有保护作用。