学业成就与学习动机、策略的关系:学业情绪的中介作用

为明确学业情绪在提升学业成就、培育学习动机、优化学习策略等方面的中介作用,优化职业教学体系,完善职业教育流程,推动高素质职业技术人员的有效培养。文章运用文献资料研究法、问卷调查法、访谈法等多种方法,采取定向分析和定量研究相结合的方式,科学论证学业情绪的中介作用,旨在推动新时期职业教育相关教学活动高质量开展。

Wnt3a过表达对小鼠胚胎肝干细胞凋亡的抑制作用

目的研究Wnt3a对ELSC14.5小鼠胚胎肝干细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法采用表达绿色荧光蛋白的腺病毒载体系统(Ad-GFP-Wnt3a)转入小鼠ELSC14.5细胞,以Ad-GFP组为空白对照组,Ad-wnt3a组为实验组。实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测Wnt3a及凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Mcl-1的mRNA和蛋白的表达;Hoechst33258染色法结合annexin-PE/7-ADD法检测细胞的凋亡情况。结果 qRT-PCR和Western blot结果显示,Wnt3a在ELSC14.5细胞中特异性表达,表明腺病毒系统Ad-Wnt3a能高效感染ELSC14.5细胞。与对照组相比,抗凋亡因子Bcl-2、mcl-1的mRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05),而促凋亡因子Bax的mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05)。Hoechst33258染色结合annexin-PE/7-ADD法结果显示,Wnt3a高表达的ELSC14.5细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染的细胞数量很少,细胞凋亡率降低。结论 Wnt3a通过上调Bcl-2家族中抗凋亡因子和下调促凋亡因子来抑制小鼠胚胎肝干细胞的凋亡,延长其生存。

农村供水安全保障长效管理机制研究

保障农村供水安全是改善民生福祉、巩固脱贫攻坚成果、实现乡村振兴战略的有力支撑。研究总结“十三五”期间我国农村供水管理现状及存在问题,列举福建省、浙江省和河北省3个不同地区的典型农村供水管理模式,从工程管理体制、运行机制和应急措施等方面总结成功经验,强化引领示范。为实现农村供水工程的长效运行提出相关对策和建议,为村镇供水管理部门决策提供参考。

过表达Wnt3基因抑制肝前体细胞凋亡

目的利用腺病毒载体转染体外培养的肝前体细胞,研究过表达Wnt3对肝前体细胞凋亡的影响。方法用携带Wnt3的腺病毒载体(Ad-Wnt3)转染肝前体细胞,同时设立空载体腺病毒转染组(Ad-GFP)为对照。转染72 h后,用荧光显微镜观察Hoechst33342染色后细胞凋亡情况;流式细胞术检测Annexin-PE/7-ADD法标记的细胞凋亡率;RT-PCR和Western blot分别检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Bcl-xl的mRNA及蛋白表达水平。结果 qRT-PCR和Western blot结果显示,Wnt3在肝前体细胞中特异性表达,表明腺病毒系统Ad-Wnt3能高效转染肝前体细胞。与对照组相比较,肝前体细胞转染Wnt3后,肝前体细胞的凋亡水平明显下降,凋亡相关蛋白Bcl-2和Bcl-xl的mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。Bax的mRNA及蛋白表达水平则明显下降(P<0.05)。结论在肝前体细胞中,Wnt3基因过表达能抑制肝前体细胞凋亡,其机制可能是通过Bcl-2家族起作用。

对发生窒息的新生儿进行气管插管正压通气治疗的临床效果分析

目的探讨研究对发生窒息的新生儿进行气管插管正压通气治疗的临床效果。方法择取发生窒息的新生儿98例展开分析,患儿收治时间为2014年7月—2017年11月,按照随机数字表法将98例新生儿随机分为对照组和观察组,各49例,对照组患儿接受复苏囊面罩进行正压通气治疗,观察组患儿接受气管插管正压通气治疗,比较两组治疗后的具体效果。比较两组治疗后患儿通气时间、起效时间、复苏时间、Apgar评分及复苏成功率。结果组间在通气时间、起效时间及复苏时间上比较,观察组分别为(7.54±1.21)s、(34.18±10.54)s、(142.94±42.18)s,对照组分别为(9.86±1.37)s、(50.67±16.37)s、(198.31±53.62)s,均比对照组显著更短,差异有统计学意义(t=8.885、5.929、5.681,P<0.05);组间在Apgar评分及住院时间上比较,观察组Apgar评分为(8.92±0.58)分,对照组为(7.21±0.73)分,观察组比对照组显著更高,差异有统计学意义(t=12.838,P<0.05);观察组95.92%的复苏成功率也显著高于对照组81.63%的复苏成功率,差异有统计学意义(χ~2=5.020,P<0.05)。结论临床对发生窒息的新生儿进行气管插管正压通气治疗能够促进患儿恢复效率提高,显著改善Apgar评分,提高复苏成功率,值得推广。

老年革兰阴性杆菌感染患者脂多糖测定的临床意义

目的探讨老年革兰阴性杆菌感染患者和老年非革兰阴性杆菌感染患者的脂多糖水平及临床意义。方法将238例住院老年患者的标本进行革兰阴性杆菌培养,根据培养结果分为阳性观察组127例,阴性对照组111例,采用动态比浊方法,分别对阳性观察组和阴性对照组的脂多糖水平进行检测比较。结果阳性观察组脂多糖结果为(44.54±20.27)pg/ml;阴性对照组脂多糖结果为(7.60±1.91)pg/ml,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);革兰阴性杆菌培养结果显示铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌占比最高;阳性观察组中呼吸内科和ICU检出革兰阴性菌最高。结论脂多糖升高和革兰阴性杆菌感染密切有关,测定老年患者脂多糖水平,有利于临床及时诊断治疗。

表达HBx的肝前体细胞的小鼠肝内移植模型的构建

目的构建表达乙肝病毒X基因(HBx)的肝前体细胞,并经小鼠门静脉注射建立肝内移植模型,为进一步研究HBx对肝前体细胞的作用和影响及其在原发性肝癌发病机制中的作用奠定了基础。方法分别将表达HBx基因的重组腺病毒Ad-HBx-GFP和空载体Ad-GFP转染小鼠肝前体细胞,再经小鼠门静脉注射后3、7、14 d取血清和肝组织,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)变化情况,观察绿色荧光蛋白表达情况,免疫组织化学法观察HBx阳性染色,并取表达高峰在第7天的肝组织,进行Western blot法和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法分别检测HBx的蛋白及mRNA表达。结果成功构建了表达HBx并靶向针对肝前体细胞的小鼠模型,绿色荧光蛋白表达量、免疫组化阳性细胞数量及血清ALT均在注射后第7天达到高峰,RT-PCR及Western blot均检测到第7天14-19/Ad-HBx-GFP组小鼠肝组织目的基因及蛋白的特异性表达,与14-19/Ad-GFP组及生理盐水注射组相比结果具有统计学差异。结论成功构建了表达HBx并靶向针对肝前体细胞的小鼠模型,操作可靠,重复性好,效果稳定,不仅对探讨原发性肝癌的发生机制奠定了基础,也为肿瘤动物模型的构建提供了新的思路。

虫草素对A549细胞增殖、凋亡及核转录因子NF-κB活性的影响

目的:研究虫草素对A549细胞增殖、凋亡及核转录因子NF-κB的影响,并探讨其诱导凋亡的机制。方法:采用MTS法检测不同浓度虫草素对A549细胞的增殖抑制作用,并计算24 h的IC50;用Hoechst 33258染色法及流式细胞术检测24 h不同浓度虫草素诱导A549细胞凋亡的情况;Western blot法检测虫草素对A549细胞核内NF-κB p65及凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、cleaved Caspase-3表达的影响。结果:虫草素能明显抑制A549细胞增殖,促进其凋亡;随着虫草素浓度的升高,BAX和cleaved Caspase-3的表达上调,而BCL-2表达下调;Western blot检测结果显示,虫草素能抑制A549细胞质中的NF-κB p65向核内转位。以上作用均呈现量效关系。结论:虫草素能抑制A549细胞增殖并促进其凋亡,机制可能与抑制NF-κB通路相关。

稳定表达HBx的肝前体细胞株的构建及其对增殖的影响

目的构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝前体细胞株,检测对肝前体细胞增殖,细胞周期及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法重组质粒pSEB-Flag-HBx与包装质粒pAmpho共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,包装获得携带HBx基因的重组逆转录病毒,并感染小鼠肝前体细胞HP14.5,稻瘟菌素(blasticidin)筛选出稳定表达HBx基因的细胞克隆并扩大培养(HP14.5/HBx组),设HP14.5/Rv(空质粒pSEEB-Flag感染组)及空细胞组HP14.5组为对照组。MTS比色法检测各组细胞的增殖活力,流式细胞术检测细胞周期中各时相所占的比例,荧光定量PCR检测cyclin D1和c-myc mRNA的表达量,Western blot法检测HBx、GSK3β、p-GSK3β(ser-9)、β-catenin、cyclin D1以及c-myc等蛋白的表达。结果 RT-PCR和Westernblot法检测到HBx基因和蛋白阳性表达,与对照组相比,HP14.5/HBx细胞增殖活力显著增加(P<0.05);G1细胞比例明显减少(P<0.05),S期和G2细胞比例显著升高(P<0.05);cyclin D1和c-myc mRNA的表达量显著升高(P<0.05);GSK3β蛋白水平表达无明显变化(P>0.05),p-GSK3β、β-catenin、cyclin D1和c-myc蛋白的表达水平显著升高(P<0.05)。结论成功筛选出稳定表达HBx的肝前体细胞株,HBx通过活化Wnt/β-catenin信号途径促进肝前体细胞的增殖。

HBx诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

目的探讨乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)能否诱导肝前体细胞(HPCs)发生上皮-间质转化(EMT)。方法将重组质粒pSEB-Flag-HBX与包装质粒pAmpho共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,包装获得携带HBx基因的重组逆转录病毒,并感染小鼠肝前体细胞HP14.5,经稻瘟菌素(blasticidin)筛选,获得稳定表达HBx的HP14.5细胞。观察其形态变化,通过实时定量PCR(real time-PCR)及Western blot法检测其间质细胞标志物和上皮标志物在mRNA和蛋白水平的表达量,并采用划痕实验检测其细胞迁移能力的变化。结果 HP14.5细胞稳定表达HBx蛋白后细胞由多角形变为长梭形;与对照组相比,神经钙黏素(N-cadherin)、Snail、vimentin的mRNA和蛋白水平表达均升高,具有统计学差异(P<0.05)而上皮性钙黏素(E-cadherin)、细胞角蛋白18(CK18)的mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05;同时其迁移能力显著升高(P<0.05)。结论 HBx能诱导肝前体细胞发生EMT,并增强其迁移能力。

Wnt3诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

目的探讨wnt3对小鼠肝前体细胞(14-19)发生上皮-间质转化的影响。方法分别将空载体Ad-GFP和表达wnt3的腺病毒Ad-GFP-wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14-19细胞迁移能力。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹分析分别检测14-19细胞中上皮标记物和间质标记物的表达改变。结果显微镜下可见高表达wnt3的14-19细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验和细胞迁移实验结果显示,高表达wnt3的14-19细胞迁移能力明显提高,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,间质标记物N-cadherin、vimentin和twist1的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标记物E-cadherin的mRNA水平和蛋白水平表达下调,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Wnt3能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。

Wnt3a诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

目的探讨Wnt3a对小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化的影响。方法将表达Wnt3a的腺病毒Ad-GFPWnt3a转入小鼠肝前体细胞中,与空白对照组相比,观察其形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察其对小鼠肝前体细胞迁移能力的影响。实时荧光定量Real-time PCR和Western blot分别检测小鼠肝前体细胞中上皮标志物和间质标志物的表达改变。结果镜下观察,高表达Wnt3a的小鼠肝前体细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验结果显示,Ad-Wnt3a组细胞48h迁移距离为(0.53±0.05)mm,Ad-GFP组细胞48 h迁移距离为(0.33±0.02)mm,相对对照组,其迁移距离增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞迁移实验结果显示,Ad-GFP组24 h穿过小孔的细胞为(10.33±2.08)个,而Ad-Wnt3a组穿过的细胞为(62.00±3.60)个,相对对照组,其穿过小孔的细胞数量增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR和Western blot结果显示,间质标志物N-cadherin、vimentin和snail的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标志物E-cadherin和CK-18的mRNA水平和蛋白水平表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Wnt3a能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。

美国经济复苏展望及其对全球经济的影响

美国2012的国内生产总值将增长2.3%,比2011年的1.7%稍有提高,说明2012年美国经济处于一个低速增长的状态。由于美国经济增长放缓,全球商贸也将放缓。加拿大、德国、英国和中国的出口依赖于美国,当美国经济复苏减弱,这些国家的出口增加将会式微,而全球的经济增长速度也将会从2011年的3.8%下降到2012年的3.3%。

可持续经济发展中的市场与政府角色

基于可持续经济发展中的市场与政府的角色分析,从理论上阐述了完全竞争的市场经济效率,导致市场失灵的根本原因及自由市场经济中的角色定位,并对经济可持续发展的内涵进行了详细论述,最后用两个案例对可持续经济发展中的市场与政府角色定位进行了实证分析。

浅谈法制与社会主义政治文明建设

法制是对专制和独裁的否定，是人民实现各项政治权利的根本保证，法制的内在要求和外在形式是与社会主义政治文明的核心内容和形式相一致的，党的政策和策略蕴含着以法治促进社会主义政治文明建设的全新思想，因此，法治是社会主义政治文明的根本标志。

SIRT2在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义

目的:研究SIRT2在人膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义,探讨其在肿瘤发生发展中的作用。方法:收集人正常膀胱移行上皮组织标本16例,膀胱尿路上皮癌标本36例。按照病理分级、临床分期分组,用免疫组织化学法(SP法)检测SIRT2蛋白的表达,分析其与膀胱尿路上皮癌的病理分级、临床分期的关系。结果:正常膀胱移行上皮组织中SIRT2阳性表达率为87.50%;膀胱尿路上皮癌组织中SIRT2阳性表达率为55.56%,膀胱尿路上皮癌组织中的SIRT2表达水平明显低于正常膀胱移行上皮组织(P=0.04)。SIRT2蛋白在膀胱尿路上皮癌中低级别组与高级别组阳性表达率分别为75.0%和40.0%,差异有统计学意义(P=0.04),同时SIRT2在非肌层浸润(T_1)与肌层浸润(T_(2-4))间阳性表达率分别为78.6%及40.9%,差异有统计学意义(P=0.03)。结论:SIRT2蛋白在膀胱尿路上皮癌组织中的表达明显低于正常膀胱移行上皮组织,且与膀胱尿路上皮癌的病理分级、临床分期呈负相关,提示SIRT2蛋白表达下调在膀胱尿路上皮癌发生、发展中起重要作用。

56例慢性伤口的标准化评估及管理

本文总结了标准化伤口评估方法在56例慢性伤口护理中使用的经验。重点介绍标准化评估工具,包括伤口初诊评估单、伤口评估及处理单、长海伤口测量尺、长海痛尺。伤口评估的频率为每周至少一次,伤口变化时增加评估次数,实行评估的首诊负责制,做好评估的交接管理,保障伤口护理人员资质,确保评估的一致性、完整性。标准化评估可以提高伤口评估的正确程度,准确、全面的评估对伤口护理具有指导意义。通过评估了解伤口局部的情况、患者全身系统问题、伤口致病原因,选择合适的敷料和伤口治疗方法,促进慢性伤口愈合。

大豆平作窄行密植栽培技术研究

大豆平作窄行密植栽培是在引进美国平作窄行密植大豆高产栽培技术的基础上，与我国北方农场大面积机械化栽培和广大农村精耕细作的大豆栽培技术经验相结合。经过几年引进、试验、改造、创新而形成的一项新的高产栽培技术。无论哪种形式的窄行密植高产栽培技术，采用适合窄行密植的品种是大豆窄行密植高产栽培的核心技术之一。大豆窄行密植由于行距缩小，密度增大，要求种植矮秆或半矮秆、不倒伏的品种。因此，品种的选择是此项技术引进能否成功的关键。1997～1999年黑龙江省农科院黑河农科所对北部高寒地区生产上应用的8个品种进行了筛选试验，以期为大面积推广大豆平作窄行密植栽培技术提供适宜品种，充分发挥其增产潜力，提高大豆产量。

杂种优势在小麦育种上的利用途径

小麦的杂种优势现象是普遍的、明显的和有利用价值的。目前小麦杂种优势利用途径包括：三系法、两系法、核系统、化学杀雄法、化杀辅助两系法等国内育种工作者对“三系”、“两系”和“化杀”方面进行了较深入的研究，并取得了一定的进展。

195株尿路感染念珠菌检测结果分析

目的随着药物的广泛使用,导管技术及侵入性操作的增加,念珠菌性尿路感染的发病率呈逐渐上升趋势。本研究分析尿路感染患者的念珠菌分布情况,并对其抗念珠菌药物的敏感性进行观察和分析,以指导临床合理用药和治疗。方法利用DL-96细菌测定系统分析成都大学附属医院2017-05-01-2018-05-30临床送检尿路感染中的念珠菌,观察念珠菌的构成及分布情况,采用χ~2检验分析抗念珠菌药物的敏感率。结果临床念珠菌检出率最高的为白色念珠菌(60.0%),其次为光滑念珠菌(21.5%)和热带念珠菌(7.7%);195株念珠菌在不同科室的分布差异有统计学意义,白色念珠菌(χ~2=36.923,P<0.001)尿路感染的科室主要在呼吸科和内分泌科;念珠菌对4种抗念珠菌药的敏感率差异有统计学意义,其中白色念珠菌(χ~2=15.58,P=0.001)对两性霉素敏感率为100.00%,对氟康唑的敏感率为87.18%。结论临床尿路感染的念珠菌以白色念珠菌为主,其次为光滑念珠菌;白色念珠菌和光滑念珠菌对两性霉素耐药最低,两性霉素是治疗临床念珠菌尿路感染的首选药物。