PCR-SSP分型检测上海汉族人群HLA-Cw位点血清学和非血清学鉴定的等位基因

应用补体介导的微量淋巴细胞毒实验可检出ＨＬＡＣｗ１～１０，但有２０％～５０％的空白（ｂｌａｎｋ）不能检出。利用ＰＣＲＳＳＰ对７０例上海汉族样本进行ＨＬＡＣｗ等位基因分型，首次在中国汉族人群中检出Ｃｗ１２０１／１２０２、１２０３、１３０１、１４、１６０１、１６０２、１７０１等非血清学鉴定的抗原，并对血清学鉴定抗原的基因进行分型，依次为Ｃｗ０１、０２、０３０２／０３０４、０３０３、０４、０５０１、０６０２、０７０１／０７０２／０７０３及０８。ＰＣＲＳＰ分型使上海汉族人群ＨＬＡＣｗ位点空白基因频率从０．３０７下降到０．０２８。１２例样本检出Ｃｗ０８，与原来认为中国人群中Ｃｗ８罕见的观点不符。结果证明，ＰＣＲＳＳＰ用于ＨＬＡＣｗ基因分型是快速、准确的。

用Amp-FLP方法分析江浙沪汉族人群D1S80位点多态性

采用PCR结合PAGE电泳及银染技术，即Amp－FLP方法，分析了148名江浙沪汉族人中D1S80位点的多态性分布，观察到20种等位基因，53种基因型。首次在国际上发现重复单元数为39的等位基因、该位点观察杂合性为0．86个体鉴别力为0．96多态性信息含量为0．83，基因频率分布符合Hardy—Weinberg法则。本文结果提示，采用Amp－FLP技术分析D1S80位点多态性，样本分型具有较高的准确性及灵敏度；适用于人类民族演变、法医学个体指认、亲子鉴定、遗传病基因连锁分析等研究领域。

江浙沪和哈尔滨地区汉族D17S30位点的多态性分布

Ｄ１７Ｓ３０是位于人类染色体１７ｐ１３．３、以７０ｂｐ为重复单位的、具有高度多态性的ＶＮＴＲ位点。本文采用作者报道的微量快速Ａｍｐ－ＦＬＰ分型技术，对１００名哈尔滨市北方汉族人和１１０名江浙沪南方汉族人作了Ｄ１７Ｓ３０位点分型，发现在北方汉族与江浙沪南方汉族之间等位基因频率分布并无显著差异，但可见Ａ１和Ａ７基因频率北高南低，Ａ４基因频率则为南高北低，提示存在南北汉族之间的分化。Ｄ１７Ｓ３０位点南北方汉族观察杂合性均为０．８８，个体鉴别力均为０．９７，多态性信息含量均为０．８６。本文结果提示，采用微量快速Ａｍｐ－ＦＬＰ分型技术分析Ｄ１７Ｓ３０位点多态性，具有较高的灵敏度与准确性，可在我国作为一种高效的遗传标记应用于民族演变、法医学个体指认与亲子鉴定、遗传病基因连锁分析等研究领域。

中国汉族人群中5种血型系统在亲子鉴定应用中的探讨

中国汉族人群中５种血型系统在亲子鉴定应用中的探讨２０００５１上海市血液中心冯明亮冯哲王健莲张雁征稽月华张工梁陈和平杨颖刘达庄ＡＢＯ、ＭＮ、Ｐ、Ｒｈ和ＨＬＡ５种系统都是具有遗传性状的人类血型，大多表现为简单的显性或隐性遗传，符合孟德尔遗传规律，均可作为...

用PCR-SSP分析HLA-B位点血清学分型困难标本

目的 :对血清学HLA B位点分型困难标本用PCR SSP方法分析 ,并寻找血清分型效果不佳原因。方法 :用本室建立的PCR SSP方法对 10 0株标准细胞及 91份血清学分型困难标本分别作HLA B位点分析 ,前者作为PCR SSP方法的参考对照品。结果 :10 0株标准细胞分析结果与已知结果一致 ;91份疑问标本均顺利地用PCR SSP分型 ,结果共有 70种等位基因格局 ,其中 36种与血清学完全不同 ,占 5 2 %。PCR SSP还检出了一些原先认为上海人中空白的基因 ,如B49。结论 :从PCR SSP分型结果推断血清学部分标本分型结果不佳的原因是缺少单价抗血清 ;同一交叉反应组内错检 ;反应强度不当 ,导致结果难辨 ;操作中跨孔污染。而PCR SSP就没有这方面的问题。证实了本室建立的PCR SSP法可作为准确可靠的HLA

用PCR-SSP作HLA-B位点分型及B22亚型分析

目的:用DNA分型弥补血清学HLAB位点分型的欠缺并了解南方汉族B22亚型分布情况。方法:采用标准细胞作参照,建立B位点的PCRSSP分型方法;并对血清学B22阳性标本进行B22亚型分析。结果:104株标准细胞PCRSSP分型结果与已知结果完全一致,17例白血病人及同胞分型与血清学一致,1例不符;B22亚型以B5401最多,B5601较少,1例分型格局异常,可能为新B22等位基因或错配的DNA双链。结论:PCRSSP可用于B位点的DNA分型,比血清学更直观精确,操作简便,不受疾病状态影响。

HLA命名和Ⅱ类基因分型

1991年11月在日本横滨召开了第11届国际组织相容性讨论会,会后世界卫生组织HLA系统因子命名委员会重新修改了HLA命名;另一方面,HLAⅡ类的基因分型方法已有重大进展。现就这两方面的内容介绍如下。

HLA-DR序列特异引物PCR分型技术及其在移植中的应用

ＨＬＡ－ＤＲ序列特异引物ＰＣＲ分型技术及其在移植中的应用２０００５１上海市输血研究所张雁征杨颖冯哲嵇月华冯明亮陆琼张工梁ＨＬＡ－Ⅱ类抗原ＤＲ由第６号染色体上１个ＤＲＡ和多个ＤＲＢ基因编码组成，ＤＲ分子参与抗原提呈和同种异体移植的识别，器官移植供受者间...

VNTR D17530位点多态性在亲子鉴定中的应用

运用微量热启动PCR技术，对20例正常家系的遗传学分析，证实D17530位点的遗传符合孟德尔遗传规律，表现为简单的共显性遗传。同时，对100例亲子鉴定案例进行回顾性分析研究，证明D17S30位．在多态性可应用于我国法医学亲子鉴定。根据D17S30位点基因频率估算的排除概率（74．04％）与其实际排除能力（80．00％）无显著差异。在15倒排除亲子关系的案例中，有2例由D17S30位点单独取得排除证据。D17S30位点是法医学上有重要意义的遗传学标记，可用于亲子鉴定。

肝癌合并肝硬化患者行同期超选择性肝动脉栓塞和门静脉栓塞的二步肝切除术的可行性探讨

目的 探讨肝癌合并肝硬化患者行同期超选择性肝动脉栓塞术(PVE)和门静脉栓塞(SHAE)的二步肝切除术的可行性。方法 回顾性分析2016年10月至2017年10月唐山市人民医院收治的6例肝癌合并肝硬化患者的临床资料,采用同期超选择性PVE+SHAE进行治疗。对手术相关指标[手术时间、手术出血量、肝功能相关指标水平、术后剩余肝脏体积(FLR)水平]进行分析;对术后随访情况进行分析。结果 ①一期手术结果。手术时间为85~145 min,平均(112. 32±12. 23) min;患者术后3 d时均存在不同程度的发热症状,经物理降温后可恢复至正常水平。患者术后肝功能均出现一定变化,丙氨酸氨基转移酶(ALT)峰值为190~4 203 U/L,平均(1 782. 30±55. 69) U/L;术后总胆红素(TBil)峰值为22~40. 2μmol/L,平均(30. 98±3. 46)μmol/L。一期术后7~16 d FLR水平升高了149. 2 ml,每日平均升高(16. 2±3. 23) ml。例如:第4例患者术前左半肝体积为342 ml,经治疗后15 d,左半肝体积增生至545 ml,增幅高达59. 36%,这个指标完全达到了第2步手术的需求;第5例患者经治疗后15 d,左半肝体积也显著增大。②二期手术结果。于一期术后7~17 d实施二期手术,手术时间为185~430 min,平均(259. 29±19. 87) min;失血量为220~1 380 ml,平均(665. 49±21. 12) ml;2例患者TBil水平于术后2周升至385. 29μmol/L,经护肝退黄治疗以及一次性人工肝治疗,TBil水平逐渐降低,术后33 d TBil降至正常水平。6例患者中,治疗后有5例患者甲胎蛋白(AFP)水平在3个月之内降至正常水平。③术后随访7~20个月,平均(12. 09±2. 32)个月,截至发稿时仍然有3例存活患者,且其中有2例患者为无瘤生存,剩下的1例于术后7个月时检查发现肝内复发以及骨转移,目前带瘤生存。术后病理检查结果均为原发性肝癌,肿瘤最大直径为(11. 76±1. 25) cm,门静脉癌栓、肝静脉癌栓各1例,微血管侵犯程度为M0~M2型,其中M0、M1、M2型分别为1、3、2例。结论 肝癌合并肝硬化患者行同期超选择性肝动脉栓塞和门静脉栓塞的二步肝切除术治疗效果较为明显,具有一定的可行性。

HLA-A位点PCR-SSP基因分型和血清学分型的比较

目的：建立优化ＨＬＡＡ位点ＰＣＲＳＳＰ分型方法。方法：采用普通扩增仪和Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管对细胞系ＤＮＡ和３７个健康正常人进行基因分型，血清学检测采用标准淋巴细胞毒试验方法。结果：发现引物浓度和浓度比、ＤＮＡ的纯度及酶的选用，是影响ＨＬＡＡ位点ＰＣＲＳＳＰ分型准确性的重要因素。该方法对３７个标本的基因分型结果与血清学结果相符合。结论：ＰＣＲＳＳＰ方法具有简便准确的优点。

苯磺酸氨氯地平联合牛黄降压丸治疗老年高血压的临床效果观察

目的:分析高血压老年患者接受苯磺酸氨氯地平片与牛黄降压丸联合治疗的临床疗效。方法:以2020.1-2021.11为此次研究期间,92例老年高血压患者为此次研究对象,遵照电脑随机分组的方法将其划分至对照组46例、联合组46例,分别施以苯磺酸氨氯地平片单一治疗、苯磺酸氨氯地平片+牛黄降压丸联合治疗,比较二者疗效。结果:联合组治疗总有效率、治疗后收缩压及舒张压水平均优于对照组,P<0.05;同时不良反应发生率对比差异无意义,P>0.05。结论:使用牛黄降压丸配合苯磺酸氨氯地平片的方式对老年高血压患者实施临床医治,可明显提升总体疗效,对患者其血压水平的有效控制带来积极作用,且具有较高的用药安全性,因此值得推广。

中华(上海)骨髓库的HLA分布报告

目的 报告中华 (上海 )骨髓库中HLA血型资料 ,了解中国人群HLA分布特点。方法 用微量淋巴细胞毒试验检测 11995名志愿者的HLA A、B抗原 ,并用序列特异引物聚合酶链反应(PCR SSP)进行DNA水平的质控和对有疑问结果作复查。结果 共检出A座位特异性 2 5种 ,B座位抗原特异性 5 2种 ,有显著意义的连锁不平衡单型有 6 2种 ,其中以A2 B46、A30 B13、A33 B5 8、A11.1 B6 0、A2 4 B6 2、A2 4 B6 0等为最常见 ;检索HLA A、B、DR抗原 (基因 )匹配志愿者的“命中率”约为 1‰。结论 中国人群HLA分布有自身特点 ,而现有骨髓库HLA A、B基因的遗传特征介于南、北方汉族之间 。

肾病综合征患儿人类白细胞抗原－DRB1基因分型

为进一步明确人类白细胞抗原（ＨＬＡ）与肾病综合征的关系，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）／顺序特异的寡核苷酸（ＳＳＯ）探针的方法对２３名上海地区激素敏感型肾病综合征患儿进行了ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因的频率分析，发现ＨＬＡ－ＤＲＢ１０７与该病相关（Ｐ校正Ｐｃｏｒｒ＝９．０２×１０－３，相对危险度，ＲＲ＝８．１５），ＨＬＡ－ＤＲＢ１０９与该病的频复发相关（Ｐｃｏｒｒ＝２．５１×１０－２，ＲＲ＝２０．７７），用ＰＣＲ／ＳＳＯ分型方法可精确分析与肾病综合征相关的ＨＬＡ等位基因。