阜新某鸡场大肠埃希菌四环素类药物敏感性试验及耐药基因检测

大肠埃希菌能够引起鸡大肠杆菌病,对养殖业危害巨大。检测阜新某鸡场分离的33株鸡源大肠埃希菌对6种临床常用的四环素类药物的敏感性,并对四环素耐药基因进行检测。结果表明,大肠埃希菌分离株对土霉素和脱氧土霉素高度耐药;对四环素和多西环素中度耐药;对金霉素和强力霉素敏感。在33株大肠埃希菌分离株中检测出tetB、tetC、tetM、tetK、tetL 5种四环素耐药基因,未检出tetA基因,tetK检出率最高。

沈阳某鸡场大肠埃希菌的分离鉴定及药敏试验

对沈阳市某肉鸡养殖场的85例病死鸡进行大肠埃希菌的分离鉴定及药物敏感性试验，结果分离到大肠埃希菌62株，分离率为72．9％，分离菌株对头孢氨苄全部耐药，对其余抗菌药物的耐药率在0～88．7％之间，多重耐药情况普遍。

宠物与人的健康

现代人饲养宠物，或者为了舒缓压力，或者为了排解心中的寂寞，已经成为一种生活的需要。而宠物的种类也不再局限于鸟类、犬、猫等传统物种，宠物貂、土拔鼠、宠物猪甚至蜥蜴、蛇、蟒等都开始进入城市家庭。然而，这些宠物多数没有相关免疫措施，也没有纳入疫病监测管理体系。随着人类与宠物的接触越来越密切，一些由宠物携带的人兽共患病病原也悄然来到人们身边，应该引起相关部门的足够重视和社会的广泛关注。

埃博拉出血热-人兽共患传染病

从2014年3月世界卫生组织通报几内亚发生埃博拉出血热疫情以来,利比里亚、塞拉利昂和尼日利亚4个西非国家相继报告该病疫情,截止2014年8月15日4个国家因该病造成的累计病例数为2 127例,死亡1 145例。该病目前在疫区传播迅速,仅12日和13日两天就新增确诊、疑似和可能感染病例152例,新增死亡病例76例。埃博拉出血热疫情已经引起全球关注,目前我国还未发现埃博拉出血热病例,但随着国际交往日益增多,不排除该病通过引进动物或通过隐性感染者及病人输入的可能性,系统全面了解该病是科学应对此次疫情的基础。

犬出血性肠炎的诊疗

犬出血性肠炎是宠物门诊中的常见病，多发于幼犬和青年犬。本病发病急、病程短，可在1～2天内出现水样血便，病犬脱水衰弱。如果治疗及时得当，可获得比较满意效果。

住肉孢子虫病检疫技术概述

住肉孢子虫病是由住肉孢子虫引起的一种原虫病,本病发生于各种家畜(马、牛、羊、猪、兔等)、鼠类、鸟类、爬虫类和鱼类中,偶尔也寄生于人。我国各地的牛羊,尤其是南方的水牛和黄牛、北方的绵羊和山羊常有发现,有些地区的感染率可达100%。住肉孢子虫寄生于各种家畜的横纹肌,致使肌肉不能食用,引起巨大的经济损失。本文对住肉孢子虫病的产地检疫技术、屠宰检疫技术和实验室检疫技术作以简要介绍。

一起犬氟乙酰胺中毒的诊治

氟乙酰胺又名敌蚜胺、1080，是高毒类农药，由于其毒性极强，且可以引发二次中毒，早在1982年我国就禁止在农药和灭鼠药中添加该成分，但目前还有不法商贩在制售含有氟乙酰胺的灭鼠药，并广泛应用，人畜氟，乙酰胺中毒事件时有发生。

犬梨形虫病的防治

犬梨形虫病是动物门诊常见的一种血液原虫病,该原虫可引起多种动物发病,临床上以高热、贫血、黄疸、血红蛋白尿为主要特征.如能及时确诊、采取有效的治疗措施,一般可以取得满意的治疗效果.

母犬产后痉挛的治疗

母犬产后痉挛在兽医临床是一种常见的疾病。该病是因血钙降低导致运动神经异常兴奋，造成全身肌肉强直性收缩而出现的痉挛。同时伴有呼吸紧迫、心跳加快为主要特征的一种代谢性疾病。本病发病急，发展快，在临床上需要及时做出正确判断，迅速采取有效治疗措施，病犬就可以在短时间内恢复正常。

犬腰脊损伤的防治

在兽医临床工作中，经常会遇到一些腰脊损伤的患犬前来就诊，一般多见于京巴犬、德国黑背等犬种。这些患犬或因外力作用，或因运动不当或因自身缺陷而引起发病。病犬经过临床治疗，大多取得了满意的疗效，现介绍如下。

一起蛋鸡暴发传染性鼻炎的诊治

鸡传染性鼻炎是由副鸡嗜血杆菌引起的一种急性或亚急性上呼吸道卡他性传染病,各日龄的鸡只均可感染,但育成鸡和成年鸡较多发。本病以鼻腔、眶下窦发炎,流鼻涕,颜面肿胀,传播迅速为特征,一年四季均可发生,但在寒冷季节多发,一般秋末和冬季是本病高发期,每次发病严重程度和病程长短差异很大,短的几周,长则几个月。

一例奶牛产前瘫痪的中西医综合治疗

奶牛产前瘫痪是兽医临床上较难治疗的一种常见病，若不及时治疗会导致淘汰。造成很大的经济损失。产前瘫痪多在产前7~26天左右发病，有特殊病例在怀孕4~5个月而发病。现将笔者应用中西医综合治疗成功的病例介绍如下：

浅谈亚临床型酮病对奶牛的危害及其防控措施

亚临床酮病是高产奶牛在产后常发的一种能量代谢病，不仅会降低奶牛产奶量和乳汁质量，还可影响到奶牛的繁殖性能和犊牛的成活率，给养牛业造成巨大的经济损失。为有效预防和控制该病的发生，本文通过对亚临床酮病危害和防治等方面作一综述，以期为同行提供参考。

重组杆状病毒表达H9亚型禽流感HA基因的研究

为研究通过体外表达的方式获得具有生物学活性的禽流感HA蛋白的方法,根据GenBank公布的禽流感H9亚型的基因序列设计引物,扩增出HA基因全长片段,将扩增片段克隆到pFastBacHTa载体上,构建重组杆粒rBacmid-HA,在脂质体介导下转染Sf9细胞制备重组杆状病毒,表达HA蛋白,并通过血凝抑制试验、Westernt-blot、间接免疫荧光试验研究其生物学活性。结果显示,在Sf9细胞中成功表达了HA蛋白,分子量约为65kD,且表达蛋白具有良好的生物学活性。

鹅细小病毒NS2蛋白间接ELISA方法的建立

为建立检测鹅细小病毒(GPV)的间接ELISA方法,本研究表达了GPV重组NS2蛋白,并以Ni-NTA亲和层析柱纯化的蛋白作为检测抗原,建立间接ELISA检测方法,并进行抗体消长规律的检测。用该方法检测阴性血清样本30份,确定检测临界值为0.281。与琼脂扩散试验结果的阳性符合率为100%,阴性符合率为86.67%。与抗鹅H5、H7、H9亚型禽流感病毒阳性血清和抗鹅副粘病毒阳性血清无交叉反应。在此基础上组装检测试剂盒,试剂盒批内变异系数为4.2%,批间变异系数为8.3%,包被抗原的酶标板在4℃可保存6个月。该方法对人工感染GPV血清检测结果表明,接种病毒后第8周,NS2蛋白的抗体水平达到峰值。本研究为GPV流行病学调查提供了一种快速、方便、敏感的抗体检测方法。

中兽药作为饲料添加剂的功效研究

中兽药在我国养殖业上具有悠久的历史和广泛的应用,尤其是在食品卫生安全被高度重视的今天,中兽药代替抗生素作为饲料添加剂得到了普遍认可。中兽药富含动物必需营养物质并且有助脾胃调节,可抵抗病毒、细菌、寄生虫等多种病原微生物,还可通过提高特异和非特异免疫来增强畜禽免疫力,同时具有体内、体外的抗氧化作用。除此之外还能增加肉质风味和维持内环境稳态等。

鹅细小病毒VP3基因和鹅副黏病毒F基因在重组禽痘病毒中联合表达

将重组转移载体质粒pSY681-VP3-F-LacZ与脂质体转染禽痘病毒感染的CEF细胞,通过五轮蓝斑筛选,获得纯化的重组病毒rFPV-VP3-F。经PCR检测,表明GPV-VP3基因和GPMV-F基因已重组到特异性禽痘病毒基因组中;Dot-ELISA和间接免疫荧光试验,证明VP3蛋白和F蛋白在重组病毒感染的CEF细胞中获得有效表达并且两种蛋白都保持其反应原性。

两株不同亚型禽流感病毒NS1基因的表达及抗原性检测

为进一步研究禽流感病毒非结构蛋白NS1的功能及其在临床中的应用,本试验分别对H5N1、H9N2两株不同亚型禽流感病毒的NS1基因进行了原核表达及抗原性检测。实验分别用限制性内切酶EcoRI和XhoI消化不同亚型NS1基因的重组质粒pMD-18T-NS1(H9N2)和pMD-18T-NS1(H5N1),获得目的片段NS1,然后将NS1基因克隆到原核表达载体pProEXHTc中。将重组质粒pProc-NS1(H9N2、H5N1)转化DH5α感受态细胞,用1mmol/LIPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测,目的蛋白分子量大小为30ku,与预期结果相符。West-ern-blot检测表明所表达的蛋白能与NS1的多克隆抗血清反应,并且存在交叉反应。

禽流感野毒感染禽与疫苗免疫禽NS1-ELISA鉴别方法的建立

分别构建了重组禽流感病毒H9N2亚型、H5N1亚型NS1基因原核表达菌株,IPTG诱导表达,表达的蛋白用Ni+-NTA Agarose纯化,Western-blotting检测两种蛋白的活性,并进行交叉反应检测;以H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法,并优化各项反应条件。高效表达了H9N2和H5N1亚型NS1蛋白,融合蛋白的分子质量均为30 ku左右;Western-blotting检测均有特异性条带,并且存在明显的交叉反应。选择重组的H5N1亚型NS1蛋白建立了间接ELISA检测方法,最佳抗原包被浓度为1.325μg/mL,血清稀释度为1∶400。结果表明,以H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白为包被抗原的ELISA检测方法可区分禽流感病毒感染禽与疫苗免疫禽。