密花美登木化学成分及抗肿瘤活性研究

目的:研究卫矛科美登木属植物密花美登木Maytenus confertiflora J.Y.Luo et X.X.Chen茎叶的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法:采用正相硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、MCI以及Semi-Prep HPLC对密花美登木醇提物进行分离纯化,并采用MTT法对三萜化合物进行体外抗肿瘤活性评价。结果:从密花美登木中分离得到17个化合物,分别鉴定为:tridec-1-ene(1)、bis(2-ethylhexyl)phthalate(2)、二十五烷(3)、β-amyrenone(4)、3-hydroxyfriedel-3-en-2-one(5)、β-谷甾醇(6)、28,29-dihydroxyfriedelan-3-one(7)、friedelin(8)、3α-hydroxyfriedel-2-one(9)、3-oxofriedelan-28-oic acid(10)、canophyllol(11)、3-oxo-29-hydroxyfiedelane(12)、pentadecanoic acid(13)、华中冬青素(14)、lingueresinol(15)、飞龙掌血内酯(16)、橙黄胡椒酰胺乙酸酯(17)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。化合物7对Eca-109、EJ细胞具有较强抑制作用,其IC_(50)分别为27.67、30.09μmol/L;化合物12对HepG_(2)、PANC-1细胞均具有较好的抑制作用,其IC_(50)分别为49.42、51.87μmol/L。

中药天然寡糖及寡糖酯的化学成分和药理作用研究进展

糖类成分在中药中主要分布于药用植物的根、茎、叶、皮等器官,可作为储能物质,而且在人类疾病的治疗中发挥着至关重要的作用。寡糖可通过天然提取、降解多糖、人工合成等方式获得。中药来源的寡糖由于其单糖组成、连接方式等不同,具有结构复杂性和多样性,并表现出众多药理功效,如调节免疫、抗肿瘤、改善记忆、抗抑郁、治疗心血管疾病、降血糖等。本文综述了近15年来从巴戟天、人参、地黄等中药中分离得到的33个寡糖和36个寡糖酯的最新研究进展,对其结构和药理作用研究进行了总结,对新产品的开发进行了探讨,以期为中药来源的寡糖类化合物的研究和开发提供重要参考。

模拟睡眠对脓毒症患者生物钟基因Bmal1、Per2表达和免疫功能、短期临床转归的影响

【目的】探讨模拟睡眠对脓毒症患者生物钟基因脑-骨骼肌ARNT样基因1(Bmal1)、周期基因2(Per2)表达和免疫功能、短期临床转归的影响。【方法】80例脓毒症患者,随机分为对照组(常规对症治疗)和观察组(常规对症治疗联合模拟睡眠干预),每组40例。比较两组患者治疗前及治疗7 d后炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)]、Bmal1和Per2表达水平、免疫功能、序贯器官衰竭评估评分(SOFA)、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)及机械通气时间、EICU住院时间和28 d病死率。【结果】两组治疗7 d后IL-6、IL-8、TNF-α、CRP均较治疗前降低(P<0.05),且观察组各指标低于对照组(P<0.05);两组Bmal1、Per2 mRNA表达较治疗前升高(P<0.05),且观察组上述指标高于对照组(P<0.05);两组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)较治疗前升高(P<0.05),CD8^(+)较治疗前降低(P<0.05),且观察组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组(P<0.05),CD8^(+)低于对照组(P<0.05);两组SOFA评分和APACHEⅡ评分较治疗前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。观察组机械通气时间、EICU住院时间短于对照组(P<0.05);观察组28 d病死率低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】模拟睡眠能改善脓毒症患者生物钟基因Bmal1、Per2节律异常情况,增强免疫功能,减轻患者全身炎症反应,改善短期临床转归。

新型双酶葡萄糖生物传感器的制备及其应用

目的探讨血清葡萄糖检测新的溶胶-凝胶电化学生物传感器的制备方法. 方法将含有葡萄糖氧化酶的聚吡咯薄膜修饰到含有辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)和媒介体的碳陶瓷电极表面,发展了一种新型双酶安培检测葡萄糖传感器.结果双酶传感器对葡萄糖检测的线性范围是8.0×10-5 ～1.3×10-3 mol/L,其检测灵敏度为1.11 μA ·mmol-1· L-1(r=0.998,n=8).该法与葡萄糖分光光度法(全自动分析仪)相比无显著性差异(P＞0.05).结论在这种传感器的异相双层结构中,各种酶均保持了良好的生物活性,而且所得传感器也具有良好的抗干扰能力以及对底物检测的高灵敏度.这种方法有望于将各种H2O2 生成酶与HRP相结合,制备具有高选择性的其他生物传感器.

电化学发光在分析科学中的应用

近年来,电化学发光(ECL)作为一种高灵敏度和高选择性的分析方法,已引起人们极大的研究兴趣.电化学发光分析(ECL),是对电极施加一定的电压进行电化学反应,反应产物之间或与体系中某种组份进行化学发光,通过测量发光光谱和强度对物质进行定量的一种痕量分析方法.这种方法具有非放射、高灵敏、快速、动力学范围宽、稳定、选择性强、重现性好、廉价、易于操作、方法多样的优点.已广泛应用于免疫分析、核酸、杂交分析、药物分析、氨基酸分析和其他物质的测定,可以预计IECL技术在分析科学的研究中将大有作为[1].

红细胞标记抗体的化学发光免疫分析

用红细胞代替辣根过氧化物酶作为双抗体夹心免疫分析中第二抗体的标记物,建立了一种红细胞标记抗体的免疫化学发光测定乙型肝炎病毒表面抗原的新方法.在免疫反应完成后,结合了抗原-抗体免疫复合物的致敏红细胞在低渗溶液中溶血,释放出血红蛋白.基于血红蛋白对鲁米诺-H2O2体系化学发光具有催化作用的原理,采用化学发光法测定血红蛋白含量.测得的血红蛋白发光强度与待测抗原浓度呈线性关系.采用这种方法可检测出0.5 ng/mL的乙型肝炎病毒表面抗原.将该方法与酶联免疫吸附分析(ELISA)结合起来对乙型肝炎患者血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg)进行检测,两者符合率均为97%,表明本法具有良好的灵敏度和特异性,可用于临床标本测试.

芳竭丸处方的拆方研究

目的:对芳竭丸的处方进行分析研究,确定各味药对处方功能主治的贡献。方法:以降血糖和活血化瘀作用为指标,采用正交t值法进行试验研究。结果:方中扶芳藤、黄芪、龙血竭、天花粉对降血糖和活血化瘀作用有显著贡献;丹参只对活血化瘀作用有贡献;生地、麦冬没有表现出显著作用。结论:将原方减味,修订为黄芪5g,扶芳藤10g,龙血竭1.5g,天花粉2g。

三七总皂苷对Alzheimer’s病大鼠模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用

目的:观察三七总皂苷(PNS)对老年性痴呆 (AD)大鼠模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用。方法:以d 半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸 (IBA)损毁双侧大脑Meynert基底核建立AD大鼠动物模型,利用免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰基转移酶 (ChAT)免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变。结果:PNS能明显减轻由d 半乳糖损害和鹅膏蕈氨酸损毁导致的大脑胆碱能神经元数量减少和ChAT水平降低。结论:PNS对AD大鼠模型大脑胆碱能神经的病理损害具有保护作用。

中越猕猴桃根提取物的体外抗肿瘤活性研究

目的:观察中越猕猴桃根提取物对肿瘤细胞株生长抑制的影响。方法:采用MTT比色法、集落形成法和生长曲线法测定中越猕猴桃根提取物对人胃癌细胞株SGC7901、白血病细胞株L1210和P388D1、宫颈癌细胞株He la、人肝癌细胞株Hele7404、黑色素瘤细胞株B16和神经肿瘤细胞株NG108- 15生长的抑制影响。结果:中越猕猴桃根提取物对 6种类肿瘤细胞株的生长均有不同程度的抑制作用。结论:中越猕猴桃根提取物在体外具有抗多种肿瘤作用。

余甘子叶提取成分没食子酸的体外抗肿瘤实验研究

目的探讨从余甘子叶提取分离得到的活性成分没食子酸的抗肿瘤作用。方法采用MTT法和细胞集落形成法观察没食子酸对人肝癌细胞株Bele7404、人胃癌细胞株SGC7901、小鼠肝癌细胞株H22和小鼠肉瘤细胞株S1804种肿瘤细胞的体外抑制作用。结果MTT法和细胞集落形成法测定的结果均显示,当没食子酸浓度在2.5μg/m l以上时,4种肿瘤细胞株的生长均受到明显抑制。结论余甘子叶提取成分没食子酸在体外对不同组织来源的肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用。

含Sn-Mg双金属催化剂的合成及其在合成ε-己内酯反应中的应用

通过简单的合成手段在常温常压下制备出一种含有镁的锡类催化剂,命名为Sn-Mg-M。利用傅里叶红外光谱、X射线衍射、热重分析等表征手段对催化剂结构进行了表征,并且对其在Baeyer-Villiger氧化中的催化效果进行了研究,探究了不同配比的催化剂、氧化剂种类以及反应条件对催化效果的影响。结果表明:当催化剂中n(Sn)∶n(Mg)=4∶1,过氧化氢(H2O2)与环己酮物质的量投料比为4∶1,环己酮浓度为0.33 mmol/mL,催化剂与反应物的质量比为1.57∶1,在65℃的反应条件下反应12 h时,环己酮的转换率可以为73.27%,ε-己内酯产率为24.16%。同时催化剂结构稳定,且能够被循环使用。

美味猕猴桃根提取物的体内抗肿瘤作用研究

目的:研究美味猕猴桃根的乙酸乙酯提取物(Actinidia deliciosaethyl acetate extracts,ADEE)和正丁醇提取物(Actinidia deliciosan-butanol extracts,ADBE)体内抗肿瘤作用。方法:建立S180小鼠肉瘤和H22肝癌腹水瘤模型,观察乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对S180荷瘤小鼠肉瘤生长的抑制作用和对H22肝癌腹水瘤小鼠生命的延长作用,并观察其对胸腺和脾脏免疫器官重量的影响。结果:乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对S180实体瘤的生长有显著的抑制作用(P<0.05,P<0.01),能够明显延长H22肝癌腹水瘤小鼠生命存活时间(P<0.05,P<0.01),并具有一定的免疫促进作用。结论:美味猕猴桃根的乙酸乙醇提取物和正丁醇提取物在小鼠体内具有明显的抗肿瘤作用。

山梨猕猴桃根提取物的体外抗肿瘤活性研究

目的 :用体外细胞培养法观察山梨猕猴桃根提取物乙醇浸膏正丁醇溶解部分对肿瘤细胞株生长的抑制作用。方法 :采用MTT法、细胞集落形成法、生长曲线法测定山梨猕猴桃根提取物乙醇浸膏正丁醇溶解部分对白血病细胞株L12 10和P3 88D1、宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC790 1、黑色素瘤细胞株B16、神经性肿瘤细胞株NG10 8-15、人肝癌细胞株Hele740 4的生长抑制情况。结果 :山梨猕猴桃根乙醇浸膏正丁醇溶解部分对 7类肿瘤细胞株生长均有抑制作用 ,MTT法抑制率在 3 0 %以上 ,细胞集落形成法抑制率在5 0 %以上 ,细胞生长曲线图提示其对肿瘤细胞生长也有较好抑制作用。结论 :山梨猕猴桃根乙醇浸膏正丁醇溶解部分在体外具有较好的抗肿瘤活性。

余甘子叶化学成分没食子酸对人肝癌BEL-7404细胞株凋亡的影响

目的:探讨余甘子叶化学成分没食子酸对人肝癌细胞株BEL-7404凋亡的影响。方法:采用MTT法测定余甘子叶化学成分没食子酸在体外对BEL-7404细胞增殖的影响;普通光学显微镜、倒置相差显微镜和荧光显微镜观察余甘子叶化学成分没食子酸作用BEL-7404细胞后的形态学变化;AnnexinV/PI双标记法流式细胞术检测余甘子叶化学成分没食子酸诱导BEL-7404细胞早期细胞凋亡的情况;Tunel法检测BEL-7404细胞的晚期凋亡情况及其凋亡率。结果:MTT法和显微镜观察显示余甘子叶化学成分没食子酸能不同程度抑制BEL-7404细胞的增殖,可致细胞形态学改变,出现典型的凋亡特征;AnnexinV/PI双标记法检测显示早期凋亡细胞随作用时间的延长而增加,Tunel法检测晚期凋亡细胞,其凋亡率亦随作用时间的延长而增大。结论:余甘子叶化学成分没食子酸能抑制BEL-7404细胞的增殖并诱导其产生凋亡,其对BEL-7404细胞的凋亡影响呈时间依赖性。

夜香树提取物体外抗肿瘤作用的实验研究

为探讨夜香树(CN)不同提取物体对体外培养的肿瘤细胞的作用,采用系统溶剂法提取CN皂苷和多糖,采用MTT法、细胞集落形成法、生长曲线法观察CN皂苷和多糖对宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901、人肝癌细胞株Bele7404的生长抑制情况,结果发现CN皂苷和多糖对人胃癌细胞株SGC7901、宫颈癌细胞株Hela、肝癌细胞株Bele7404、等3种肿瘤细胞均有明显的抑制作用:在终浓度为62.5μg/mL范围,CN皂苷和多糖对上述3种肿瘤细胞的抑制率均大于80%,细胞抑制率均有明显的剂量依赖性,IC50均小于20μg/mL。CN皂苷和多糖对宫顶癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901、人肝癌细胞株Bele7404细胞有显著的抗增殖作用,其抗增殖作用呈明显的剂量依赖关系。

三七总皂苷对大脑基底核损伤动物模型大脑神经元突触素的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对大脑基底核损伤动物模型突触素(SYP)损害的保护作用。方法:以D-半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸(IBA)定位注射损毁双侧大脑Meynert基底核建立老年性痴呆(AD)大鼠动物模型,利用免疫组织化学方法检测大脑切片突触素SYP免疫反应活性。结果:PNS能明显减轻由D-半乳糖损害和鹅膏蕈氨酸损毁导致的大脑突触素SYP免疫反应活性水平。结论:PNS对AD动物模型大脑神经元突触素SYP的损害具有保护作用。

三七总皂苷对老年性痴呆动物模型快速老化小鼠大脑Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)表达的影响

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对快速老化小鼠SAMP8大脑Aβ1-40、Aβ1-42表达的影响。方法:采用免疫组织化学方法,随机选取快速老化小鼠大脑顶叶皮层、海马周围白质连续五个视野在高倍显微镜下观察,并计数五个视野下Aβ1-40、Aβ1-42免疫阳性细胞的平均个数。结果:PNS能明显减少快速老化小鼠大脑Aβ1-40、Aβ1-42免疫阳性神经元的数量。结论:PNS对SAMP8小鼠大脑Aβ1-40及Aβ1-42的表达有明显的抑制作用。

三七总皂苷对阿尔茨海默病大鼠脑胆碱能神经的保护作用(英文)

背景:现代医学目前对阿尔茨海默病尚无有效的治疗方法,三七总皂苷治疗阿尔茨海默病已引起重视和关注,但其作用机制仍不十分清楚。目的:观察具有化瘀止血、活血定痛功效的三七总皂苷对阿尔茨海默病动物模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用。设计:完全随机分组设计,对照试验。单位:广西中医学院神经科学研究所。材料:实验于2003-06/2005-04在广西中医学院中药药效研究实验室完成,选用清洁级健康Wistar大鼠90只,雌雄各半。其中15月龄老年鼠75只,3月龄青年鼠15只。方法:实验于2003-06/2005-04在广西中医学院中药药效研究实验室(广西重点实验室)完成。①选用清洁级健康Wistar大鼠90只,雌雄各半。其中15月龄老年鼠75只,3月龄青年鼠15只。设3月龄15只为青年对照组。于15月龄75只中随机抽取15只作为老年对照组。对其余60只大鼠进行造模。以D-半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸损毁双侧大脑Meynert基底核建立阿尔茨海默病大鼠模型。青年对照组和老年对照组均在相同条件下以生理盐水作平行对照。②2周后将存活的造模大鼠随机分为4组:模型组,三七总皂苷高、低剂量组和石杉碱甲组,每组12只。三七总皂苷高、低剂量组分别按200和100mg/kg灌胃三七总皂苷(云南玉溪维和制药厂生产),1次/d;石杉碱甲组按0.3mg/kg灌胃给药,1次/d,连续4周;模型组、青年对照组和老年对照组以等体积的生理盐水灌胃,连续4周。③给药结束后行大脑组织病理切片,利用免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰基转移酶免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变。应用IBAS图像分析系统对胆碱乙酰转移酶免疫阳性神经元进行图像分析处理,测定胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均截面积和平均吸光度(A值);用显微镜测微尺测定计算胆碱乙酰转移酶阳性神经元数目。④采用单因素方差分析进行计量资料间差异比较。主要观察指标:三七总皂苷对阿尔茨海默病大脑胆碱能神经元分布和胆碱乙酰基转移酶的影响。结果:老年大鼠75只和青年大鼠15只均进入结果分析。①青年对照组胆碱乙酰转移酶免疫阳性神经元最多,免疫阳性物质染色最深;三七总皂苷高剂量组免疫阳性神经元明显多于石杉碱甲组和模型组;模型组免疫阳性神经元较其他各组的神经元小,且数目明显减少,胞体的轴突及树突变短。②基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞数:模型组明显少于其他各组(P<0.05),三七总皂苷低剂量组、石杉碱甲组、模型组明显少于老年对照组(P<0.05),石杉碱甲组、模型组明显少于三七总皂苷高、低剂量组(P<0.05),青年对照组明显高于其他各组(P<0.05)。基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均A值:变化与各组免疫阳性细胞数变化基本相同。基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均截面积:三七总皂苷低剂量组和模型组明显小于青年对照组(P<0.05),其他各组间差异不明显(P>0.05)。结论:三七总皂苷对老年性痴呆大鼠动物模型大脑胆碱能神经元具有较强的保护作用,通过改善和修复受损神经元而提高细胞存活的数量和质量、提高胆碱乙酰转移酶的含量和活性,从而保护和改善中枢胆碱能系统的功能,发挥抗老化、抗痴呆的作用。