运输应激对山羊心的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90表达的影响

运用HE染色法、透射电镜技术、免疫组织化学、免疫印迹和ELISA等方法,探讨不同运输时间对山羊(Capra hircus)心的病理损伤及对热休克蛋白表达的影响,分析公路运输应激2、6 h条件下山羊心的显微结构、超微结构及HSP27、HSP70、HSP90的定位和表达量的变化情况。结果表明运输应激组山羊心肌纤维有程度不一的弥漫性颗粒变性,细胞内线粒体肿胀、破裂,间质水肿、出血、炎性细胞浸润,毛细血管扩张、充血,运输6 h组的病变更严重。HSP27、HSP70、HSP90主要在心肌细胞的细胞质中表达,HSP27和HSP90在细胞核中也有表达,三种蛋白在不同区域的心肌纤维和心肌细胞中分布不均。与对照组相比,运输应激2 h组山羊心HSP27蛋白表达量显著升高,运输应激6 h组HSP27表达量下降;与对照组相比,运输应激2和6 h组HSP70、HSP90蛋白表达量均显著或极显著升高。总之,运输应激山羊心组织细胞发生了病理损伤,心肌细胞急性变性十分明显,运输应激6 h组心肌细胞变性更严重,运输后HSP27、HSP70和HSP90蛋白表达量发生了明显变化,与心的应激损伤存在一定的关联。

运输应激对小鼠肠道的病理损伤及Bcl-2和Bax表达的影响

为了探究运输应激对小鼠小肠结构和Bcl-2和Bax表达的影响,本研究以16只ICR小鼠为试验对象,将其随机分为对照组(24℃环境下饲养,除了禁食禁水外不做任何处理)和处理组(人工模拟运输应激,处理条件为35℃、160 r/min摇床处理2h),采集十二指肠、空肠和回肠,HE染色观察小肠病理变化,同时采用免疫组织化学和Western Blot探讨运输应激对小鼠肠道Bcl-2和Bax表达的影响。结果表明:与对照组相比,处理组小鼠小肠组织形态结构损害明显,表现为小肠绒毛断裂、小肠黏膜细胞和隐窝细胞脱落以及淋巴细胞浸润;免疫组化定位发现,对照组Bcl-2和Bax表达强度不高,处理组Bcl-2在损伤的肠黏膜上皮细胞中高表达,Bax在肠腺细胞胞质中高表达;与对照组相比,处理组十二指肠和回肠Bcl-2和Bax的表达量增加(P<0.05),十二指肠Bcl-2/Bax比值降低(P>0.05),空肠和回肠Bcl-2/Bax比值升高(P>0.05)。综上,运输应激会破坏肠道结构的完整性,运输后肠道Bcl-2和Bax蛋白的表达发生变化,表明运输应激对肠道的损伤作用与细胞凋亡途径有关,通过Bcl-2和Bax 2种蛋白进行调节。

运输应激对山羊小肠黏膜结构及其免疫相关细胞数量的影响

为研究运输应激对山羊小肠黏膜结构及免疫状态的影响,试验将18只健康赣西山羊随机平均分成3组,即对照组、2 h运输处理组和6 h运输处理组,采用苏木精-伊红(HE)、甲苯胺蓝-高锰酸钾(MTB)、过碘酸-雪夫氏(PAS)3种染色方法及图像分析法研究不同处理山羊小肠黏膜结构及免疫相关细胞数量的变化。结果表明:运输处理组山羊小肠绒毛高度/隐窝深度极显著小于对照组;与对照组相比,运输处理组山羊各段小肠绒毛上皮内淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞数量均极显著增加。综上,说明短时间和长时间运输应激均对山羊小肠黏膜结构及免疫状态有明显影响。

运输应激对山羊免疫器官的病理损伤及热休克蛋白表达的影响

本试验旨在研究运输应激对山羊免疫器官的病理损伤及热休克蛋白表达的影响。选取12只体质量相近的健康公山羊为实验动物,随机分为3组,对照组、运输应激2 h组和运输应激6 h组,以速度35~45 km/h模拟公路运输。运输结束后,立即采集所有山羊淋巴结和脾脏,应用HE染色、醋酸铀枸橼酸铅染色、免疫组织化学和Western blot等方法,分析运输应激山羊淋巴结和脾脏的病理变化及HSP27、HSP70和HSP90等3种热休克蛋白的表达情况。光镜观察显示,运输应激2 h组山羊淋巴结和脾脏均出现急性病理变化,淋巴小结和脾小结增生明显,淋巴结的髓索变粗,髓窦中有淡红色红染物质,脾脏红髓的红细胞急剧增多;运输应激6 h组淋巴细胞胞核出现核碎片,脾脏红髓的红细胞比2 h组有所减少。电镜观察发现,淋巴结和脾脏的淋巴细胞病变明显,发生凋亡或坏死。免疫组化显示,在淋巴结和脾脏中,HSP27主要分布在弥散淋巴组织,HSP70和HSP90主要分布在淋巴小结或脾小结。Western blot结果显示,与对照组相比,运输应激2h组与6h组淋巴结和脾脏中HSP90表达量分别显著和极显著升高(P<0.05,P<0.01),运输应激2 h组脾脏HSP27和淋巴结HSP70的表达量都显著升高(P<0.05);与对照组相比,运输应激2 h组和6 h组脾脏HSP70表达量分别下降(P>0.05)和极显著下降(P<0.01)。运输应激对山羊淋巴结和脾脏造成一定的病理损伤,3种热休克蛋白在淋巴结和脾脏都有表达,运输前后和不同运输时间3种热休克蛋白表达量发生了变化。