甲状腺微小乳头状癌术后个体化TSH抑制治疗效果比较

目的观察不同促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone,TSH)抑制水平下甲状腺微小乳头状癌的5年复发/转移率有无区别。方法选取甲状腺微小乳头状癌患者120例,均行手术治疗,术中冰冻病理证实为甲状腺乳头状癌后采用甲状腺全切+患侧中央区淋巴结清扫或甲状腺患侧及峡部切除+患侧中央区淋巴结清扫。术后病理证实为微小乳头状癌。分别对中危组与低危组进行不同水平的TSH抑制治疗,定期复查甲状腺超声,观察约5年。结果至5年左右随访时,中危组观察组与对照组复发/转移情况差异无统计学意义(P>0.05),低危组观察组与对照组复发/转移情况差异也无统计学意义(P>0.05)。结论5年内,对中、低危组甲状腺微小乳头状癌来说,应用药物替代并未增加其术后的复发/转移率。

BALB/c小鼠乳腺癌4T1细胞株移植模型的建立

目的:应用来源于BALB/c小鼠的4T1乳腺癌细胞株建立BALB/c小鼠乳腺癌模型,选择最佳的模型制作方法。方法:90只BALB/c小鼠随机分为3组,每组30只,分别接种1×106ml-1、1×107ml-1、1×108ml-14T1乳腺癌细胞株细胞悬液。每组小鼠再随机分两组分别接种于胸壁和侧腹壁。比较各组的成瘤时间、成瘤率和8周存活率,并用C-erbB-2免疫组化法检查肿瘤病理状态。结果:细胞浓度为1×107ml-1时,肿瘤成瘤率高,生长稳定;4T1细胞不同部位接种不影响成瘤率及生长;C-erbB-2免疫组织化学检查均为阳性。结论:应用1×107ml-1浓度的4T1细胞进行接种是最佳的模型制作方法。

甲状腺全切术对甲状旁腺功能的影响

目的探讨甲状腺全切术后血钙、血镁、血磷和血清甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)水平的变化及意义。方法选取甲状腺全切术患者129例(甲状腺乳头状癌82例,结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤47例),监测所有患者术前和术后30min、1d、3d的血钙、血镁、血磷和血PTH水平;并分析患者性别、年龄、术前促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)水平、术中识别甲状旁腺数和病理类型与术后甲状旁腺损伤所致低钙血症间的关系。结果不同甲状腺全切术组术后血钙、血镁和PTH水平均呈下降趋势,且血钙和血镁水平以术后1d下降最为明显,PTH水平在术后30min即出现明显下降。血钙水平在不同甲状腺全切术组组间、不同时点间差异有统计学意义(P<0.05),在组间·不同时点间交互作用差异无统计学意义(P>0.05)。血镁和PTH水平在不同甲状腺全切术组组间、不同时点间以及组间·不同时点间交互作用差异均有统计学意义(P<0.05)。血磷在不同甲状腺全切术组组间、不同时点间以及组间·不同时点间交互作用差异均无统计学意义(P>0.05)。129例甲状腺全切术患者中又分为血钙正常亚组77例(59.7%),低钙血症无症状亚组31例(24.0%),低钙血症有症状亚组21例(16.3%)。低钙血症有症状亚组和低钙血症无症状亚组乳头状癌检出率高于血钙正常亚组(P<0.05)。血钙正常亚组、低钙血症有症状亚组和低钙血症无症状亚组性别、年龄、术前TSH水平以及术中识别甲状旁腺数差异无统计学意义(P>0.05)。结论手术范围和甲状腺癌可能是术后甲状旁腺损伤的影响因素。甲状腺术后血PTH监测较血钙更敏感。甲状腺术后低钙血症多合并低镁血症,补钙同时应补镁。

miR-221在甲状腺疾病中的表达及意义

目的探讨miR-221在甲状腺疾病穿刺细胞活检组织及外周血中的定量表达及意义。方法 51例甲状腺结节患者采用超声引导下粗针穿刺细胞活检法获取标本,术前抽取外周血标本,采用定量PCR法检测组织及血浆中miR-221的表达水平。结果 miR-221在甲状腺良性结节组织中的表达与周围正常组织差异无统计学意义(P>0.05),miR-221在甲状腺癌组织中的表达明显高于穿刺病灶周围正常组织(P<0.05);miR-221在不同甲状腺癌肿瘤病理分期及有无淋巴结转移方面表达差异有统计学意义(P<0.05)。甲状腺癌组外周血miR-221水平显著高于健康对照组和甲状腺良性病变组(P<0.05)。结论 miR-221高表达与甲状腺癌的恶化过程关系密切,可为甲状腺癌术前诊断和个体化治疗提供新的思路。

重症急性胰腺炎大鼠肾损伤的血清及尿液生化指标变化趋势研究

目的观察重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠肾损伤的血清及尿液生化指标变化趋势。方法选取健康雄性Sprague-Dawley大鼠240只,按照随机数字表随机均分为8组各30只,即SAP不同时间点组(SAP 1h、3h、6h、9h、12h、18h、24h组)和对照组。比较各组大鼠血清淀粉酶(amylase,AMY)、血肌酐(serum creatinine,SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血尿酸(uric acid,UA)以及尿液中肌酐(urine creatinine,UCr)浓度、肾损伤分子(kidney injury molecule,KIM)-1以及β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-acetyl amino glycosidase enzymes,NAG)含量的变化。结果 SAP 1h、3h、6h、9h、12h、18h和24h组SCr、BUN、UA浓度、KIM-1含量和NAG相对浓度均高于对照组,UCr浓度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SAP肾损伤中,肾小管的损伤早于肾小球的损伤。KIM-1和NAG作为判定肾小管损伤的指标,敏感度和特异度均优于Cr、BUN和UA,且能早期诊断SAP时肾损伤。

重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的病理生理变化及机制研究

目的观察重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的病理生理变化并探讨其发生机制。方法选取2008年1月至2009年1月健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠240只,按照随机数字表随机均分为8组,每组30只,即重症急性胰腺炎(SAP)不同时间点组(SAP 1 h、3 h、6 h、9 h、12 h、18 h、24 h组)和对照组。比较各组血清淀粉酶、肺组织湿/干重比、肺髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、肺通透性指数的变化。结果观察组大鼠肺损伤组织评分、肺组织湿干重比以及肺髓过氧化物酶(MPO)水平随着时间的延续逐渐升高,各时间点组均明显高于对照组(P<0.05),观察组肺通透性指数随时间延续呈逐渐降低趋势,均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺组织MPO水平与肺损伤评分存在正相关(r=0.946,P<0.01),肺湿干重比与肺损伤评分呈正相关(r=0.879,P<0.01),肺通透性指数与肺损伤评分存在负相关(r=-0.859,P<0.01)。结论重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的损伤程度随SAP病程延长而逐渐增加,肺组织MPO水平持续升高。

微小RNA-221对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响及其机制

目的观察甲状腺癌(TC)细胞中微小RNA-221(miR-221)对第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)的调控作用,及对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响。方法收集河北医科大学第二医院普外科2018年4月至2019年12月30例甲状腺乳头状癌组织标本。应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测甲状腺癌及癌旁组织中miR-221和PTEN的表达;将miR-221模拟物(mimics)染到TPC-1细胞中,应用双荧光素酶报告基因实验观察miR-221对PTEN的调控作用;同时,将过表达PTEN质粒与miR-221 mimic共转染至TPC-1细胞,然后应用Transwell细胞侵袭实验检测miR-221和PTEN表达变化对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响,组间比较采用t检验。结果荧光定量PCR结果显示,miR-221在甲状腺癌组织中的表达水平(4.12±0.09)明显高于癌旁组织表达水平(1.32±0.06),差异有统计学意义(t=18.320,P<0.01);并且miR-221与PTEN mRNA的表达水平呈负相关(r=-0.429,P<0.05);miR-221 mimic转染组PTEN相对荧光素酶活性(0.35±0.04)明显低于对照组(1.05±0.03,t=12.120,P<0.05),差异有统计学意义;甲状腺癌细胞转染miR-221 mimic组侵袭细胞数(352.1±37.2)明显高于对照组侵袭细胞数(189.7±23.1,t=3.135,P<0.01),差异有统计学意义;而共转染PTEN过表达质粒后,甲状腺癌侵袭细胞数(165.0±16.2)与阴性对照组(168.7±17.6)比较,差异无统计学意义(t=1.060,P>0.05)。结论miR-221能够促进甲状腺癌细胞的侵袭能力,其作用机制可能与靶向抑制PTEN的表达有关。

微小RNA-630靶向调控锌指转录因子影响甲状腺癌细胞侵袭能力

目的观察甲状腺癌(TC)细胞中微小RNA-630(miR-630)对上皮-间充质转化(EMT)标志物锌指转录因子(Slug)表达的影响,及对细胞侵袭能力的影响。方法收集河北医科大学第二医院普外科2018年1月至2019年12月之间的40例乳头状甲状腺癌及其癌旁标本。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法检测甲状腺癌及其癌旁组织中miR-630的表达水平;将miR-630模拟物(mimics)转染至人乳头瘤状甲状腺癌细胞(TPC-1)细胞中,应用荧光定量PCR的方法观察Slug基因的表达水平,使用双荧光素酶报告基因实验观察miR-630对Slug基因的调控作用;同时,将过表达Slug质粒与miR-630 mimics共转染至TPC-1细胞,应用Transwell细胞侵袭实验观察miR-630和Slug表达变化对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响,组间比较采用t检验。结果miR-630在乳头状甲状腺癌组织中的表达水平为(1.13±0.07),其表达水平明显低于癌旁组织表达水平(5.33±0.08),差异有统计学意义(t=15.472,P<0.05);miR-630 mimics上调甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中miR-630后,Slug mRNA表达水平(0.48±0.09)明显低于对照组细胞(1.03±0.07,t=7.132,P<0.05),差异有统计学意义;miR-630 mimics与Slug 3’非翻译区野生型共转染组荧光素酶活性明显低于对照组(0.38±0.03,t=13.021,P<0.05),差异有统计学意义。而miR-630 mimics与Slug 3’非翻译区突变型共转染组,荧光素酶活性却无明显变化(1.08±0.02比1.02±0.03,t=1.122,P>0.05),差异无统计学意义;miR-630 mimics组侵袭细胞数(241.3±42.4)明显低于对照组侵袭细胞数(467.5±51.7),差异有统计学意义(t=3.214,P<0.05);miR-630 mimics和Slug过表达质粒共转染组细胞的侵袭细胞数(411.6±28.3)与阴性对照组(NC,418.3±31.2)组比较,差异无统计学意义(t=1.131,P>0.05)。结论miR-630能够通过靶向抑制Slug的表达,抑制甲状腺癌细胞的侵袭能力。

促甲状腺激素受体在分化型甲状腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨促甲状腺激素（TSH）受体在分化型甲状腺癌中的表达及意义.方法 采用免疫组化染色检测74例分化型甲状腺癌患者和28例结节性甲状腺肿患者甲状腺组织中TSH受体的表达,分析其与分化型甲状腺癌患者TNM分期和淋巴结转移的关系.结果 TSH受体在结节性甲状腺肿组织中的阳性表达率为89.3％,明显高于分化型甲状腺癌组织（55.4％；x2=10.21,P＜0.05）.TSH受体在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期分化型甲状腺癌组织中的阳性表达率分别为75.9％、47.8％、38.9％和25.0％,随着临床分期的升高,阳性表达率逐渐下降.统计学分析的结果显示,TSH受体的表达与分化型甲状腺癌的TNM分期相关（P＜0.05）,而与淋巴结转移无关（P＞0.05）.结论 TSH受体在分化型甲状腺癌组织中的阳性表达率较低,且随着TNM分期的增加,TSH受体的阳性表达率逐渐下降.TSH受体表达水平的检测可为分化型甲状腺癌患者术后进行TSH抑制治疗提供依据.

甲状腺癌发生与EB病毒感染的关系

目的 探讨甲状腺癌发生与EB病毒（EBV）感染的相关性.方法 选取155例甲状腺癌患者手术切除标本为研究对象,根据WHO分类进行分组,并以癌旁正常甲状腺组织为对照,应用免疫组织化学法和原位杂交法检测各组EBV的潜伏膜蛋白-1（LMP-1）和EB病毒基因编码的核糖核酸（EBER-1）的表达.结果 LMP-1和EBER-1在甲状腺癌组织中的阳性表达率分别为41.94％ （65/155）和56.13％（87/155）,明显高于在正常甲状腺组织中的20.00％（31/155）和27.10％ （42/155）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.LMP-1和EBER-1在乳头状癌表达阳性率分别为52.13％和60.64％,高于其他病理类型,差异均有统计学意义（P＜0.05）.原位分子杂交技术测定EBER-1的阳性率为56.13％,高于免疫组织化学技术检测LMP-1的阳性率（41.94％）,两种方法检测甲状腺癌组织中EBV感染的结果差异有统计学意义（P＜0.05）,且两种检测方法明显相关（r=0.70）.结论 EBV感染与甲状腺癌的发生发展明显相关,特别是与乳头状癌的关系更为密切.

微小RNA-122通过调控沉默信息调节因子1的表达抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中微小RNA(miRNA,miR)-122对组蛋白脱乙酰酶沉默信息调节因子1(SIRT1)基因的调控作用,及对甲状腺乳头状癌细胞增殖能力的影响.方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)观察甲状腺乳头状癌及癌旁组织中miR-122的表达并分析其与SIRT1表达的相关性.将miR-122 mimics转染人甲状腺乳头状癌细胞TPC-1后,应用双荧光素酶报告基因实验观察miR-122对SIRT1基因的调控作用;应用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验观察miR-122对甲状腺癌细胞增殖的影响.同时,将过表达SIRT1质粒共转染至TPC-1细胞,然后应用CCK-8法检测miR-122和SIRT1表达变化对甲状腺乳头状癌细胞增殖能力的影响.应用GraphPad Prism 7.0统计软件分析,相关性分析采用Spearman等级相关分析,两样本均数间的比较采用Student't检验.结果在人甲状腺乳头状癌组织中miR-122的表达水平(1.20±0.15)明显低于癌旁组织(3.06±0.26),差异有统计学意义(t=5.972,P<0.01).相关性分析结果表明miR-122与SIRT1 mRNA的表达呈负相关(r=-0.621,P<0.01).miR-122 mimics转染组SIRT1相对荧光素酶活性与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(t=17.730,P<0.01).miR-122 mimics组细胞增殖能力较对照组显著降低,差异有统计学意义(t=3.991,P<0.01).而共转染SIRT1过表达质粒后,miR-122 mimics对甲状腺乳头状癌细胞的增殖能力的抑制出现逆转.结论miR-122可抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖能力,其作用机制可能与靶向抑制SIRT1的表达有关.

微小RNA-204抑制E盒结合锌指蛋白1调控上皮-间充质转化途径影响甲状腺癌细胞侵袭能力的机制

目的观察甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中微小RNA(miR)-204对E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)表达的影响,及对上皮-间充质转化(EMT)及细胞侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测甲状腺乳头状癌及其癌旁组织中miR-204的表达;将miR-204 mimics转染到甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中,采用荧光定量PCR的方法检测ZEB1、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的表达水平,应用双荧光素酶报告基因分析实验观察miR-204对ZEB1基因表达的调控作用;同时,将miR-204 mimics与过表达ZEB1质粒共转染至人甲状腺乳头状癌细胞-1(TPC-1)细胞中,采用Transwell细胞侵袭实验观察miR-204和ZEB1表达变化对甲状腺乳头状癌细胞侵袭能力的影响。组间比较采用t检验。结果miR-204在甲状腺癌乳头状组织中的表达水平低于癌旁正常组织中的表达水平,差异有统计学意义(1.14±0.08比3.52±0.07,t=13.250,P<0.05);miR-204 mimics转染组侵袭细胞数低于对照组侵袭细胞数[(149.4±20.2)个比(268.6±30.2)个,t=3.402,P<0.05],差异有统计学意义;miR-204 mimics转染组细胞E-cadherin表达水平高于对照组细胞(0.98±0.17比0.35±0.12,t=2.903,P<0.05),差异有统计学意义,N-cadherin和vimentin表达量低于对照组细胞(0.29±0.11比0.89±0.10,t=2.974,P<0.05;0.30±0.13比0.93±0.15,t=2.859,P<0.05),差异有统计学意义;双荧光素酶报告基因分析结果显示,miR-204 mimics转染组ZEB1的相对荧光素酶活性低于对照组(0.23±0.06比1.12±0.04,t=12.460,P<0.05),差异有统计学意义;甲状腺癌乳头状癌TPC-1细胞中转染miR-204 mimics组ZEB1基因的表达水平低于对照组(0.41±0.06比1.10±0.07,t=6.783,P<0.05),差异有统计学意义;miR-204 mimics与ZEB1过表达质粒共转染后,甲状腺癌细胞的侵袭细胞数与对照组比较差异无统计学意义[(224.4±23.5)个比(230.0±28.5)个,t=1.140,P>0.05],差异有统计学意义。结论miR-204能够通过靶向抑制ZEB1的表达,从而抑制细胞发生上皮间质转化进而抑制甲状腺乳头状癌细胞的侵袭能力。