外源N^(6)-甲基腺嘌呤掺入对细胞mRNA表达的影响

N^(6)-甲基腺嘌呤(m^(6)A)是一种真核细胞中最广泛存在且可逆的内源mRNA修饰,它在决定RNA命运中起着至关重要的作用.本文发现外源m^(6)A可以通过补救合成途径掺入到细胞mRNA,并评估了外源m^(6)A掺入mRNA后所产生的生物学效应.首先,发现用m^(6)A核苷处理HeLa细胞会显著改变细胞的形态和活力;然后,合成了同位素标记的d_(3)-m^(6)A(N^(6)-甲基-d_(3)-腺苷),并采用质谱法检测了不同处理时间下细胞mRNA中d_(3)-m^(6)A的掺入率;随后,使用RNA测序(RNA-seq)研究外源m^(6)A掺入的生物学效应.结果表明,掺入外源m^(6)A后的细胞有数千个基因产生差异表达,并且这些差异表达的基因在核糖体生物发生、mRNA代谢过程和细胞形态发生分化等途径中显著富集.研究结果表明,外源m^(6)A可以通过代谢途径掺入细胞内源mRNA中,并可以影响细胞基因表达.