全反式维甲酸对M2型巨噬细胞极化的影响

目的建立M2型巨噬细胞极化的体外模型,研究全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)对白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)诱导的M2型巨噬细胞极化的影响。方法选取8周龄C57BL/6雌性小鼠。经腹腔灌洗贴壁纯化后,将小鼠腹腔巨噬细胞在体外进行原代培养。小鼠随机分为空白对照组、M2型极化模型组、DMSO对照组和ATRA处理组。白细胞介素-4(IL-4,20 ng/mL)诱导小鼠腹腔巨噬细胞构建M2型巨噬细胞极化模型,45μg/mL ATRA孵育24 h。在倒置显微镜下观察细胞形态学表现,采用Annexin V-PE/7-AAD双染法测验ATRA对巨噬细胞凋亡的影响,流式细胞仪检测F4/80+CD206+M2型巨噬细胞的表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测白细胞介素-10(IL-10)、精氨酸酶1(Arg1)和转化生长因子-β1(TGFβ1)的mRNA表达。结果倒置显微镜下观察,对照组可见细胞主要呈圆形或椭圆型,M2极化模型组可见细胞主要呈圆盘状;与M2极化模型组比较,ATRA处理组可见圆盘状细胞增多变大;各组细胞间巨噬细胞凋亡率比较无明显差异(P>0.05);与空白对照组相比较,M2极化模型组中F4/80+CD206+M2表型巨噬细胞表达水平提高(P<0.01),M2极化模型组中Arg1,IL-10,TGF-β1 mRNA的表达增高(P<0.01);与M2极化模型组相比较,ATRA处理组中F4/80+CD206+M2表型巨噬细胞表达水平显著升高(P<0.01),ATRA处理组中IL-10、Arg1和TGFβ1 mRNA的表达水平显著升高(P<0.01)。结论ATRA(45μg/mL)对巨噬细胞凋亡没有明显影响,并且促进巨噬细胞向M2表型极化。