PPi对17℃保存猪稀释精液质量及AI水平的影响

为了研究无机焦磷酸盐（PPi）对17℃保存的猪稀释精液质量和精子顶体酶抑制剂（AI）水平的影响,试验选择2周岁长白猪精液分为4组,对照组精液保存液中不添加PPi,试验1组、试验2组、试验3组分别在精液保存液中添加10,50,100μmol/L的PPi,在17℃保存第1,2,3,4天采用精子质量分析仪（CASA）、考马斯亮蓝、低渗肿胀（HOST）法检测精子活率、顶体膜及质膜完整性,采用SDSPAGE及Western-blot法分析精子的AI水平。结果表明：保存2～4 d,试验2组、试验3组精子活率、顶体膜和质膜完整性均显著高于对照组和试验1组（P〈0. 05）;保存3～4 d,试验1组、试验2组精子的AI水平显著高于对照组（P〈0. 05）。说明在精液保存液中添加PPi能显著改善17℃保存猪稀释精液的质量。

甲基-β-环糊精载胆固醇对GV期猪卵母细胞冻融后体外成熟及其受精能力的影响

本实验旨在探究甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)对GV期猪卵母细胞冻融后体外成熟培养后成熟率、凋亡蛋白表达、透明带硬化时间及精-卵结合能力的影响。采用0(对照)、0.5、5、10 mg/mL CLC进行处理,共4组,采用Western blot方法分析GV期猪卵母细胞冻融体外成熟培养后凋亡蛋白的表达量。通过Hoechst染色方法检测不同组别的精卵结合能力。结果表明:5 mg/mL CLC处理组GV期冻融的猪卵母细胞体外成熟率高于对照组和0.5 mg/mL CLC处理组(P<0.05),但与10 mg/mL CLC处理组相比差异不显著;与对照组和0.5 mg/mL处理组相比,5 mg/mL CLC处理组显著降低了GV期冻融的猪卵母细胞体外成熟培养后Cleaved Caspase-3蛋白表达量(P<0.05),但与10 mg/mL CLC处理组差异不显著;与对照组和0.5、10 mg/mL CLC处理组相比,5 mg/mL CLC处理组减少了GV期冻融的猪卵母细胞体外成熟培养后透明带硬化时间(P<0.05);与对照组和0.5、10 mg/mL处理组相比,5 mg/mL CLC处理组提高了GV期冻融的猪卵母细胞体外成熟培养后精-卵结合能力(P<0.05)。综上表明,在玻璃化冷冻液中添加5 mg/mL CLC可显著减少GV期猪卵母细胞在冷冻保存过程中受到的低温损伤。