长链非编码RNA KIAA0125对急性髓系白血病U937细胞增殖和凋亡的影响

背景:U937细胞可以作为急性髓系白血病细胞模型,用于研究急性髓系白血病的生物学特性、信号通路和治疗靶点。目前虽然已有研究报道长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病中呈高表达,但其在U937细胞中的生物学功能尚不清楚,在急性髓系白血病发生发展中的作用机制有待进一步阐明。目的:探讨长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病患者外周血中的表达水平及对U937细胞增殖、凋亡的影响。方法:RNA-seq分析急性髓系白血病患者骨髓单核细胞样本,筛选得到差异表达基因——长链非编码RNA KIAA0125,利用qRT-PCR检测长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病患者外周血中的表达进行验证,通过GEPIA数据库统计分析173例急性髓系白血病患者和70例健康人骨髓细胞中长链非编码RNA KIAA0125 mRNA的表达与预后的关系。随后使用重组慢病毒技术及CRISPR/Cas9-SAM技术分别构建敲低/过表达长链非编码RNA KIAA0125的U937细胞系,qRT-PCR检测长链非编码RNA KIAA0125敲低/过表达效率。接下来,使用CCK-8实验、流式细胞术及Western blot检测敲低/过表达长链非编码RNA KIAA0125对U937细胞增殖、凋亡的影响。最后,使用Western blot检测敲低/过表达长链非编码RNA KIAA0125对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响。结果与结论:①qRT-PCR结果显示长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病患者外周血中呈高表达,GEPIA数据库显示长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病患者骨髓细胞中呈高表达,高表达组具有更差的生存期;②敲低组长链非编码RNA KIAA0125的敲低效率为70%,成功构建了稳定敲低长链非编码RNA KIAA0125表达的U937细胞,过表达组长链非编码RNA KIAA0125的表达是Vector组的4倍,成功构建了稳定过表达长链非编码RNA KIAA0125的U937细胞;③敲低长链非编码RNA KIAA0125抑制U937细胞的增殖并促进其凋亡,过表达长链非编码RNA KIAA0125则促进U937细胞的增殖但对U937细胞的凋亡无显著影响;④敲低长链非编码RNA KIAA0125抑制Wnt/β-catenin信号通路活性,而过表达长链非编码RNA KIAA0125则激活Wnt/β-catenin信号通路。结果表明,长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病外周血中呈高表达,其可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响U937细胞的增殖和凋亡,可能是急性髓系白血病的潜在预后标志物。

甲胎蛋白异质体和放免法测定对肝癌诊断价值的比较

采用国产扁豆凝集素(LCA)作亲和交叉免疫电泳,检测24例肝脏病人血清AFP糖链异质体,并与AFP 放免法测定结果作比较。结果表明,22例经手术病理或B 超和CT 证实为原发性肝癌患者,AFP 放免法测定的阳性率为81.8%,而亲和交叉免疫电泳法测定的阳性率为90.9%。本组4例原发性肝癌患者,AFP 放免法测定为阴性,而AFP 的异质体检测为阳性。因此认为AFP 的异质体检测可提高原发性肝癌的检出率,为AFP 轻度升高的肝癌患者提供早期诊断及治疗时机,并可鉴别诊断AFP 浓度升高的良性肝病患者。

甲状腺疾病患者300例甲状腺过氧化物酶抗体的临床变化

目的:观察不同甲状腺疾病以及自身免疫性甲状腺疾病(AITD)不同临床阶段患者血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)浓度的变化,探讨其临床运用价值。方法:采用化学发光法检测300例甲状腺疾病患者血清TPOAb浓度,包括Graves病(GD)120例、桥本病(HT)120例、亚急性甲状腺炎20例、甲状腺结节40例。结果:①不同甲状腺疾病患者血清TPOAb浓度均超过正常值范围,组间存在差异,尤以HT组TPOAb浓度和阳性率最高;②AITD患者不同临床状态血清TPOAb浓度存在动态变化。临床缓解期的GD和HT患者TPOAb浓度均低于疾病初发者,但差异无显著性(P>0.05)。结论:不同甲状腺疾病患者均可出现TPOAb的异常,尤以HT患者显著。TPOAb的降低滞后于临床甲状腺功能的恢复。其临床检测有助于AITD的诊断和疗效评估。

南京市1928例单位体检人群AFP、CEA、PSA检测分析

目的:调查南京市及周边地区单位体检人群血清AFP、CEA、PSA含量以及在男女性别之间的差异。方法:根据年龄段把体检人群分成5组:组Ⅰ485例(年龄21～40岁);组Ⅱ525例(年龄>40～50岁);组Ⅲ398例(年龄>50～60岁);组Ⅳ352例(年龄>60～70岁);组Ⅴ168例(年龄>70～88岁)。使用酶放大化学发光技术对各组别体检人群进行检测,所有组别结果和组Ⅰ相比看有否显著差异。结果:同性别间对比,除组Ⅱ女性CEA和男性PSA没有显著差异外(P>0.05),其余各组均有显著差异;各组男女之间AFP、CEA血清含量相比除组ⅤAFP、CEA和组ⅣCEA血清含量男女之间没有差异(P>0.05),其余各组男女AFP、CEA血清含量均有明显差异(P<0.01)。结论:建议正常人群每年做定期体检,并建立适合不同年龄和性别的参考值。

2型糖尿病患者垂体-肾上腺轴的变化与胰岛素抵抗

目的探讨2型糖尿病患者早期垂体-肾上腺轴的改变与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法采用化学发光等方法测定67例新诊断的2型糖尿病患者和33名志愿者(对照组)的血皮质醇(F)和促肾上腺皮质激素(ACTH)(8Am、4Pm和地米抑制后次8Am)以及血清胰岛素(INS)、C肽(C-P)和血糖水平;按HOMA模型计算胰岛素抵抗指数HOM-IR=FINS×FBG/22.5,以此反映2型糖尿病患者IR的情况。结果①2型糖尿病患者8Am血浆F和ACTH、4Pm和地米抑制后次8Am血浆F、血糖、INS、C-P水平以及HOMA-IR均明显高于对照组(P<0.01);②4Pm和地米抑制后次8Am血浆ACTH水平显著低于对照组;③直线相关统计分析显示,皮质醇浓度的升高与空腹血糖升高呈正相关(r=0.48,P<0.01)。与HOMA-IR的升高无直线相关性。结论2型糖尿病患者早期呈现ACTH、皮质醇过度分泌和慢性垂体-肾上腺轴功能紊乱,诱发并加重了糖代谢紊乱和胰岛素抵抗。

TPSA,FPSA,F/TPSA和PAP联检在前列腺癌诊断中的意义

目的 :研究各年龄组正常人血清总前列腺特异性抗原 (TPSA)、游离前列腺特异性抗原 (FPSA)、前列腺酸性磷酸酶 (PAP)和F/TPSA比值的正常值范围以及与年龄的相关性 ,并探讨其联合应用在良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌 (PC)鉴别诊断中的价值。方法 :采用酶放大化学发光法测定 89名正常志愿者、35例PC患者和 82例BPH患者血清TPSA、FPSA和PAP的水平 ,并计算F/TPSA的比值。结果 :4 1岁～ 88岁的正常人血清TPSA和FPSA水平与年龄有显著正相关性 (TPSA/年龄 :r=0 .4 4～ 0 .4 5 ,P <0 .0 1 ;FPSA/年龄 :r =0 .4 9～ 0 .5 1 ,P<0 .0 1 ) ;PC组和BPH组血清TPSA、FPSA和PAP水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 1 ) ,而PC组F/TPSA比值则明显低于BPH组和正常人组 (P <0 .0 1 )。F/TPSA比值的分段研究显示 ,在TPSA轻、中度升高时 ,F/TPSA <0 .1提示PC可能性较大 (88 2 % ) ,而F/TPSA >0 .2 5时 ,表明PC可能性很小 (4 0 % )。结论 :4 0岁以上正常男性血清TPSA和FPSA水平随年龄升高而增加 ,并与年龄呈明显的正相关 ;TPSA。

血清游离PSA和游离／总PSA在前列腺癌诊断中的价值

探讨游离前列腺特异性抗原(FPSA)和游离／总前列腺特异性抗原比值(F／T PSA)在前列腺癌(PC)和良性 前列腺增生(BPH)鉴别诊断中的价值。采用美国DPC公司的酶放大化学发光仪测定89名正常志愿者、85例 PC患者和97例BPH患者血清FPSA和TPSA水平,并计算F／T PSA的比值。结果表明正常男性(41-88岁) 组血清FPSA和TPSA水平与青年组相比明显升高,老年组升高特别明显(P<0．01),直线相关统计分析表明, 年龄与血清FPSA和TPSA水平有显著正相关性(FPSA／年龄:r为0．49-0．51,P<0．01;TPSA／年龄:r为0．44 -0．45,P<0．01);PC组和BPH组血清FPSA、TPSA水平明显高于对照组(P<0．01),而PC组F／T PSA比值 则明显低于BPH组和对照组(P<0．01)。血清TPSA<4．0、4．0-10．0和>10．0μg／L的BPH患者分别占 65．0％、30．9％和4．1％,PC患者分别为5．9％、20．0％和74．1％,经卡方检验,两组间患者的分布差别有极显著 性意义(P<0．01);F／T PSA比值的分段研究显示,在TPSA灰色区,F／T PSA<0．1,提示PC可能性较大 (88．9％),而F／T PSA>0．25时,表明PC可能性很小(6．1％)。提示40岁以上正常男性血清FPSA和TPSA 水平随年龄升高而增加,并与年龄呈明显的正相关;约30．9％的BPH与20．0％的PC患者血清TPSA水平存在 重叠,F／T PSA比值的应用可以明显提高TPSA在灰色区鉴别诊断PC的特异性。

真胰岛素、胰岛素原与睡眠打鼾关系的流行病学研究

目的 研究真胰岛素、胰岛素原与睡眠打鼾的关系。方法 按照随机分层抽样的原则 ,在江苏省邳州市的农村共调查 1193名 35～ 5 9岁的常住居民 ,其中男性 5 30名 ,女性 6 6 3名 ,平均年龄为 4 6 .6 9岁 ,调查其睡眠打鼾情况。应用生物素 -亲和素放大系统为基础的单克隆抗体夹心酶联免疫方法检测真胰岛素、胰岛素原。结果 Spearman相关分析及调整了年龄、性别后的协方差分析结果均显示打鼾的频率与胰岛素原的浓度及心血管危险因素的聚集呈正相关 ,调整了年龄、性别后的协方差分析结果显示 ,真胰岛素的浓度在不同的打鼾组间分布有统计学差异。调整了年龄、性别、体重指数、腰围与真胰岛素后进行的多元逐步Logistic回归分析结果显示胰岛素原是睡眠打鼾的独立危险因素。结论 心血管危险因素聚集、β细胞功能缺陷及高胰岛素原血症、睡眠呼吸障碍等互为因果、相互影响 。

甲状腺疾病与血清骨钙素的关系及其临床意义

观察各种甲状腺疾病治疗前、后血清骨钙素的变化 ,以探讨甲状腺功能异常与骨代谢的关系。本文对2 36例甲状腺疾病患者及 5 2名健康志愿者为对照组 ,采用酶放大化学发光法测定了血清骨钙素 (BGP)、FT3 、FT4、TSH和人甲状腺球蛋白 (HTG)。结果显示 :正常人血清骨钙素水平随着年龄的增高而逐渐降低 ;甲亢患者治疗前BGP浓度明显升高 ;甲减患者治疗前BGP浓度明显低于正常 ,经短期甲状腺素替代治疗后 ,BGP浓度明显高于正常 ;治疗前的亚甲炎患者BGP浓度明显高于对照组 ,用糖皮质激素治疗后 ,BGP浓度反低于正常水平。相关统计表明 ,治疗前、后的甲亢、甲减和亚甲炎患者BGP与FT3 、FT4之间呈明显的正相关 ;甲减患者BGP与TSH呈负相关。实验结果显示甲状腺激素可能直接参与加速骨转换过程 ,并以增加骨吸收过程为显著 ;糖皮质激素可使骨转换率减低 ,骨的形成降低 ,最终都可能导致骨矿丢失。

自身免疫性甲状腺疾病患者血中 TSAb 及 TSBAb 的观察

为了解自身免疫性甲状腺疾病患者体内刺激型及阻断型抗体共存情况，检测了４２７例Ｇｒａｖｅｓ病（Ｇｒａｖｅｓ′ｄｉｓｅａｓｅ，ＧＤ）及１０６例桥本甲状腺炎（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ′ｓｔｈｙｒｏｄｉｔｉｓ，ＨＴ）患者血中甲状腺刺激抗体（ＴＳＡｂ）及甲状腺刺激阻断抗体（ＴＳＢＡｂ）。结果：ＧＤ组及ＨＴ组ＴＳＡｂ、ＴＳＢＡｂ的阳性率分别为９１．６％、７．７％及１４．２％、３７．７％。ＧＤ患者ＴＳＡｂ及ＴＳＢＡｂ均呈阳性者１８例，ＨＴ者两抗体共存的病人为１２例。其中，１４例ＧＤ患者有３例于１～３年内转化为甲减，１例ＨＴ者发展为甲亢，随病变性质的改变，患者血中ＴＳＡｂ及ＴＳＢＡｂ活性亦呈现相应的变化。提示两类抗体活性的消长是甲状腺功能转化的重要原因。

镇痛药、针刺镇痛对佐剂性关节炎大鼠血浆 cAMP 含量的影响

针刺对慢性炎症局部的镇痛作用,已为大量的临床和实验观察所证明。我们也以佐剂性关节炎大鼠的炎症性疼痛为模型,证实了针刺对炎症局部具有明显的镇痛效果。针后,实验动物的中枢神经系统组织内的脑啡肽含量明显增加,说明针刺可能是通过提高体内的内源性吗啡样物质(MLS)含量,兴奋相应的受体而发生镇痛作用的。但针刺与某些兴奋吗啡样受体的镇痛药物不同,它可能是一种多元性自我调节的过程。

甲亢和甲减患者血浆心钠素的检测及临床意义

采用放免法检测61例甲亢和42例甲减患者血浆心钠索（ANH）水平。结果表明：甲亢未治组ANH显著高于甲亢缓解组、甲减未治组、治疗组及正常对照组，ANH水平与血清T3、T4、FT3和FT4存在正相关关系；甲亢缓解组、甲减未治组和治疗组ANH浓度与正常对照组比较无显著性差异，但甲减未治组ANH较甲减治疗组明显降低，提示甲状腺激素可调节ANH的合成和／或分泌，检测ANH对甲状腺功能异常的诊断和治疗效果观察具有一定的参考价值。

人血清生长激素结合蛋白活性的快速测定法及其初步临床应用

利用葡聚糖包裹活性炭分离技术，建立了人血清生长激素结合蛋白（GH-BP）活性快速测定法，并在方法学方面进行了探讨。本法批内CV为4.9％，批间CV为9．6％。结果显示正常男性、女性、儿童及妊娠后期的孕妇的GH-BP水平之间无显著性差异（P＞0．05）；而肝硬化患者和一些生长激素（GH）分泌正常的矮小患儿的GH-BP水平明显降低（P＜0001）。提示人血清GH-BP的测定，对GH不缺乏的矮小儿的临床诊断以及与生长激素受体（GHR）改变有关的疾病研究具有十分重要的意义。

甲状腺疾病患者血清甲状腺刺激抗体的研究

以PEG提取的血清IgG刺激正常人甲状腺细胞cAMP的生成测定TSAb。GD未治组和复发组TSAb活性与阳性率均显著高于GD 缓解组、单纯甲状腺肿组、对照组;GD 缓解组TSAb 活性与阳性率明显降低,但仍高于单纯甲状腺肿组和对照组;后两组TSAb 活性相似,且TSAb 均为阴性。提示TSAb 与GD 的发生和转归密切相关;本法检测TSAb 具有较高的敏感性和特异性。

TSH对正常和甲亢甲状腺细胞cAMP生成的影响

以bTSH刺激体外培养的正常和甲亢甲状腺细胞,通过测定细胞生成环磷腺苷(cAMP)的量,探讨bTSH对两种甲状腺细胞功能的影响。结果显示:正常和甲亢甲状腺细胞释放cAMP的量均随细胞含量、bTSH浓度的增加或细胞培养时间或bTSH刺激时间的延长而增多。在相同实验条件下,两种细胞释放cAMP的值无显著性差异。提示甲亢甲状腺细胞与正常甲状腺细胞相似,对TSH具有良好的反应性。

针刺镇痛对佐剂性关节炎大鼠血浆cAMP含量影响

针刺对慢性炎症局部的镇痛作用,已为大量的临床和实验观察所证明。我们也以佐剂性关节炎大鼠的炎症性疼痛为模型,证实了针刺对炎症局部有明显的镇痛效果。但针刺与某些兴奋吗啡样受体的镇痛药物不同,它可能是一种多元性自我调节的过程,可通过多种机制加强机体的调整功能,达到新的自稳态。在这一过程中血中cAMP的变化可作为观察这一动态的指标,为此我们选用了临床上常用的镇痛药芬太尼与弗哌啶。观察用药后对血中cAMP含量的影响,与针刺镇痛相对照,作为分析研究的实验依据。

子宫内膜癌患者手术前后血清层粘连蛋白水平的变化及临床意义

目的 测定子宫内膜癌患者血清层粘连蛋白 ( laminin,L N)水平及切除肿瘤对其影响。方法 用放射免疫法测定 14例子宫内膜癌、76例内膜正常的妇科良性疾病及 2例内膜增殖症患者血清 L N含量。结果 子宫内膜癌患者血清 L N明显高于内膜正常各良性疾病组 ( P<0 .0 5 )及子宫内膜增殖症组 ;手术切除肿瘤后 ,血清 L N水平显著下降 ( P<0 .0 5 ) ;术前血清 L N水平及术后 L N下降程度均有随内膜癌肌层浸润加深而上升趋势。结论 血清 L N水平与肿瘤的浸润过程可能密切相关 ;观察血清 L N水平及其变化对子宫内膜癌的诊断。

小学生数学意识形成的研究

小学数学教育应该注重培养学生的数学意识,使学生具有良好的数学思维倾向和习惯。根据调查和研究,小学生数学意识的形成受知识与技能、数学思维、数学情感等方面的影响,可以分为准备、产生和巩固三个阶段。具体地,小学生数学意识是学生在数学活动中运用获得的数学知识与技能,抽象出的数学思想方法去解决数学问题而逐步形成、巩固的。最后结合调查和相关理论,本文提出了培养小学生数学意识策略。

妇科恶性肿瘤血清及腹水层粘蛋白测定及临床意义

目的 :测定子宫内膜癌及卵巢癌患者血清层粘蛋白 (laminin,L N)含量及切除肿瘤对其影响。方法 :用放射免疫法测定 14例子宫内膜癌 ,2例子宫内膜增殖症 ,8例卵巢癌 ,76例妇科良性疾病患者术前及部分内膜癌和卵巢癌术后血清 L N含量 ,还测定了 4例卵巢癌腹水中的含量。结果 :子宫内膜癌患者血清 L N明显高于子宫内膜增殖症及其他各良性疾病组 (P<0 .0 5 )且与肌层浸润程度有关 ,卵巢癌血清 L N也明显高于各良性疾病组但统计学分析无差异 ,其腹水 L N明显高于血清 (P<0 .0 5 ) ;手术切除肿瘤后 ,两种恶性肿瘤血清 L N水平均显著下降 (P<0 .0 5 )。结论 :血清及腹水 L N水平与肿瘤的浸润过程密切相关 ;观察其变化对子宫内膜癌及卵巢癌的诊断。

芬太尼-普鲁卡因静脉复合麻醉下消化道肿瘤手术应激反应改变

为观察消化道肿瘤患者在手术中的应激反应,我们在芬太尼-普鲁卡因静脉复合麻醉下对两组(肿瘤和非肿瘤)共20例病人在不同时相的生长素、泌乳素、儿茶酚胺、皮质醇、胰岛素和血糖水平进行了测定,并同时进行了血流动力学改变比较观察。我们发现,消化道肿瘤病人对麻醉和手术的应激反应异常强烈,这与肿瘤病人神经内分泌功能活跃有关。我们认为此类患者应合理调节麻醉用药,避免强烈的应激反应对机体的干扰。