周期性机械拉伸对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响

目的探讨周期性机械拉伸对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)增殖能力的影响。方法实验组细胞在周期性机械拉伸频率为1.0 Hz、拉伸幅度为3%、6%和9%的条件下,分别对RA-FLSs加载2、6和12 h。对照组细胞在保持与实验组培养条件一致的情况下不进行拉伸刺激。机械拉伸后,用流式细胞术和MTS检测细胞的增殖和活性。RT-PCR检测加载后细胞周期调控因子(CyclinD1、CyclinE1、CDK2、P27)在基因水平上的表达变化。结果 6%和9%的拉伸刺激持续作用6、12 h使RA-FLSs增殖和活性显著降低(P<0.05),同时CDK2和CyclinE1的mRNA表达降低,P27 mRNA的表达增高(P<0.05),周期性机械拉伸对CyclinD1表达的影响相对较小。结论周期性机械拉伸对RA-FLSs增殖能力的影响与拉伸强度以及持续的时间有关,6%和9%的机械拉伸刺激可以抑制RA-FLSs的增殖,而这种增殖抑制作用可能是通过调控CyclinE1,CDK2和P27的表达来实现的。本研究对于探讨力学刺激在类风湿性关节炎的发病机制以及临床防治中的作用具有一定意义。

周期性机械拉伸对类风湿关节炎和骨关节炎成纤维样滑膜细胞BMP-2表达的影响

目的研究周期性拉伸对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)和骨关节炎(osteoarthritis,OA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)中骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响,探讨力学刺激在不同病理过程中对滑膜组织的作用。方法在正常条件和炎症条件下使用Flex cell 4000周期性力学加载系统,分别对正常、RA、OA来源的人膝关节FLS施加连续2 h和6 h的6%、0.5 Hz的拉应力,比较测定BMP-2 mRNA表达的差异性。结果 2 h的机械拉伸对3种FLS中BMP-2 mRNA的水平均无显著性影响6,h的机械拉伸能够显著升高RA FLS中BMP-2 mRNA的水平。炎症因子(IL-1β)作用2 h对正常FLS无显著影响,作用6 h使其中BMP-2 mRNA的水平显著升高;IL-1β作用2 h和6 h均使RA FLS中BMP-2 mRNA的水平显著升高,但只有作用2 h才使OA FLS中BMP-2 mRNA的水平显著升高,作用6 h对OA FLS中BMP-2 mRNA的水平无显著影响;炎症因子和力学刺激共同作用2 h使正常和RA FLS中BMP-2 mRNA的水平显著升高,作用6 h使正常、RA、OAFLS中BMP-2 mRNA水平均显著升高。结论正常、RA、OA FLS中BMP-2 mRNA对于力学刺激和炎症因子的响应不同,结果提示在RA和OA发病机制中,炎症因子的影响可能比力学刺激更强;力学刺激和IL-1β共同作用6 h后对OA FLS中BMP-2 mRNA产生协同效应,提示两者联合作用对OA病情发展具有一定作用。