紫外-可见分光光度法测定硫磺氧化锌油中升华硫含量的研究

目的建立硫磺氧化锌油中升华硫的含量测定方法。方法用稀盐酸将硫磺氧化锌油中的氧化锌溶解去除后,再用二氯甲烷-无水乙醇(6∶4)将升华硫溶解,同时配制相应浓度的硫对照品溶液,照紫外-可见分光光度法,在264 nm波长处测定吸光度。结果阴性溶液不干扰本品硫的测定;硫在0.01021~0.03063 mg·mL^(-1)范围内吸光度与浓度呈良好的线性关系(r=0.9997);中间精密度试验中硫含量的RSD为1.77%;平均回收率为100.6%,RSD为0.49%。结论该方法专属性好、重现性好、结果准确,可用于硫磺氧化锌油中升华硫的含量测定。

HPLC法同时检测抗痒醑中苯酚和水杨酸的含量

目的建立HPLC法同时测定抗痒醑中苯酚和水杨酸的含量。方法以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱;以甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶1)为流动相,检测温度30℃;流速1.0 mL/min,溶剂为流动相,进样量20μL。结果苯酚和水杨酸浓度分别在0.04072~0.14252 mg/mL和0.03096~0.10836 mg/mL范围内与峰面积呈现良好线性关系;高中低三个浓度苯酚的平均回收率为100.52%,RSD为0.19%;水杨酸的平均回收率为101.11%,RSD为0.45%。结论该方法简便、快捷、准确度好,可作为本所制剂抗痒醑的质控方法。

探讨医院制剂临床应用现状及发展趋势

目的通过分析和总结广州市皮肤病防治所2014年-2018年制剂临床使用情况,探讨医院制剂的发展现状、面临的困难及相应措施。方法采用比较分析方法对2014年-2018年医院制剂的品种、用量、用药金额等进行分析,回顾性评价并结合医院制剂的现状提出应对方案。结果2014-2018年医院制剂品种临床应用数量上从48种减少到目前的35种,减少率为27.08%;2016年医院制剂质量标准提升,医院制剂的销售总量和销售金额较2015年减少了12.86%和10.85%;制剂结构调整后,大多数医院制剂的销售数量和各类制剂销售占比基本保持稳定。分析显示,一些不具疗效优势的医院制剂被上市的品种所取代,不过,具有特色的医院制剂仍然受到临床的认可。结论基于医院"专科优势"的特色,打造研发新医院制剂平台,发展"特色制剂",以推动医院制剂的良性发展,弥补市场供应的短缺,应该是医院制剂发展的重要方向之一。

阿法替尼对卵巢癌阿霉素耐药细胞的增敏作用及其机制

目的探讨阿法替尼增强耐药性卵巢癌细胞对阿霉素化疗敏感度的作用及机制。方法 MTT法检测联用阿法替尼对阿霉素作用于卵巢癌A2780及A2780T细胞的IC_(50)的影响;不同浓度的阿法替尼干预后,罗丹明123蓄积实验检测ABCB1外排功能;ABCB1-Glo?Assay Systems实验检测ABCB1ATPase活性;Westernblot检测A2780T细胞EGFR、p-EGFR、HER-2、p-HER-2及ABCB1的表达;RTPCR实验检测A2780T细胞MDR1mRNA的表达。结果无毒浓度的阿法替尼显著降低了阿霉素对耐药卵巢癌A2780T细胞的IC_(50)(P<0.05),而对A2780细胞没有影响;阿法替尼浓度依赖性地增加罗丹明123在A2780T细胞内的蓄积量及ABCB1 ATPase活性(P<0.05);阿法替尼下调A2780T细胞ABCB1的编码基因MDR1的mRNA水平及ABCB1的蛋白表达水平,抑制了EGFR及HER-2的磷酸化水平。结论阿法替尼可能通过抑制ABCB1转运体的外排功能,下调ABCB1的表达,进而增敏耐药卵巢癌细胞A2780T对阿霉素的化疗敏感度,是一种有开发前景的卵巢癌化疗增敏剂。

体外垂直型扩散池技术评价原花青素对大鼠不同区段肠黏膜药物透过特性的影响

目的评价原花青素对P-糖蛋白(P-gp)底物罗丹明123(R123)和荧光素钠(FS)在大鼠不同区段肠黏膜透过特性的影响。方法采用体外垂直型扩散池(Ussing Chamber)技术,分别计算原花青素20 mg/L时R123和FS经空肠、回肠和结肠黏膜吸收与分泌方向的累计透过率和表观渗透系数(P_(app)),R123和FS在接收池的样品浓度用荧光分光光度计法测定。结果原花青素具有增加R123经空肠、回肠与结肠吸收方向透过性的趋势,同时具有降低R123经空肠、回肠与结肠分泌方向透过性的趋势,与正常对照组相比,原花青素使结肠R123分泌方向透过性明显降低(P<0.01)。结论原花青素具有抑制R123经肠黏膜外排的作用,该作用可能与原花青素抑制肠黏膜上皮P-gp功能有关。

甘草次酸选择性抑制肝癌细胞的增殖

目的探讨甘草次酸对增殖速率不同的4株肝癌细胞SMMC-7721,SK-HEP1,HEPG2,HEP3B体外增殖的抑制作用及其机制。方法通过MTT法测定肝癌SMMC-7721,SK-HEP1,HEPG2和HEP3B细胞株体外生长曲线;用梯度浓度甘草次酸(5、10、20、30、40、60μmol/L)分别刺激48 h后,MTT法检测甘草次酸对4种肝癌细胞株体外生长的影响,Western blot实验考察其对4种肝癌细胞株总ERK蛋白,磷酸化ERK蛋白和拓扑异构酶Ⅱα蛋白表达的影响。结果 4株肝癌细胞中SMMC-7721细胞增殖速率最慢,而SK-HEP1细胞增殖速率最快;甘草次酸刺激48 h能浓度依赖性地抑制4种肝癌细胞的生长,其中对慢增殖细胞SMMC-7721细胞抑制作用最强(IC50为28.04μmol/L);细胞内ERK的磷酸化,拓扑异构酶Ⅱα的表达与细胞增殖速率呈正相关,SMMC-7721细胞拓扑异构酶Ⅱα与p-ERK蛋白的表达在4株细胞中最低,SK-HEP1细胞表达最高。与阴性对照组相比,50μmol/L的甘草次酸可显著抑制4株细胞内拓扑异构酶Ⅱα与p-ERK蛋白的表达(P<0.05),而25μmol/L的甘草次酸可显著下调SMMC-7721,HEPG2和HEP3B细胞拓扑异构酶Ⅱα与p-ERK蛋白(P<0.05)而对SK-HEP1细胞没有作用。结论甘草次酸对不同肝癌细胞生长的抑制作用有选择性。其中对慢增殖肝癌的治疗具有较好的抑制效果。下调拓扑异构酶Ⅱα的表达与抑制ERK通路的激活可能为其作用机制之一。

阿法替尼逆转人卵巢癌耐药A2780T细胞多药耐药性的作用研究

目的研究阿法替尼对人卵巢癌细胞A2780T体外增殖的影响及对多药耐药性(Multidrug resistance,MDR)逆转作用,以寻找新型的MDR逆转剂。方法采用MTT法考察阿法替尼对卵巢癌细胞A2780T的细胞毒性及其逆转耐药作用;流式细胞仪检测阿法替尼对A2780T细胞凋亡的影响。结果阿法替尼可浓度依赖性的显著降低紫杉醇对A2780T的IC50。与0.625μM(低)、1.25μM(中)及2.5μM(高)的阿法替尼联用时,紫杉醇对A2780T细胞的IC50分别为(115.53±6.65)μM、(19.74±1.19)μM及(8.86±0.72)μM,较未联用阿法替尼组紫杉醇的IC50分别显著下降了1.72倍、10.08倍及22.45倍(P<0.01)。阿法替尼逆转A2780T对紫杉醇的MDR效果,强于相同浓度的可逆性TKIs类药物拉帕替尼及10μM的维拉帕米。阿法替尼可浓度依赖性显著增加紫杉醇诱导的A2780T细胞的凋亡率(P<0.01)。结论低浓度阿法替尼能逆转人卵巢癌耐药A2780T细胞的MDR,具有作为MDR逆转剂的前景。

阿法替尼对人卵巢癌细胞的增殖抑制作用及其机制研究

目的探讨阿法替尼对体外人卵巢癌A2780及A2780T细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法不同浓度的阿法替尼作用于体外培养的人卵巢癌A2780及A2780T细胞48 h,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测阿法替尼对卵巢癌A2780及A2780T细胞增殖的影响;采用Bliss法计算半数抑制浓度(IC50);采用Western Blot法检测阿法替尼对卵巢癌A2780T细胞中EGFR、p-EGFR、HER-2、p-HER-2、AKT及p-AKT等相关蛋白表达的影响。结果阿法替尼可浓度依赖性的抑制人卵巢癌A2780及A2780T细胞的体外增殖,IC50分别为3.28μmol·L-1及6.81μmol·L-1;阿法替尼可抑制卵巢癌A2780T细胞中表皮生长因子受体(EGFR)、人表皮生长因子受体2(HER-2)及蛋白激酶B(AKT)的磷酸化,而对EGFR、HER-2及AKT的总蛋白表达水平没有影响。结论阿法替尼可通过抑制EGFR通路的激活,下调EGFR下游的PI3K/AKT通路,进而抑制人卵巢癌细胞的体外增殖,是一种有开发前景的卵巢癌化疗药物。

LC-MS/MS法检测大鼠血浆和各组织中阿霉素含量

目的建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)测定大鼠血浆和心、肝、肺、肾、脑组织中阿霉素的方法。方法样本经乙腈-5 mmol·L^(-1)乙酸铵(60∶40,V/V)提取淀蛋白,C_(18)色谱柱分离,含0.1%甲酸的乙腈和0.1%甲酸水溶液,采用柱后分流模式梯度洗脱,以柔红霉素作为内标,在电喷雾离子化(ESI)正离子模式下检测,多反应监测(MRM)扫描,用于定量的离子对分别为544.2→m/z 397.2(阿霉素)和m/z 528.2→m/z 321.2(柔红霉素,内标)。结果阿霉素在血浆浓度5~2000 ng·mL^(-1),在心脏组织浓度10~4000 ng·mL^(-1),在肝组织浓度10~4000 ng·mL^(-1),在肺组织浓度10~4000 ng·mL^(-1),在肾组织浓度5~4000 ng·mL^(-1),在脑组织浓度1~2000 ng·mL^(-1)范围内与峰面积有良好的线性关系,相关系数分别为0.999,0.997,0.992,0.991,0.998,0.994。血浆和各组织方法提取回收率均在78.5%~101.2%,日内及日间精密度的RSD<15%。介质效应在89%~115%之间。结论此方法专属性强、检测限低、操作简单、快速,适用于动物血浆和组织中阿霉素残留浓度的检测。

甘草酸对紫杉醇增溶作用考察

目的:考察甘草酸对紫杉醇溶解度的增溶作用。方法:将不同比例甘草酸和紫杉醇,不同比例乙醇和紫杉醇进行配伍,采用高效液相色谱法检测紫杉醇的浓度;并采用电导率法检测甘草酸-紫杉醇溶液的临界胶束浓度。结果:在乙醇比例为7.5%且甘草酸浓度为10 mmol·L^(-1)时,紫杉醇达到最佳溶解度(823.38±14.41)μg·mL^(-1),较紫杉醇水中溶解度增加约1 000倍(0.67→823μg·mL^(-1)),较紫杉醇在7.5%乙醇液中溶解度增加约100倍(8.51→823μg·mL^(-1))。紫杉醇-甘草酸溶液(含7.5%乙醇)的临界胶束浓度为0.42 mmol·L-1,证明其在更低浓度下能形成胶束状态。结论:首次发现在甘草酸和低体积分数乙醇的协同作用下,紫杉醇水中溶解度得到有效增加,鉴于甘草酸的两亲性,安全性和一些特殊的药理活性,为制备基于甘草酸为载体的新型紫杉醇制剂奠定基础。