基于Wnt/β-catenin信号通路探讨血府逐瘀汤在非小细胞肺癌EGFR-TKI获得性耐药中的作用

目的:探讨血府逐瘀汤基于Wnt/β-catenin信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子(EGFR)-酪氨酸酶抑制剂(TKI)获得性耐药小鼠模型的干预作用。方法:选取SPF级Balb/c小鼠40只,腋下接种NSCLC EGFR-TKI获得性耐药细胞株构建皮下移植瘤,随机分为空白组、TKI组、低剂量组、高剂量组、高剂量+TKI组,共五组,每组8只。各组小鼠均经灌胃给药,给药剂量:厄洛替尼(TKI)30 mg/(kg·d),血府逐瘀汤低剂量含生药15 mg/ml、30 ml/(kg·d)给药,高剂量含生药45 mg/ml、30 ml/(kg·d)给药。空白组给予0.9%氯化钠溶液(0.4 ml/只)。比较各组瘤体体积、肿瘤生长抑制率、肿瘤细胞增殖指数、Wnt3α、P-GSK3β与β-catenin的蛋白表达情况。结果:在给药第16天、第20天时,高剂量+TKI组瘤体体积小于空白组及TKI组,在给药第20天时,高剂量组瘤体体积小于空白组(P<0.05)。在给药第16天、第20天时,高剂量+TKI组瘤体生长抑制率高于TKI组、高剂量组,在给药第20天时,高剂量组瘤体生长抑制率高于TKI组(P<0.05)。空白组、TKI组、低剂量组肿瘤细胞增殖Ki67指数比较差异无统计学意义(P>0.05);高剂量组、高剂量+TKI组肿瘤增殖Ki67指数均低于空白组,高剂量+TKI组肿瘤增殖Ki67指数低于高剂量组(P<0.05)。空白组、TKI组、低剂量组Wnt3α、P-GSK3β与β-catenin的蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05);高剂量组、高剂量+TKI组Wnt3α、β-catenin蛋白表达均低于空白组,P-GSK3β蛋白表达均高于空白组(P<0.05)。结论:高剂量血府逐瘀汤可抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活,通过下调Wnt3α、β-catenin蛋白表达,上调P-GSK3β蛋白表达来延缓EGFR-TKI获得性耐药NSCLC小鼠肿瘤进展,抑制腋下移植瘤体积,降低肿瘤细胞增殖指数。

血府逐瘀汤对非小细胞肺癌荷瘤小鼠GSK-3β与β-catenin表达的影响

目的探讨血府逐瘀汤对非小细胞肺癌荷瘤小鼠糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)与β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法采用右侧腋皮下接种人非小细胞肺癌A549细胞方法制备荷瘤小鼠模型,将造模成功的32只小鼠随机分为4组,每组8只。所有小鼠均腹腔注射5 mL/kg生理盐水,模型组、血府逐瘀汤低剂量组、血府逐瘀汤中剂量组、血府逐瘀汤高剂量组再分别灌胃蒸馏水5 mL/kg、血府逐瘀汤12.5 g/kg、血府逐瘀汤25 g/kg、血府逐瘀汤50 g/kg,均1次/d,连续灌胃14 d。灌胃结束后测量各组小鼠瘤重,计算肿瘤体积和生长抑制率;采用流式细胞仪检测各组肿瘤组织细胞凋亡率;分别采用Western blot和qTR-PCR法检测各组肿瘤组织中GSK-3β和β-catenin蛋白及mRNA表达情况。结果血府逐瘀汤各剂量组瘤重、肿瘤体积均明显低于模型组(P均<0.05);血府逐瘀汤各剂量组瘤重、肿瘤体积呈剂量依赖性降低,生长抑制率呈剂量依赖性增高,各剂量组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。血府逐瘀汤各剂量组细胞凋亡率和肿瘤组织中GSK-3β蛋白及mRNA相对表达量均明显高于模型组(P均<0.05),β-catenin蛋白及mRNA相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05);血府逐瘀汤各剂量组细胞凋亡率和肿瘤组织中GSK-3β蛋白及mRNA相对表达量呈剂量依赖性增高,β-catenin蛋白及mRNA相对表达量呈剂量依赖性降低,各剂量组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论血府逐瘀汤能够有效抑制非小细胞肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织生长,促进肿瘤细胞凋亡,其可能通过上调GSK-3β表达和下调β-catenin表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路活性发挥抗肿瘤作用,且随着血府逐瘀汤剂量增加作用越明显。

柴芍六君子汤加味治疗肝癌伽玛刀治疗后肝损伤临床观察

目的:观察柴芍六君子汤加味治疗肝癌伽玛刀治疗后肝损伤的临床疗效。方法:将60例经伽玛刀治疗后发生I-II级放射性肝损伤的肝癌肝郁脾虚型患者,随机分为2组,每组各30例,对照组予西药护肝制剂,治疗组在对照组的基础上加用柴芍六君子汤加味治疗;两组疗程均为30 d,观察两组前后肝功能指标、生活质量评分、中医症候评分变化情况。结果:两组肝功能指标治疗总有效率比较均有显著性差异 (P<0.05),治疗组治疗后与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:柴芍六君子汤加味治疗肝癌伽玛刀治疗后肝损伤具有较好的临床疗效,可应用推广。

张红以六君子汤合赤石脂禹余粮汤治疗倾倒综合征经验

倾倒综合征为胃大部分切除术后并发症,中医多论之为“腹痛”、“腹泻”。发病机制为胃癌术后气血津液大伤,放化疗后损伤胃气,脾胃受损,脾虚运化不健、痰浊内生。导师张红教授在临床灵活运用辨病和辨证相结合的中医诊疗方法,以益气健脾化湿,温涩固脱止泻为主要治疗方法,合用六君子汤、赤石脂禹余粮汤,临证加减,改善患者的临床症状,防治术后复发、转移,减轻放化疗不良反应。

补阳还五汤有效组分对肺癌细胞增殖及转移的影响

目的:探究补阳还五汤有效组分对肺癌细胞增殖、转移的影响及可能的通路机制。方法:将人肺癌H460细胞分为对照组、苷类组分组,对照组细胞加入10ml/kg蒸馏水,苷类组分组细胞分别加入0.04g/ml、0.08g/ml、0.16g/ml的补阳还五汤药液10ml/kg分别作为实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。采用MTT法检测各组细胞处理前与处理后1、2、3d受抑制率,细胞划痕实验检测细胞转移能力,RT-PCR法、Western Blot法检测细胞中上皮-间充质转化(EMT)下游基因mRNA和蛋白表达水平。结果:补阳还五汤各含药血浆浓度为10%时,与对照组比较,可显著抑制H460细胞增殖;且随着浓度增加,抑制作用也增强;3个有效成分合用血浆的IC_(50)低于苷组分、黄芪甲苷、苦杏仁苷、芍药苷组(P<0.05)。实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组细胞增殖率、迁移率随处理时间及药物浓度的增加而降低。与对照组比较,实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、实验Ⅲ组H460细胞G0/G1期细胞增多(P<0.05),S期和G2/M期细胞减少(P<0.05);实验Ⅲ组H460细胞G0/G1期细胞多于实验Ⅰ组、实验Ⅱ组(P<0.05),S期和G2/M期细胞少于实验Ⅰ组、实验Ⅱ组(P<0.05)。与对照组比较,实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、实验Ⅲ组EMT下游基因因子E-cadherin、Snail、N-cadherin、Vimentin的mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);实验Ⅱ组、实验Ⅲ组EMT下游基因因子Snail,Vimentin的mRNA和蛋白表达水平高于实验Ⅰ组(P<0.05)。结论:补阳还五汤通过抑制EMT通路关键基因因子表达,其有效苷类组分具有显著抑制非小细胞肺癌H460细胞增殖和转移的作用。

巧用成语故事 丰富历史课堂

在历史课教学中恰当地运用成语典故，既能提高学生的学习兴趣，又能拓展学生的知识面，培养学生良好的道德情操。文章作者结合教学实践，总结自己初中历史教学中巧用成语故事的一些做法，以供大家借鉴。

全蝎、蜈蚣调控非小细胞肺癌细胞增殖的机制研究

[目的]探讨全蝎、蜈蚣调控非小细胞肺癌细胞A549增殖的潜在分子机制。[方法]全蝎、蜈蚣处理非小细胞肺癌细胞A549后,MTT法检测细胞的增殖水平。RNA-seq和实时荧光定量PCR检测全蝎、蜈蚣调控的非小细胞肺癌细胞A549基因。siRNA敲低或质粒过表达受全蝎、蜈蚣调控的基因,检测非小细胞肺癌细胞A549的增殖水平。[结果]全蝎、蜈蚣处理后,非小细胞肺癌细胞A549的增殖水平明显下降(0.83±0.10 vs 0.54±0.03,t=2.778;P<0.05)。RNA-seq和实时荧光定量PCR发现全蝎、蜈蚣能够调控非小细胞肺癌细胞A549 ATL2、SLC5A9、ARHGAP28、XKR8、COX-2、SCN4B、MYCN、IL13、HSPA14、EFHD2、INSR、PALD1、LIN28A的表达表达。敲低COX-2后非小细胞肺癌细胞A549转染后24h的增殖水平降低(0.43±0.05 vs 0.23±0.01,t=3.922,P<0.05)。全蝎、蜈蚣处理非小细胞肺癌细胞A549后,COX-2的蛋白水平降低。过表达COX-2后,非小细胞肺癌细胞A549的增殖水平显著上升(0.80±0.08 vs 0.89±0.24,t=0.3558;P>0.05)。同时过表达COX-2和全蝎、蜈蚣处理后,非小细胞肺癌细胞A549的增殖水平没有显著变化(P>0.05)。[结论]全蝎、蜈蚣通过降低COX-2的表达水平抑制非小细胞肺癌细胞A549的增殖水平。