低氧预适应小鼠皮层Bcl-2和Caspase-3的表达变化

本文旨在探讨小鼠皮层Bcl-2和Caspase-3在低氧预适应脑保护中的作用。将Blb/c近交系小鼠随机分为对照组、低氧组和低氧预适应组,用免疫荧光和激光共聚焦显微镜等技术测定皮层顶叶Bcl-2和Caspase-3表达荧光强度和阳性细胞计数。结果显示,低氧组和低氧预适应组Bcl-2表达均显著高于对照组,低氧预适应组又显著高于低氧组。低氧组和低氧预适应组Caspase-3表达均显著高于对照组,但低氧预适应组显著低于低氧组。结果表明,低氧预适应过程中,小鼠皮层脑区通过Bcl-2高表达和Caspase-3低表达抵御皮层细胞凋亡,从而参与脑保护机制。

大鼠福尔马林内脏炎症痛过程中脊髓PKC、PKCε膜转位的变化

目的:初步探讨PKC、PKCε在内脏炎症痛过程中的作用。方法:本实验用福尔马林(F)直肠粘膜下注射的内脏炎症痛模型,经脊髓蛛网膜下腔插管分别给予PKC、PKCε激动剂PMA(phorbol12 myristate13 acetate)和抑制剂H 7(1 (5 isoquinolinesulfonyl)2 methylpiperazinedihydrochloride),结合SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)、蛋白印迹 (Western blot)等生化技术。选用成年健康Wistar大鼠,随机分 4组: 正常对照组N,内脏痛组(F+NaCl),PMA组(F+PMA)和H 7组(F+H 7)。共分福尔马林直肠内致炎后 30min、60min和 120min三个时间段。结果:在福尔马林直肠致炎后 60min内,F+NaCl组与N组PKC、PKCε膜转位相比分别明显增高 (P<0. 01);F+PMA组与F+NaCl组PKC、PKCε相比分别明显增高(P<0. 05);F+IT+H 7组与F+IT+NaCl组PKC、PKCε相比分别明显降低 (P<0. 05 )。结论: 福尔马林致内脏炎症痛过程中PKC、PKCε被激活,提示PKC、PKCε可能参与了内脏炎症痛的发生。

低氧预适应刺激脑海马区内源性神经干细胞的增殖

背景:缺血/缺氧/低氧等刺激均能导致内源性神经干细胞的增殖和分化,起到脑组织修复作用,但低氧预适应能否影响内源性神经干细胞的增殖尚不清楚。目的:探讨低氧预适应对小鼠脑海马区内源性神经干细胞增殖的影响。方法:清洁级Balb/c近交系小鼠随机分为3组,低氧对照组小鼠放入广口瓶内,立即用橡皮塞封紧,以动物出现第1次喘呼吸为低氧耐受极限的标志,完成低氧暴露1次;低氧预适应组小鼠按此法重复操作4次;正常对照组小鼠不进行低氧暴露。通过免疫荧光和激光共聚焦显微镜等技术,测定海马BrdU阳性细胞数和荧光强度。结果与结论:与低氧对照组比较,低氧预适应组小鼠耐受时间显著延长(P<0.01)。正常对照组海马区BrdU标记的内源性神经干细胞荧光强度微弱,海马区可见少量BrdU阳性细胞;低氧对照组、低氧预适应组荧光强度及BrdU阳性细胞数均明显增加(P<0.01),且低氧预适应组增加幅度大于低氧对照组(P<0.01)。证实在低氧预适应过程中,海马区内源性神经干细胞明显增殖,可能参与低氧预适应脑保护机制。

循证医学教学模式在研究生神经病理性疼痛教学中的应用研究

目的:探讨循证医学教学模式在研究生神经病理性疼痛教学中的可行性和效果分析。方法:选取神经内科实习的研究生40名,随机分为对照组和实验组(每组各20名)。分别采取传统医学教学模式和循证医学教学模式。通过调查问卷和临床技能考核方法探讨循证医学教学模式的可行性和教学效果。结果:(1)对照组和实验组入科时对神经病理性疼痛感兴趣百分比分别为35%和40%;出科时实验组与对照组相比兴趣增加(P<0.05);实验组出科时比入科时兴趣也明显提高(P<0.05)。(2)对照组入科时认为循证医学教学模式有利于临床实践和就业的占30%,实验组占35%;出科时实验组与对照组相比重要性认识上提高(P<0.05);实验组出科时比入科时相比重要性认识上同样提高(P<0.05)。(3)实验组与对照组相比,在病史采集、体格检查、病历书写、基本操作和病例分析方面均有提高(P<0.05),尤其在病历书写和病例分析方面明显提高(P<0.01)。结论:开展研究生神经病理性疼痛循证医学教学模式具有可行性和必要性。

蛋白激酶C对福尔马林诱导急性内脏炎症疼痛评分的影响

目的 :本实验用福尔马林诱导的急性内脏炎症痛模型 ,经脊髓蛛网膜下腔插管给予蛋白激酶C (PKC)激动剂PMA (phorbol 12 myristate 13 acetate)和抑制剂H 7(1 (5 isoquinolinesulfonyl) 2 methylpiperazinedihydrochloride) ,观察其对内脏炎症痛疼痛评分的影响。方法 :实验选用成年健康Wistar大鼠 ,随机分 5组 :单纯福尔马林直肠致炎组 (F) ;脊髓蛛网膜下腔内插管组 (F +IT) ;插管内注射生理盐水组 (F +IT +NaCl) ;插管内注射PMA组 (F +IT +PMA) ;插管内注射H 7组 (F +IT +H 7)。记录 5组大鼠的疼痛行为反应 ,以 15min为一个时间段 ,共记录 8个时间段 ,计 2h ,分别计算疼痛分数。结果 :F组与F +IT组 8个时间段内疼痛分数无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;F +IT +NaCl组与F +IT组相比也无显著性意义 ;F +IT +PMA组与F +IT +NaCl组相比在前 75min内有显著性差异(P <0 .0 1) ;F +IT +H 7组与F +IT +NaCl组相比在前 90min内有显著性差异 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。结论 :①蛛网膜下腔内插管对内脏疼痛评分无影响 ;②PKC在福尔马林致急性内脏炎症痛感受中起重要作用。

蛋白激酶C在大鼠甲醛内脏炎症痛过程中作用的行为学观察

目的:本实验用甲醛复制的内脏炎症痛模型,经腹腔注射给予蛋白激酶C抑制剂氯丙嗪(CP),通过行为学方法观察其在内脏炎症痛中的作用。方法:实验选用成年健康Wistar大鼠,随机分3组:单纯甲醛直肠致炎组(F);腹腔内注射生理盐水组(F+NaCl);腹腔内注射CP组(F+CP)。记录3组大鼠的疼痛行为反应,致痛后以15min为1个时间段,共记录8个时段,计2h,分别计算疼痛分数。结果:F+NaCl组与F组相比无显著差异(P>0.05);F+CP组与F组相比在前90min内有显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论:蛋白激酶C可能在甲醛致内脏炎症痛感受中起重要作用。

丝裂原活化的蛋白激酶激活通路在病理性痛痛觉调制中的作用研究进展

病理性痛（pathological pain）是临床上常见的疼痛，通常分为炎性痛（inflammatory pain）和神经病理性痛（neuropathic pain），具有痛觉过敏和痛觉异常等特点，给l晦床治疗带来极大难度。严重的吗啡耐受导致痛敏、痛觉异常现象，因此病理性痛机制研究对于其临床治疗具有重要意义，信号转导机制是目前国内外研究的热点之一。

PKC抑制剂灯盏花素乙对内脏炎症痛大鼠脊髓NO/cGMP信号转导系统的影响

目的探讨灯盏花素乙在甲醛复制的内脏炎症痛中的作用及其对NO/cGMP信号转导系统的影响。方法成年健康Wistar大鼠,随机分为4组:正常对照组、内脏炎症痛组、溶媒组和灯盏花素乙组。观察:①鞘内注射灯盏花素乙后大鼠行为学变化,以15min为一个时间段,共2h,计算疼痛分数;②致痛后30min取脊髓,用分光光度计法测定NOS活性、NO产量和放射免疫法测定cGMP含量。结果①灯盏花素乙组在前90min内疼痛分数低于内脏炎症痛组(P<0.05orP<0.01);②内脏炎症痛、溶媒和灯盏花素乙组脊髓的NOS活性、NO产量和cGMP含量均高于正常对照组(P<0.05orP<0.01),灯盏花素乙组低于内脏炎症痛组(P<0.01)。结论①灯盏花素乙能减轻甲醛复制的内脏炎症痛;②灯盏花素乙可能通过抑制脊髓内PKC的激活,进而抑制NO/cGMP信号转导系统的激活。

临床教学医院神经病学循证医学教学效果研究分析

目的:在临床教学医院,以神经病学实践教学为试点,对本专业实习的本科生、研究生采用以问题为中心的循证医学教育模式,进行教学效果研究分析。方法:选取2007年-2009年进入泰山医学院附属医院神经内科临床实习的40名本科生和20名研究生,通过理论考试成绩、病历书写和病例分析能力等方面进行研究,采用SPSS 12.0软件对数据进行分析。结果:在理论考试成绩方面,本科生组、研究生组的实验组分别与其对照组相比,无显著性差异(P>0.05);在病历书写、病例分析能力方面,本科生组、研究生组的实验组分别与其对照组相比,均明显提高(P<0.01);并且研究生实验组与本科生组相比,也有显著性差异(P<0.05)。结论:循证医学教育模式可增强本科生、研究生临床实践能力,研究生的教学效果优于本科生。

丝裂原活化的蛋白激酶激活通路与病理性痛痛觉敏感化

Pathological pain or clinical pain is caused by tissue and nerve injuries,and is usually chronic and mainly divided into inflammatory pain and neuropathic pain. Pathological pain is typically characterized by hyperalgesia (increased responsiveness to noxious stimuli) and allodynia (painful responses to normally innocuous stimuli). The mitogen-activated proteins kinases (MAPKs) are a family of evolutionally conserved molecules that play a critical role in cell signaling,consisting of extracellular signal regulated kinase (ERK),p38,and c-Jun N-terminal kinase (JNK),which play an important role in neural plasticity of pathological pain. Inhibition of MAPKs alleviates inflammatory pain and neuropathic pain in different animal models. It is very important to study the inhibition of MAPKs as a therapeutic approach to treat pathological pain.

丝裂原活化的蛋白激酶通路与吗啡耐受

MAPKs激活通路包括3个被顺序激活的蛋白激酶:MAPKs激酶的激酶(MKKKs)→MAPKs激酶(MKKs)→MAPKs;有MAPK细胞外信号调节激酶(MAPKERK)、C-JUN氨基末端激酶(MAPKJNK)、MAPKP38和MKK5/MAPKERK5等4条通路。吗啡耐受后,MAPKs(ERK、JNK和P38)激活增加。MAPKs激活通路上每个环节的抑制剂均是临床上治疗吗啡耐受的潜在药物。

直肠黏膜下注射福尔马林复制的新型内脏炎症痛模型

目的为研究内脏炎症痛提供新型动物实验模型。方法选用成年健康的Wistar大鼠,随机分为乙醚麻醉组(A)、直肠插入窥器组(B)、直肠黏膜下注射生理盐水组(C)和福尔马林组(D)。大鼠持续乙醚麻醉下,分别在距离肛门约3.5cm用针长8cm的1ml注射器于直肠粘膜下注射100μl的生理盐水和5%的福尔马林。撤去麻醉后行行为学观察和注射福尔马林处直肠HE染色。结果A、B组大鼠无疼痛反应;C组大鼠在注射生理盐水后60min内表现轻微的疼痛反应;D组大鼠表现出明显的内脏痛行为反应,大鼠在注射福尔马林后30min时达到疼痛评分的最大值,从注射福尔马林后45min至120min,疼痛评分逐渐降低,与C组相比有显著性差异(P<0.01)。HE染色发现A、B和C组大鼠直肠无明显炎症反应,而D组有明显的炎症反应。结论大鼠直肠黏膜下注射福尔马林可以复制内脏炎症痛模型;疼痛分数能客观反映内脏疼痛程度,可作为量化指标。

丝裂原活化的蛋白激酶:一个治疗病理性痛潜在的药物新靶点

病理性痛(pathological pain)是临床上常见的疼痛,通常分为炎性痛(inflammatory pain)和神经病理性痛(neuro-pathic pain),具有痛觉过敏和痛觉异常等疼痛神经可塑性特点;丝裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated proteins kinases,MAPKs)作为一种关键细胞信号分子,包括细胞外信号调节激酶(ERK)、p38和c-Jun氨基末端激酶(JNK)3条主要激活通路,在病理性痛觉信号转导和神经可塑性调控中起重要作用。在不同动物模型中,抑制MAPKs信号通路,可明显减轻炎症痛和神经病理性痛,这为MAPKs抑制剂开发成为治疗病理性痛的药物提供了可能,MAPKs已成为治疗病理性痛药物作用的一个重要的潜在的靶点。

N型钙通道阻断剂SNX-111对福尔马林诱导的大鼠内脏痛的镇痛作用

目的进行福尔马林诱导的大鼠内脏痛行为及N型钙通道阻断剂SNX-111镇痛效果观察和评价。方法采用福尔马林直肠黏膜下注射复制的内脏痛模型，鞘内注射SNX-111（0．1μg／kg；0．5μg／kg；1μg／kg）观察镇痛效果。致痛后以15min为一个时间段，共记录2h，分别计算疼痛分数。结果各组大鼠在注射福尔马林后30min均达到疼痛评分的最大值[（39．88±5．32）分-（89．84±8．61）分]，从注射福尔马林后45-120min内，疼痛评分逐渐降低[（2．96±0．91）分-（38．50±5．16）分]。前60min内行为表现主要以伸展身体、腹部收缩、全身收缩反应为主；而在后60min内主要以腹部舔食和轻咬反应为主。SNX-111能明显减少疼痛评分[（4．48±0．45）分-（46．83±5．28）分]，抑制内脏疼痛反应，SNX-111剂量越大，镇痛效果越显著（P〈0．01或P〈0．05）。结论福尔马林具有较强的内脏致痛效应，疼痛分数能反映内脏疼痛程度，可作为量化指标；SNX-111对内脏痛具有明显的、剂量依赖性的镇痛效果。

临床教学医院开展神经病学循证医学教学模式必要性分析

目的:探讨临床教学医院开展神经病学循证医学教学模式必要性。方法:选取2007-2010年进入泰山医学院附属医院神经内科实习本科生120名,随机分为对照组和实验组,每组60名,通过调查问卷和临床技能考核方法进行研究,采用SPSS 12.0软件对数据进行分析。结果:实验组与对照组相比,在对神经病学课程兴趣和重要性认识等调查问卷方面明显提高(P<0.05);实验组与对照组相比,在病史采集、体格检查、病历书写、基本操作和病例分析等临床技能考核方面,均明显提高(P<0.05)。结论:在临床教学医院开展神经病学循证医学教学模式具有必要性和重要意义。

医学生对循证医学教学模式课堂教学评价研究

目的以学生为主体,进行医学院校开展循证医学教学模式课堂教学评价。方法选择2008年9月-2015年12月期间学生80例,根据随机分配的原则,分为对照组和实验组,每组40例。对照组采用传统教学模式,实验组采用循证医学教学模式。采用自行设计问卷进行调查,内容包括：对课程知识掌握、沟通和交流能力、自我学习及个人发展能力、检索和搜集资料的能力、分析及解决问题的能力和互相协作及团队精神等6个方面,对照组和实验组分别在课程结束时进行调查。结果实验组在对课程知识掌握、沟通和交流能力、自我学习及个人发展能力、检索和搜集资料的能力、分析及解决问题的能力和互相协作及团队精神等6个方面均明显提高,与对照组相比有显著差异,特别在对课程知识掌握、检索和搜集资料的能力、分析及解决问题的能力和互相协作及团队精神等方面,差异更为突出。结论医学院校适合开展循证医学教学模式,学生对课堂教学效果具有较高评价。

医学院校开展药理学循证医学教学模式可行性分析及效果评价

目的探讨医学院校开展药理学循证医学教学模式可行性分析及循证医学教学模式效果评价。方法选择2008年9月-2015年12月期间药学专业本科生80名,药理学专业研究生40名,根据随机分配的原则,将本科生、研究生组分别分为对照组和实验组,本科生组对照组和实验组分别40名,研究生组对照组、实验组分别为20名。对照组采用传统教学模式,实验组采取循证医学教学模式。通过调查问卷、理论考试和药理案例分析考核方法进行研究。结果本科生实验组有兴趣人数与课程开始时相比有显著性差异（χ^2=7.168,P=0.007）;课程结束时对照组和实验组相比,有显著性差异（χ^2=5.000,P=0.025）。研究生实验组有兴趣人数与课程开始时相比有显著性差异（χ^2=4.800,P=0.028）;课程结束时对照组和实验组相比,有显著性差异（χ^2=4.800,P=0.028）。本科生实验组和研究生实验组对药理学学习兴趣相比,无显著性差异（χ^2=0.208,P=0.648）。本科生对照组理论考试成绩和实验组相比有显著性差异（t=-4.568,P〈0.001）;本科生对照组案例分析成绩和实验组相比也有显著性差异（t=-2.665,P=0.009）。研究生对照组理论考试成绩和实验组相比有显著性差异（t=-5.342,P〈0.001）;研究生对照组案例分析成绩实验组相比也有显著性差异（t=-3.760,P〈0.001）。本科生实验组和研究生实验组理论考试成绩相比,有显著性差异（t=-3.245,P=0.002）;本科生实验组和研究生实验组案例分析成绩相比,也有显著性差异（t=-2.369,P=0.021）。结论循证医学教学模式分别可以增加本科生和研究生对药理学的兴趣,能明显提高药理学理论考试和案例分析考核成绩,研究生教学效果优于本科生。