FASTKD4在骨肉瘤组织中表达及对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨FASTKD4在骨肉瘤组织中表达及其对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法通过免疫组化和qPCR的方法检测FASTKD4在骨肉瘤及癌旁组织中的表达情况,同时还通过qPCR检测FASTKD4在不同骨肉瘤细胞中的表达情况,根据结果选择Saos-2细胞作为研究对象,细胞转染FASTKD4小干扰RNA(shFASTKD4组)及对照阴性序列(shCtrl组)。qPCR和Western blot检测转染后细胞中FASTKD4 mRNA和蛋白表达水平。高内涵筛选和CCK-8检测细胞增殖,基质胶成球实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果免疫组化和qPCR结果显示FASTKD4在骨肉瘤组织中表达水平高于癌旁组织(P<0.05),与shCtrl组比较,shFASTKD4组骨肉瘤增殖能力受到抑制(P<0.05),且shFASTKD4组骨肿瘤细胞形成的克隆球直径小于shCtrl组(P<0.05)。shFASTKD4组骨肿瘤细胞凋亡率高于shCtrl组(P<0.05)。结论FASTKD4在骨肉瘤组织中高表达,沉默FASTKD4可以抑制骨肉瘤细胞增殖和克隆能力,并促进肿瘤细胞凋亡,进一步研究显示FASTKD4敲除使PI3K/AKT信号通路失活。

沉默MFGE8对骨肉瘤细胞U2OS增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响

目的探讨乳脂肪球表皮生长因子8蛋白(MFGE8)在骨肉瘤细胞系中的表达及对骨肉瘤细胞(U2OS)增殖、凋亡、侵袭及迁移能力的影响。方法利用Western blot方法检测MFGE8蛋白在正常成骨细胞及骨肉瘤细胞系中的表达;GEO数据库分析MFGE8 mRNA表达与骨肉瘤患者预后的关系;下调MFGE8后检测其对U2OS细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果Western blot方法显示MFGE8蛋白在骨肉瘤细胞中的表达高于正常成骨细胞,且与骨肉瘤患者的预后呈负相关(均P<0.05);与sh-Ctrl(转染了空载组的U2OS细胞)组相比,sh-MFGE8(转染了sh-MFGE8的U2OS细胞)组U2OS细胞的愈合率及侵袭数均降低,增殖抑制率和凋亡率均升高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论MFGE8在骨肉瘤细胞U2OS中高表达,下调MFGE8可以抑制U2OS的增殖、侵袭及迁移,诱导其凋亡。

改良透明质酸水凝胶控释脑源性神经营养因子对大鼠胚胎神经干细胞生长、分化和凋亡的影响

目的研究改良透明质酸(HA)水凝胶控释脑源性神经营养因子(BDNF)对大鼠胚胎神经干细胞(rFNSCs)生长、分化及凋亡的影响。方法实验以大鼠胚胎干细胞为研究对象,将实验分为3组,分别为空白对照组[rFNSCs与聚乳酸乙醇酸(PLGA)和HA共培养]、条件对照组(rFNSCs与BDNF-PLGA和HA共培养)、实验组(rFNSCs与BDNF-PLGA和改良HA水凝胶即Dex-HA共培养)。采用ELISA法检测控释支架中BDNF的释放曲线;Live/Dead实验检测各组中的rFNSCs凋亡情况;CCK-8法检测rFNSCs与水凝胶共培养后的细胞增殖活性;免疫细胞化学染色法检测不同组中rFNSCs的分化情况。结果ELISA法结果显示水凝胶对BDNF的控释可以持续14 d。Live/Dead实验显示实验组中rFNSCs凋亡数低于空白对照组和条件对照组。CCK-8实验表明,三组中实验组rFNSCs细胞增殖活性最强,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫细胞化学染色结果表明,与空白对照组和条件对照组相比,实验组水凝胶在体外能促进rFNSCs向神经元分化,减少向星形胶质细胞的分化,差异有统计学意义(P<0.05)。结论改良HA水凝胶控释BDNF可以促进rFNSCs的生长、分化并减少其凋亡。