补肾益智方对老年性痴呆模型动物空间探索学习记忆功能的改善作用

目的 观察补肾益智方对老年性痴呆 (AD)模型大鼠空间探索学习记忆功能的改善作用。方法 用 15月龄老年 Wistar大鼠 80只 ,以 D-半乳糖 ip4周加上鹅膏蕈酸 (ibotenic acid,IBO)脑内 Meynert核注射制造 AD模型 ,随机分成 :AD模型组 ,双益平治疗对照组 ,补肾益智方高、低剂量 (12 ,6 g/ kg· d)治疗组。另加上正常老年组和正常青年组总共设立 6个组别。动物经治疗处理 4周后 ,应用 Morris水迷宫检测大鼠学习记忆的改善情况。结果 空间探索试验发现 ,模型组及双益平组在空间探索试验中的指标与正常青年组和正常老年组有显著差异性(P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;补肾益智方高、低剂量组也与模型组和双益平组有显著性差异 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。与模型组比较 ,正常青年组、正常老年组和补肾益智方高剂量组第 7天撤离平台后大鼠在原平台象限内游泳的时间占整个游泳时间的百分比明显要高 (P<0 .0 5 ) ,而补肾益智方低剂量和双益平组虽然要高些 ,但差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 补肾益智方能明显改善 AD大鼠空间探索学习记忆功能。

补肾益智方对老年性痴呆模型大鼠海马结构生长抑素神经元的影响

【目的】研究自拟的补肾益智方对大鼠老年性痴呆 (阿尔茨海默病 ,Alzheimerdisease ,AD)模型海马内生长抑素 (somatostatin ,SS)神经元的影响。【方法】用 15月龄老年Wistar大鼠以D -半乳糖腹腔注射 4周加上鹅膏蕈氨酸 (ibotenicacid ,IBO)脑内Meynert核注射制作AD模型 ,然后随机分成AD模型组、双益平治疗对照组、补肾益智方高剂量治疗组、补肾益智方低剂量治疗组 ,另设正常老年对照组和正常青年对照组。动物经治疗处理后 ,运用免疫组织化学和寡核苷酸探针原位杂交方法检测大鼠海马CA 1、CA 3和齿状回生长抑素免疫阳性和mRNA表达阳性神经元数目。【结果】补肾益智方高、低剂量组大鼠海马CA1、CA3和齿状回生长抑素阳性神经元数目及其积分光密度较AD模型组有增加趋势 ,有些组间比较有显著性差异。【结论】补肾益智方对D -半乳糖腹腔注射 4周加上鹅膏蕈氨酸 (IBO)脑内Meynert核注射制作的大鼠AD模型海马内生长抑素 (SS)

补肾益智方对老年性痴呆模型动物定位航行学习记忆功能的改善作用

目的 观察补肾益智方改善老年性痴呆 (AD)模型大鼠定位航行学习记忆功能的作用强度。方法 用 15月龄老年 Wistar大鼠 80只 ,ip D-半乳糖 4周加上鹅膏蕈氨酸 (ibotenic acid,IBO)脑内 Meynert核注射制造 AD模型 ,随机分成 AD模型组 ,双益平治疗对照组 ,补肾益智方高、低剂量治疗组 ,正常老年组和正常青年组。动物经治疗处理 4周后 ,应用 Morris水迷宫检测大鼠学习记忆的改善情况。结果 模型组 5 d的平均定位航行试验逃避潜伏期比正常 (青年、老年 )组明显延长 (P<0 .0 5 ) ,与模型组比较 ,正常青年组、正常老年组、补肾益智方高剂量组明显缩短 (P<0 .0 5 ) ,而补肾益智方低剂量组、双益平对照组缩短差异不显著 (P>0 .0 5 ) ;随着行为训练的进行 ,各组逃避潜伏期都有一定程度的下降 ,但模型组的逃避潜伏期下降速率要慢于其它组 ,表明模型组学习记忆能力较差 ,而正常青年组、正常老年组、补肾益智方高剂量组逃避潜伏期下降的速率较快 ,其次是补肾益智方低剂量组和双益平组。经每日两两比较发现 :正常青年组、正常老年组、补肾益智方高剂量组与模型组在第 2、3、4天有显著性差异 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;而补肾益智方低剂量组和双益平组虽然有差异 ,但无统计学意义 (P>0 .0 5 )。结论补肾益智方能明显改?

补肾益智方对AD动物模型大脑神经元Tau蛋白及其相关酶类的影响

目的 :观察补肾益智方对AD动物模型大脑神经元磷酸化Tau蛋白及其相关酶类蛋白磷酸酶 1(PP 1)、蛋白磷酸酶 2A(PP 2A)的影响。方法 :用Wistar大鼠 80只以D 半乳糖腹腔注射 4周加上鹅膏覃酸 (ibotenicacid ,IBO)脑内Meynert核注射制造AD模型 ,随机分成AD模型组、双益平对照组、补肾益智方高、低剂量治疗组加上正常老年组和正常青年组总共设立六个组别。动物经治疗处理 6周后 ,应用免疫组织化学方法检测大鼠海马CA1和齿状回磷酸化Tau蛋白、PP 1、PP 2A神经元数目和光密度。结果 :AD模型组海马内神经元的Tau蛋白过度磷酸化而相互集结 ,形成成对螺旋细丝 ,表达脱Tau蛋白磷酸化的磷酸酯酶PP 1、PP 2A均明显减少 ;而补肾益智方治疗组可以使这种现象得到明显改善。结论 :补肾益智方能较有效地改善AD大鼠脑内神经元的Tau蛋白过度磷酸化 ,促进PP 1、PP 2A的表达。

补肾益智方对AD细胞模型钙离子内流、细胞骨架、细胞凋亡的影响

目的 :观察补肾益智方含药血清对AD(Alzheimer’sDisease)细胞模型钙离子内流、细胞骨架、细胞凋亡的影响。方法 :在神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交的NG10 8 15细胞培养液中加入预先老化 4d的Aβ2 5 35片段共同孵育 ,建立AD细胞模型。分别加入正常老年大鼠血清、补肾益智方高剂量含药血清和补肾益智方低剂量含药血清培养 4 8h后 ;应用激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度 (Ca2 + )的变化情况 ;荧光显微镜观察细胞骨架的重组情况 ,流式细胞仪检测细胞的凋亡细胞。结果 :与正常大鼠血清加Aβ2 5 3 5组比较 ,高剂量补肾方含药血清组、低剂量补肾方含药血清组细胞内Ca2 + 浓度的相对荧光值明显降低 (P <0 0 1) ,而他们间两两比较则差异显著 (P >0 0 5 )。正常大鼠血清加Aβ2 5 3 5的NG10 8 15细胞组可以看到 ,细胞骨架严重解聚并向边缘扩散 ,细胞形态变性 ,还有细胞死亡现象 ;而高、低剂量补肾方含药血清组细胞骨架呈现微弱解聚现象 ,细胞形态正常 ,无变性和死亡现象。与正常大鼠血清加Aβ2 5 3 5组比较 ,高、低剂量补肾方含药血清组NG10 8 15细胞凋亡率明显减少 (P <0 0 1)。结论 :补肾益智方含药血清可以抑制细胞Ca2 + 内流 ,平衡控制细胞内Ca2 + 浓度 ;对Aβ引起NG10 8 15细胞骨架解聚、细胞变性等?

P物质受体在大鼠纹状体边缘区内的表达

我们以前的工作观察到纹状体边缘区内有密集的 P物质纤维及终末分布 ,本文用原位杂交和免疫组织化学方法研究了大鼠纹状体边缘区内 P物质受体 (SPR)的表达及分布。原位杂交结果发现 P物质 m RNA阳性杂交信号在纹状体内的分布不均匀 ,尾壳核内只有少量中等大小的阳性胞体 ,苍白球内只有少量较大的阳性胞体 ,而在尾壳核和苍白球之间的边缘区部位则可见许多中等大小的梭形阳性神经元胞体 ,并呈现密集的带状分布。免疫组织化学结果观察到 P物质阳性神经元胞体在纹状体内的分布与原位杂交结果一致。推测大鼠纹体边缘区内可以合成 P物质受体 ,具有接受和整合 P物质神经递质的功能。推测边缘区内 SPR神经元可能对 SP递质的接受、调节有重要作用。

大鼠纹状体边缘区内5-HT_(2A)受体的分布──原位杂交和免疫组织化学研究

已知纹状体边缘区有密集的 5 -HT纤维及终末分布。为了观察 5 -HT2 A受体 m RNA是否在大鼠纹状体边缘区表达 ,从基因分子水平和细胞水平进一步证明大鼠纹状体边缘区能否合成 5 -HT2 A受体 ,用地高辛标记的寡核苷酸探针进行原位杂交 ,研究了大鼠纹状体边缘区的 5 -HT2 A受体 m RNA的表达及分布。原位杂交结果发现 5 -HT2 A受体 m RNA阳性杂交信号在纹状体的分布不均匀 ,尾壳核只有少量中等大小的阳性胞体 ,苍白球也只有少量较大的阳性胞体 ,而在尾壳核和苍白球之间的边缘区部位则可见到许多中等大小的梭形阳性神经元胞体 ,并呈现密集的带状分布。免疫组织化学结果观察到 5 -HT受体阳性神经元胞体在纹状体的分布与原位杂交结果一致。本实验结果推测 ,大鼠纹状体边缘区神经元可以合成 5 -HT2 A受体 ,具有接受和整合 5

大鼠纹状体边缘区P物质受体的原位杂交和免疫组织化学研究

为了观察 P物质受体 m RNA在大鼠纹状体边缘区内的表达 ,本实验采用原位杂交和免疫组织化学方法从基因分子水平和细胞水平探索了大鼠纹状体边缘区能否合成 P物质受体。结果证明 ,P物质受体 m RNA阳性杂交信号不均匀地分布于大鼠中枢神经系统 ,在纹状体内的分布也不均匀 ,尾壳核内有少量中等大小的阳性胞体 ,苍白球内也有少量大的阳性胞体 ;而在尾壳核和苍白球之间的边缘区内则有许多梭形强阳性神经元胞体呈带状分布。 P物质受体单克隆抗体的免疫组织化学阳性神经元细胞体的分布与原位杂交组织化学结果一致。本研究结果提示 ,大鼠纹状体边缘区内可以合成 P物质受体 ,具有接受和整合 P物质的功能。

介绍一种非放射性标记的原位杂交新方法

在病理诊断和科研工作中，原位杂交是一种常用的检测技术。原位杂交组织化学方法是将核酸分子杂交技术与组织细胞原位显示某种特定ＤＮＡｍＲＮＡ及其产物的定性定量及变化规律相结合的一种新技术。目前，在检测特异ｍＲＮＡ的原位杂交组织细胞化学中多采用同位素标记的探...

大鼠纹状体边缘区P物质受体的免疫细胞化学研究

目的 研究大鼠纹状体边缘区的结构与功能.方法 用免疫细胞化学技术对大鼠脑切片内P物质受体的定位分布进行研究.结果 P物质受体阳性胞体和树突在中枢神经系统有不均匀分布.纹状体边缘区内有较强P物质受体阳性胞体和树突,典型的梭形细胞沿背腹方向行走.结论 边缘区内有P物质受体的分布.推测边缘区内P物质递质有接受、整合功能.

大鼠脑纹状体边缘区内5-HT2A受体的分布

目的 已知纹状体边缘区内有密集的五羟色胺（5-HT）纤维及终末分布，在此认识的基础上观察5-HT2A 受体mRNA是否在大鼠纹状体边缘区内表达，从基因分子水平和细胞水平进一步证明大鼠纹状体边缘区能否合成5-HT2A受体。方法 用地高辛标记的寡核苷酸探针进行原位杂交，研究大鼠纹状体边缘区内5-HT2A 受体mRNA的表达及分布。结果 原位杂交结果发现，5-HT2A受体 mRNA阳性杂交信号在纹状体内的分布不均匀，尾壳核内只有少量中等大小的阳性胞体，苍白球内也只有少量较大的阳性胞体，而在尾壳核和苍白球之间的边缘区部位则可见许多中等大小的梭形阳性神经元胞体，并呈现密集的带状分布。免疫组织化学结果观察到5-HT受体阳性神经元胞体在纹状体内的分布与原位杂交结果一致。结论 推测大鼠纹状体边缘区内可以合成5-HT2A受体，具有接受和整合5-HT神经递质的功能。

丝藤治疗膜性肾炎模型的药效学研究

目的 观察丝藤治疗膜性肾炎的药效学情况。方法 用阳离子牛血清白蛋白(C-BSA)制备家兔膜性肾炎模型，设立正常对照组、中药丝藤治疗组、激素治疗组和模型组。每周测定一次24h尿蛋白，实验结束时测定血浆白蛋白、血脂和肾功能等生化指标。结果 丝藤中药丝藤治疗组的24h尿蛋白、血浆白蛋白、血脂和肾功能等生化指标较模型组明显改善(P＜0.01或P＜0.05)，而激素治疗组与模型组比较无明显差异(p＞0.05)。结论 丝藤能降低尿蛋白，提高血浆白蛋白，改善肾功能，对膜性肾病有显著疗效。

抗锥虫新药──锥－46的体内致突变性研究

抗锥虫新药──锥－４６的体内致突变性研究张魁华，沈杰，周勇志，王云飞（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所）倪奕倡（中国预防医学科学院寄生虫病研究所）周伟澄，张秀平（国家医药管理局上海医药工业研究院）锥－４６（Ｔ－４６）是家畜寄研所与上海医药工业研究院共...

P物质和受体在纹状体边缘区内的分布及其与学习记忆功能的关系

目的研究纹状体边缘区内的P物质和受体的分布特点及其与学习记忆功能的关系。方法用免疫组化、原位杂交方法研究纹状体边缘区内P物质及其受体的分布特点,再用受体基因封闭方法结合迷宫行为试验研究P物质受体与边缘区学习记忆功能的关系。结果纹状体边缘区内有大量的P物质免疫阳性纤维及受体蛋白和NK1mRNA的分布,封闭纹状体边缘区内的P物质受体基因后,大鼠的学习记忆能力显著下降。结论纹状体边缘区内的P物质和受体对纹状体边缘区的学习记忆功能有重要作用,推测这种作用是P物质通过其受体NK1调节边缘区中的5-HT等神经递质来实现的。

HPLC同时测定复方二甲硝咪唑可溶性粉中地美硝唑、甲氧苄啶、磺胺对甲氧嘧啶的含量

建立同时测定复方二甲硝咪唑可溶性粉中地美硝唑、甲氧苄啶、磺胺对甲氧嘧啶含量的高效液相色谱法。采用Discovery C18色谱柱(250 mm×4.60 mm,5μm);以0.1%磷酸溶液-乙腈(90∶18)为流动相;检测波长为230 nm;流速为1.0 mL/min;进样量为10μL。地美硝唑在20μg/mL^100μg/mL浓度范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=1,n=5),平均回收率为99.87%(RSD=0.73);甲氧苄啶在5μg/mL^30μg/mL浓度范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.999 9,n=6),平均回收率为99.83%(RSD=1.46);磺胺对甲氧嘧啶在20μg/mL^100μg/mL浓度范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=1,n=5),平均回收率为99.57%(RSD=0.85)。该方法简便可行、准确、快速,可用于复方二甲硝咪唑可溶性粉中上述3种成分的含量测定。

锥－46致畸性研究

锥－４６致畸性研究张魁华，沈杰，周勇志，王爱华，王云飞，邱巧平，钟淑梅（中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所２００２３２）周伟澄，张秀平（上海医药工业研究院）锥－４６（Ｔ４６）是我所与上海医药工业研究院合作研制的一种三嗪类抗锥虫新药。经实验室试验，治...

抗锥虫新药—锥－46的致癌性预测

抗锥虫新药—锥－４６的致癌性预测张魁华，沈杰，倪奕倡（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所）（中国预防医学科学院寄生虫病研究所）世界上每年有近万种新化学物进入市场，而要确定一个化学物的致癌性试验既费时、费力、耗资又大。一般都用短期试验来检测化学物的致突变...

抗锥虫新药锥46的体外致突变性试验

抗锥虫新药锥４６的体外致突变性试验张魁华，沈杰，周勇志，王云飞（中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所２００２３２）锥４６（Ｔ４６）是抗锥虫新药，经实验室试验，疗效好、副作用小、使用方便，是一种很有开发价值的新药。为评价该药的安全性，我们按照农业部颁布...

老年性痴呆模型大鼠海马结构nNOS神经元的变化

目的 研究老年性痴呆模型大鼠海马结构nNOS神经元的变化情况。方法 用 15月龄老年Wistar大鼠以D 半乳糖腹腔注射 4周加上鹅膏蕈氨酸 (ibotenicacid ,IBO)脑内Meynert核注射造模 ,然后运用免疫组织化学方法检测大鼠海马CA1、CA3和齿状回nNOS神经元数目。结果 老年性痴呆模型大鼠海马CA1、CA3和齿状回nNOS阳性神经元数目及其积分光密度较正常老年组和正常青年组有明显减少的趋势 ,组间比较有差异显著性。

大鼠纹状体边缘区内烟碱型乙酰胆碱受体mRNA的表达

目的研究纹状体边缘区内有无乙酰胆碱受体（ｎＡＣｈＲ）的分布。方法用地高辛标记的 ｎＡＣｈＲ ｃＤＮＡ作为探针， 与大鼠脑切片进行原位杂交。结果大鼠脑纹状体内可见较多的ｎＡＣｈＲ阳性神经元，其中尾壳核中可见较多中等大小 的多极阳性神经元，在尾壳核和苍白球之间的边缘区部位，可见较多阳性梭形细胞，呈密集的带状分布。结论纹状体边 缘区内存在 ｎＡＣｈＲ ｍＲＮＡ的表达，推测边缘区内的 ｎＡＣｈＲ阳性神经元对调节边缘区的学习记忆功能有重要作用。