胶体金免疫层析法在碳青霉烯酶检测中的价值及应用

目的系统性评价胶体金免疫层析法在耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)碳青霉烯酶型检测中的价值及性能情况,为实验室进行CRE碳青霉烯酶快速检测提供可靠依据。方法对收集的70株无菌部位分离的CRE菌株同时使用PCR扩增、基因测序和胶体金免疫层析法进行碳青霉烯酶型检测,以测序结果为参考标准,评价胶体金免疫层析法的实验室检测性能。结果检出碳青霉烯酶基因69株,其中KPC型49株,OXA-48型12株,IMP型1株,NDM型3株,同时检出KPC和OXA-48型2株,同时检出OXA-48和NDM型1株,同时检出KPC和NDM型1株,未检出以上5种基因型1株。胶体金免疫层析法结果与测序结果相比灵敏度100%,特异度97.1%。不符合2株,其中1株为测序结果同时存在KPC和OXA-48两种型,胶体金检测结果为KPC型;1株为测序结果同时存在KPC和NDM两种型,胶体金检测结果为KPC型。结论胶体金免疫层析法作为一种新的CRE碳青霉烯酶型检测方法,操作简单,结果容易判读,能够短时间内检测出CRE中的产KPC、OXA-48、VIM、IMP和NDM型碳青霉烯酶的情况,灵敏度和特异度能够满足临床需求,可作为实验室进行碳青霉烯酶型快速检测的方法,指导临床诊治CRE。

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌感染的预防和治疗研究进展

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌在世界范围内广泛传播,其中碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌最为显著,这些细菌通常对临床常用抗菌药物耐药。在新药的研发和应用有限,以及对联合治疗疗效不明确的背景下,该文分析了有关碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌感染的预防、单一及联合治疗的相关文献,在碳青霉烯酶流行和抗菌药物耐药性增加的情况下,通过预防和抗感染治疗联动来延缓耐药的发生,为预防耐药菌的传播和抗感染治疗提供新的策略。

角膜塑形镜联合视觉训练对青少年近视防控的效果

目的探讨角膜塑形镜联合视觉训练对青少年近视防控的效果。方法选取2022年7月~2023年6月在我院治疗的80例符合角膜塑形镜配戴要求的青少年近视患者,按照随机分配的方式分为对照组(40例)和观察组(40例)。对照组给予配戴角膜塑形镜干预,观察组给予配戴角膜塑形镜联合视觉训练干预。比较两组干预前后的近视相关参数、双眼调节功能以及主观满意度。结果干预3个月后,观察组屈光度、裸眼视力均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但两组患者眼轴长度比较差异无统计学意义(P>0.05)。干预3个月后,观察组调节幅度(AMP)、调节灵敏度(AFB)、负相对调节(NRA)高于对照组,滞后量(Lag)、正相对调节(PRA)低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组主观满意度(87.5%)明显高于对照组(67.5%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论与单一配戴角膜塑形镜干预相比,配戴角膜塑形镜联合视觉训练对青少年近视防控效果更优,有助于改善患者视觉质量。

肠道定植耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌分子特征及其感染相关研究

目的通过对直肠拭子主动筛查出的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)和对应患者感染后分离出的CRE进行配对分析研究,以探讨CRE定植和感染之间的分子特征异同,为临床CRE感染的防控提供帮助和指导。方法采集2021年1月至2021年12月住院患者直肠拭子标本进行CRE菌株筛查。监测筛查阳性患者的感染发生情况,对感染菌株及其定植菌株同时进行多位点序列分型、耐药基因和毒力基因检测,并进行测序分析。结果CRE主动筛查定植率为2.41%(75/3116),其感染率为45.3%(34/75)。碳青霉烯酶耐药基因检出以bla_(KPC)为主:定植组bla_(KPC)(25/34)、bla_(OXA48)(9/34),感染组bla_(KPC)(25/34)、bla_(OXA48)(10/34),检出率P>0.05;ST分型以ST11型检出率最高,定植组ST11型(25/34)、ST231型(9/34),感染组ST11型(25/34)、ST231型(9/34),检出率P>0.05。毒力基因检出率较高的为:定植组mrkD(34/34)、uge(32/34)、fimH(33/34)、wabG(32/34)、entB(32/34),感染组mrkD(34/34)、fimH(31/34)、uge(34/34)、wabG(31/34)和entB(30/34),检出率P>0.05。定植菌是否发生感染与毒力基因uge、iucA、iutA、rmpA和iroB相关,P≤0.05。结论肠内定植CRE与其感染CRE之间高度同源,主动筛查是防控CRE感染的重要举措,通过CRE主动筛查对高危人群预防CRE感染意义重大。

2017-2021年滇中及滇西部地区多家三级医院尿液病原菌分布和耐药分析

目的探讨2017-2021年云南省中部和西部地区多家三级综合医院尿标本中分离病原菌的分布和耐药情况,为临床初期经验性用药提供依据。方法分析2017-2021云南多家三级综合医院尿标本中检出的同一患者非重复细菌,采用纸片扩散法或自动仪器法进行药敏检测,按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)2021年标准进行判读,使用WHONET5.6软件对数据进行统计分析。结果共检测出细菌27495株,革兰阴性菌20955株占76.2%,革兰阳性菌6540株(占23.8%);女性标本16966株(占61.7%),男性标本10529株(占38.3%);>65岁的标本11159株(占40.6%),>18~65岁的标本15295株(占55.6%),≤18岁的标本1041株(占3.8%);排前五位分别为大肠埃希菌(51.4%)、屎肠球菌(9.5%)、肺炎克雷伯菌(7.8%)、粪肠球菌(6.4%)、铜绿假单胞菌(3.0%)。其中大肠埃希菌对替加环素、碳青霉烯类、阿米卡星、呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、磷霉素的耐药率<5%;对青霉素类、第一、二、三代头孢菌素、喹诺酮类有较高的耐药水平在49.2%~100.0%;肺炎克雷伯菌对替加环素的耐药水平较低在0.0%~8.4%,对碳青霉烯类、阿米卡星耐药率介于5.8%~26.2%;铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药性均高于30.0%。屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁、替加环素的耐药率<5.0%;粪肠球菌对磷霉素、呋喃妥因、氨苄西林、青霉素G的耐药率<10.0%。结论尿标本病原菌多样,早期经验性治疗的同时,应尽快根据培养鉴定及药敏结果针对性用药,从而提高治疗效果和减缓耐药性的产生和传播。

实时荧光PCR检测结核杆菌DNA的分析灵敏度验证及临床应用

目的以结核杆菌DNA检测为切入点,建立实时荧光PCR定性方法分析灵敏度验证的方法并进行评价。方法取5个低浓度标本分别平行检测16次,计算每个标本的检出率,分别以浓度的对数(以10为底)、Ct值和检出概率作曲线拟合,得到结核杆菌DNA荧光PCR检出率为50%和95%所对应的浓度及Ct值,并据此建立结果报告策略。以巢式PCR和实时荧光PCR同时检测52例临床标本,评价所建立的结果报告策略的适用性。结果结核杆菌DNA检出率为50%和95%所对应的浓度分别为69copy/mL,2.46×10~3 copy/mL。所建立的结果报告策略为结果大于2.46×10~3 copy/mL时报告阳性,结果小于2.46×10~3 copy/mL而大于69copy/mL时进行复查,如果复查为阳则报告阳性,如果复查结果为阴性时报告为阴性,结果小于69copy/mL报告为阴性。52例临床标本经检测后,荧光PCR检出6例阳性,巢式PCR检出4例阳性,计算kappa值经u检验(kappa=0.78,u=3.58,P<0.05)表明两种方法报告的结果具有良好的一致性。结论依据检出概率-浓度曲线制定结核杆菌-DNA荧光PCR定性方法结果报告策略具有较好的临床适用性,依据最低检出限制订结果报告策略可应用于基于定量数据的定性PCR。

不同部位来源的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌检出情况及耐药性分析

目的:分析本院2018~2020年临床不同部位来源的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)的检出情况及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:采用标准纸片法或仪器法,按照统一技术方案,鉴定并完成细菌耐药性检测。药敏结果依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准进行判读,采用WHONET 5.6分析数据。结果:2018~2020年共检出肠杆菌目细菌11389株,其中,检出CRE 1690株(14.84%),2018年657株、2019年555株、2020年478株,呈逐年下降趋势。2018~2020年CRE菌株排名前3位的均是肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌,共检出肺炎克雷伯菌1452株(占85.92%)、大肠埃希菌94株(占5.56%)、阴沟肠杆菌56株(占3.31%)。不同部位来源的肠杆菌目细菌中CRE的占比不同。其中,脑脊液中CRE的占比最高,连续3年均超过30%,且呈增长趋势;尿液中CRE占比最低,低于10%。未发现对替加环素耐药的CRE。CRE除对碳青霉烯类抗菌药物耐药外,对其他抗菌药物普遍耐药。对部分抗菌药物敏感的不同部位来源的CRE的耐药率不同。对部分抗菌药物敏感的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的耐药率高于碳青霉烯类耐药大肠埃希菌与碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌。结论:CRE的检出率呈逐年下降趋势,构成和耐药性变化不大。不同部位来源的CRE检出率不同,检出的CRE耐药性不同,临床需结合CRE来源部位制定抗感染方案。

1例内脏利什曼病死亡病例诊治体会

内脏利什曼病,又称黑热病,一般由杜氏利什曼原虫与婴儿利什曼原虫引起。该病的临床表现缺乏特异性,可表现为长期不规则发热伴畏寒、寒战,肝、脾肿大,渐进性贫血,淋巴结肿大及消耗症状;面部、四肢及腹部皮肤颜色变深,故名黑热病。该病误诊率高,易与血液系统疾病、风湿免疫系统疾病混淆,如未经治疗,病死率超过90%[1]。本研究对昆明医科大学第一附属医院收治的1例黑热病患者的诊治体会进行分析。

无菌体液中耐碳青霉烯肠杆菌科细菌的临床分布及耐药性分析

目的分析昆明医科大学第一附属医院无菌体液中分离出的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的临床分布情况和耐药性,为临床抗菌药物的合理使用提供依据。方法采用标准纸片法或仪器法,按照统一技术方案,鉴定并完成细菌耐药性检测。药敏结果依据CLSI2020标准进行判读,数据分析用WHONET5.6完成。对表型确定的CRE菌株进行测序分析,确定基因型。结果无菌体液中共分离出46株CRE,其中肺炎克雷伯菌43株,大肠埃希菌1株,产气克雷伯菌1株,阴沟肠杆菌1株。耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌中检出携带bla_(KPC)基因32株、bla_(OXA-48)基因7株、bla_(IMP)基因1株,检出同时携带bla_(KPC)、bla_(OXA-48)基因2株,检出未携带bla_(KPC)、bla_(OXA-48)、bla_(NDM)、bla_(IMP)、bla_(VIM)基因的菌株1株。46株CRE除对碳青霉烯类抗菌药物耐药外,也对β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、磷霉素等抗菌药物耐药,未发现对替加环素耐药的菌株。结论无菌体液中分离的CRE以肺炎克雷伯菌为主,酶型以KPC为主,有多种耐药基因同时存在的情况,对常用抗菌药物普遍耐药。医院需加强对CRE的防控,实验室应结合自身条件及临床需求开展碳青霉烯酶型的检测。

PDCA循环法在医学检验进修医生教学中的应用

医学检验进修医生培养是提升基层医院医学检验从业人员技术能力的重要方式之一,是推进我国医疗卫生体制改革的重要保障之一。进修医生具有一定工作经验,个人能力、进修目的差异大,个性化、科学化、规范化、制度化的培训方案是培训效果的重要保障。本文总结了PDCA循环法在进修医生培养中的详细应用,通过PDCA循环法,实现因材施教、按需施教,提高进修医生的培训质量。

2018-2020年多中心血流感染分离菌分布及耐药性分析

目的分析2018-2020年多中心血流感染病原菌的分布及耐药演变特点,为临床合理选用抗菌药物提供可靠依据。方法采用药敏纸片法或仪器法,对11所三级医院按统一技术方案,进行细菌鉴定及药物敏感性试验,按2020年CLSI折点标准判断结果,数据分析使用WHONET5.6。结果11所三级医院3年血流感染标本共分离病原菌20742株,其中革兰阴性菌12399株(59.8%),革兰阳性菌8343株(40.2%);排名前3的依次为大肠埃希菌(5231株,25.2%)、肺炎克雷伯菌(2840株,13.7%)、表皮葡萄球菌(1517株,7.3%)。3年药敏结果表明,大肠埃希菌对环丙沙星的耐药率均高于60.0%(62.8%、63.6%和66.3%);肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类耐药率逐年上升(16.7%、16.8%和21.6%),其中空军军医大学第一附属医院、昆明医科大学第一附属医院最高36.2%和30.6%;MRSA检出率逐年下降(32%、31.6%和30.7%);非发酵革兰阴性杆菌铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为10.2%、10.5%和7.5%;鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率较高(77.6%、76.7%和74.7%);屎肠球菌检出率高于粪肠球菌,除利奈唑胺和四环素外,屎肠球菌的耐药性均高于粪肠球菌;布鲁菌共检出300株,其中宁夏医科大学总医院检出最多(165株)。结论11所医院血流感染病原菌3年检出及构成变化不大,以革兰阴性菌为主,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌占绝对优势;大肠埃希菌对喹诺酮类耐药率较高;鲍曼不动杆菌耐药情况严重;布鲁菌所有成员单位均有检出,宁夏医科大学总医院检出数最多。临床应持续加强细菌耐药监测以指导临床合理用药。

2018—2020年多中心耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的流行病学特征及耐药性分析

目的了解多中心耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的流行病学特征,为临床抗感染治疗提供依据。方法收集2018年1月—2020年12月全国不同地区11家医院6123株耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)临床分离株,按统一方案和标准进行菌株鉴定和体外药物敏感性试验,药敏结果参照2020版CLSI标准判读,并用WHONET 5.6软件统计分析。结果3年间CRE检出率分别是6.4%(1897/29525)、6.8%(2186/32239)、7.3%(2171/29816),其中耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CR-KPN)、大肠埃希菌(CR-ECO)的3年总检出率分别是13.2%和2.0%。CRE菌株主要分离自痰液标本43.8%(2681/6123),其次是尿液标本16.0%(977/6123)、血液标本8.1%(496/6123)和分泌物标本4.5%(278/6123)。不同种属耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌中不同标本类型的占比不同,CR-KPN以痰液标本为主,CR-ECO以尿液标本为主。不同科室的CRE检出率有所不同,以ICU检出最高。体外药敏结果显示,CRE对临床常用抗菌药物高度耐药,不同菌属CRE对临床常用抗菌药物的耐药率略有不同。CR-KPN和CP-ECO对大多数抗菌药物的耐药率高于耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌(CR-ECL),对替加环素、多黏菌素B的体外抗菌活性较高。结论CRE检出呈上升趋势,各地区需加强本地区CRE监测,加强院内感染防控措施,有效遏制CRE的暴发流行。

耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌定植与感染临床特征及危险因素分析

目的分析昆明医科大学第一附属医院住院的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)定植与感染者临床特征、耐药情况和危险因素,为预防CRE感染提供依据。方法收集昆明医科大学第一附属医院2021年1—11月主动筛查CRE定植阳性患者的临床资料和耐药状况,对同种CRE定植和感染患者菌株进行多位点序列分型(MLST),其中CRE肠道外感染者作为病例组,未发生CRE肠道外感染者作为对照组,并通过单因素分析对比两组之间差别,多因素Logistic分析对CRE感染者所引起的独立危险因素。结果3116例中主动筛查CRE定植阳性的患者检出CRE 73株,检测阳性率为2.34%,其中耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌63株(86.30%)、耐碳青霉烯大肠埃希菌8株(10.96%)、耐碳青霉烯阴沟肠杆菌2株(2.74%)。尚未出现对多黏菌素和替加环素耐药的菌株,对阿米卡星、复方磺胺甲噁唑、庆大霉素等部分敏感,对其他抗菌药物的耐药率为100.0%。病例组31株发生定植后的CRE感染,感染部位以下呼吸道感染为主,其次为血液、尿路。对病例组CRE定植后发生感染耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌30株配对MLST检测,为ST11(23/30)和ST231(7/30)两种型。通过多因素Logistic分析发现,中心静脉置管、使用质子泵抑制剂、有多重耐药菌感染史是CRE感染的独立危险因素(P<0.05)。结论主动筛查在CRE防控中具有重要意义,中心静脉置管、使用质子泵抑制剂、有多重耐药菌感染史是CRE感染的独立危险因素,应加强对易感患者的监控。

耐碳青霉烯类肠杆菌的实验室快速检测方法研究进展

细菌耐药(AMR)是全球公共健康领域的重大挑战,世界卫生组织(WHO)要求各国积极行动,采取系统性措施遏制AMR,否则感染性疾病将成为严重威胁人类健康与生命安全的首要因素。控制AMR是医疗机构主要的工作内容之一,是医疗机构质量评价和评级的指标之一。近年来多重耐药细菌检出率,尤其是革兰阴性菌的检出率呈快速上升趋势,且革兰阴性菌中肠杆菌目细菌占比非常高,超过60%[1-2]。肠杆菌目细菌中应重点关注对第三代头孢菌素或碳青霉烯类抗菌药物耐药的细菌[3]。碳青霉烯类抗菌药物具有良好的通透性和光谱抗菌活性,被认为是治疗肠杆菌目细菌感染的最后一道防线[4]。

云南省检验人员现状调查与分析

目的通过调查云南省公立医疗机构检验人员的工作现状,分析目前云南省检验人才配置所存在的问题。结合国内相关情况探索解决问题的对策和具体措施,为改进云南省现有检验人才配置及培养策略提供数据支持和实证依据。方法对云南省32家公立医疗机构661名检验从业人员进行问卷调查。结果这32家主要公立医疗机构共有661名检验工作者反馈调查问卷;男、女性比例为1∶2.19;男性年龄中位数为34岁,女性年龄中位数为32岁;其中,检验医师比例为7%,职称构成为正高13.9%、副高19.4%、中级33.3%、初级33.3%,学历构成为博士11.1%,硕士55.6%,本科30.6%,专科2.7%,检验技师比例为93%,职称构成为正高1.9%、副高10.4%、中级26.0%、初级61.7%,学历构成为博士0.9%,硕士7.6%,本科73.0%,专科16.4%,中专2.2%。另外,其中21家大型公立医疗机构科主任对各学历层次员工能力综合评价(10分制)博士(9.02±0.79)分,硕士(8.57±0.76)分,本科(8.04±1.02)分,专科(7.09±1.14)分,中专及以下(6.91±1.23)分。结论云南省公立医疗机构检验工作者配备基本合理,检验医师学历较高、职称配置合理,但其设置率不足,人才缺乏;检验技师学历、职称结构有进一步优化的空间。

某院妊娠期尿标本细菌分布及耐药性分析

目的:分析2019年1月~2021年11月本院妊娠期女性产检尿液细菌培养的病原菌分布及耐药特点,为临床围产期合理选用抗菌药物提供依据。方法:对妊娠期女性产检中的清洁中段尿进行细菌鉴定及药敏试验,药敏结果依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准进行判读,采用WHONET 5.6软件对数据进行统计分析。结果:2019年1月~2021年11月本院共进行了22462份妊娠期女性产检尿液样本培养,共检出细菌503株,其中大肠埃希菌245株,无乳链球菌135株,粪肠球菌49株,肺炎克雷伯菌18株,奇异变形杆菌10株,其他病原菌46株。结论:妊娠期女性尿培养细菌在构成上与其他人群有一定差别,妊娠期尿标本分离细菌的耐药检测可为妊娠期女性尿路感染抗菌药物合理应用提供参考数据。

古田县柿子亲缘关系的ISSR分析

运用ISSR分子标记技术对古田县境内主要柿子种质进行遗传多样性分析,探究其亲缘关系。结果表明:14条UBC引物对15份材料共扩增出113个DNA位点,多态位点共93个,多态性带占比为82.30%。采用Ntsys-pc 2.10e软件分析计算,15份材料的相似系数为0.8230~0.5841。表明福建省古田县柿子种质资源的多样性较丰富。研究结果可为柿属种质资源的收集、鉴定和栽培利用提供参考。

运用财务手段化解财务活动各项风险

财务活动是企业在再生产过程中客观存在的资金运动以及所体现的经济利益关系，企业再生产过程表现为资金运动的过程，而资金运动过程的各阶段总是与一定的财务活动相对应的，财务活动是企业一切生产经营活动的缩影，根据企业的资金活动，财务活动分为筹资、投资、资金回收和收益分配四项活动，

氯化镁水合物脱水制取无水氯化镁的理论研究

无水氯化镁的生产方法有很多种，包括以菱镁矿为原料，经破碎后与焦石油按一定比例混合，在氯化炉内高涅氯化制取熔融无水氯化镁；以卤水为原料经脱水后制取无水氯化镁。察尔汗盐湖氯化镁储量40．6亿吨，品位高，储量大，本文以盐湖卤水蒸发浓缩的六水氯化镁为原料，通过六水氯化镁脱水的反应机理，提出六水氯化镁脱水的控制温度范围以及氯化氢气体的输入量，为工业生产提供理论参考。