不同产地和生长年限伊贝母地上部位与鳞茎生物碱含量研究

[目的]研究不同产地和生长年限伊贝母地上部位与地下鳞茎总生物碱含量。[方法]采用酸性染料比色法测定总生物碱的含量。[结果]在不同产地和生长年限的伊贝母中,其地上部位与地下鳞茎的生物碱含量存在差异,4年生的伊贝母总生物碱含量比3年和5年的含量高,地上部位中总生物碱含量为地下鳞茎中的1.258~2.870倍,新疆伊犁州新源县中的伊贝母总生物碱含量均比其他产地的总生物碱含量低。[结论]不同产地和生长年限伊贝母中总生物碱含量因产地及生长年限不同而存在差异,但总体上地上部分的总生物碱含量高于地下鳞茎,存在进一步研究与开发的价值。

新疆贝母属8种药用植物叶片的解剖学结构

在数码显微镜下,对新疆贝母属(Fritillaria L.)7个种和1个变种的药用贝母叶片进行了解剖结构观察。结果发现:新疆贝母属8种药用贝母的基本结构相同,均由表皮、叶肉细胞和叶脉3个部分组成,上下表皮均为单层,无表皮毛等附属物。叶表皮细胞表面观为长方形或条形,除伊犁贝母(F.pallidiflora)的下表皮细胞类似平行四边形,表皮细胞长轴与叶脉平行,垂周壁为平直稍弯曲、浅波状或深波状;气孔器为Allium型,椭圆形,气孔长轴与叶脉平行,除了新疆贝母、大白花贝母的气孔器仅分布于下表皮一般同时分布于上表皮和下表皮,并且气孔器在下表皮的分布指数大于上表皮。叶表皮细胞的形状、垂周壁式样、气孔器的分布、维管束直径等特征较为稳定,可为新疆贝母属种间的划分及鉴别提供一定的试验依据和参考。

不同栽培年限伊贝母组织化学研究

目的:研究伊贝母鳞茎组织结构及主要药用成分在鳞茎中的分布部位。方法:采用植物解剖学和组织化学方法对不同栽培年限伊贝母鳞茎的显微组织结构以及生物碱、皂苷成分的分布进行观察研究。结果:伊贝母鳞茎主要由表皮、皮层薄壁组织、有限外韧型维管束组成。维管束的数目在伊贝母种间上有一定的差异,新疆贝母的维管束数目略大于伊犁贝母;生物碱主要存在于不同栽培年限伊贝母鳞茎的皮层薄壁组织细胞及维管束周围的薄壁组织细胞上,其总生物碱含量从高到低的顺序为:3年生的伊贝母≥4年生的伊贝母>5年生的伊贝母;皂苷主要存在于不同栽培年限伊贝母鳞茎的表皮细胞和维管束周围的薄壁组织细胞上,其总皂苷含量从高到低的顺序为:5年生的伊贝母≥4年生的伊贝母>3年生的伊贝母,在种间及同种植物的不同栽培年限或不同组织结构中,其生物碱与皂苷的含量存在差异。其中,以4年生伊贝母药材中的生物碱与皂苷含量较高,表明其药用价值也较高,因此推断第4年为最佳采收期。结论:伊贝母鳞茎中大量薄壁细胞是主要药用成分的分布部位,同时研究结果可为合理采收提供依据。

新疆贝母属8种药用贝母地上部位与鳞茎生物碱含量差异研究

目的：对新疆贝母属8种药用贝母地上茎、叶与地下鳞茎部位总生物碱含量进行对比研究。方法：采用酸性染料比色法测定总生物碱的含量。结果：新疆贝母属8种药用贝母不同部位生物碱含量由高到低的顺序为：叶〉鳞茎〉茎;新疆贝母属8种药用贝母总生物碱含量由高到低的顺序为：伊犁贝母〉裕民贝母〉新疆贝母〉黄花贝母〉托里贝母〉大白花贝母〉滩贝母〉小花贝母;地上部位中总生物碱含量为地下鳞茎中的1.174~1.499倍。结论：新疆贝母属8种药用贝母植株中总生物碱含量因品种及部位不同而存在差异,但总体上地上茎叶的总生物碱含量高于地下鳞茎,存在进一步研究与开发的价值。

中医药治疗布鲁氏菌病的用药规律及药物作用机制分析

目的基于数据挖掘技术和网络药理学分析中医药治疗布鲁氏菌病的用药规律及药物作用机制。方法收集治疗布鲁氏菌病患者的1095张有效中药处方,通过Microsoft Excel软件对处方中的中药进行药类、四气五味、归经的频次及频率进行统计分析。采用SPSS Modeler18.0软件对药物进行关联规则和可视化网络图分析。采用SPSS20.0软件对药物进行聚类分析。依托中药系统药理学分析平台筛选药物活性成分相关靶点,GeneCards数据库筛选布鲁氏菌病相关靶点,取交集,获得核心靶点蛋白,通过STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络。对核心中药活性化合物作用靶点蛋白进行GO分析和KEGG分析,构建靶点-信号通路网络图。结果治疗布鲁氏菌病常用中药以补虚药、活血化瘀药、清热药为主,其药物归经主要集中在脾(胃);四气五味以温、甘为主;高频次用药为蜜炙甘草;急性期核心用药为生地黄、北沙参、知母、淡竹叶、栀子、牡丹皮、乳香、没药、独活、防己等;慢性期核心用药为黄芪、当归、党参、蜜炙甘草、茯苓、续断、盐杜仲、牡丹皮、川芎等。中药主要活性成分包括槲皮素、β-谷甾醇、山奈酚、豆甾醇、木犀草素,其主要通过调节PTGS1、PTGS2、IL6、TNF、MAPK14、MMP9、TGFB1、CXCL8等靶点发挥作用,调控IL17信号通路、Th17细胞分化、破骨细胞分化等信号通路。结论治疗布鲁氏菌病的常用中药主要活性成分包括槲皮素、β-谷甾醇、山奈酚、豆甾醇、木犀草素等,主要通过调控IL17信号通路、Th17细胞分化、破骨细胞分化等信号通路来抑制炎症、改善骨关节功能、调节免疫功能,从而达到治疗目的。

新疆贝母属8种药用植物地上部位叶的组织化学研究

[目的]研究新疆贝母属药用贝母主要药用成分在叶片中的分布及含量差异。[方法]采用植物解剖学和组织化学方法对新疆贝母属8种药用贝母叶片中生物碱及皂苷成分的分布进行观察研究。[结果]生物碱主要存在于新疆贝母属8种药用贝母叶片的叶肉细胞上,其总生物碱含量从高到低的顺序为伊犁贝母>新疆贝母≈裕民贝母≥托里贝母>黄花贝母≈大白花贝母≈滩贝母>小花贝母;皂苷主要存在于新疆贝母属8种药用贝母叶片的叶肉细胞上,其总皂苷含量从高到低的顺序为大白花贝母>托里贝母≈黄花贝母≥新疆贝母>滩贝母≥伊犁贝母>裕民贝母≥小花贝母,且在种间随着总生物碱含量的增加而总皂苷含量相应减小。[结论]活性成分含量与叶肉细胞占叶片横切面的百分比有一定联系,在选择药用品种时要充分考虑这一因素,同时研究结果也可为合理采收及扩大新药源提供理论依据。

新疆伊贝母有效成分含量与气候因子相关性分析

应用系统相关分析法和灰色关联度分析法，研究伊贝母(新疆贝母Fritillaria walujewii、伊犁贝母F.pallidiflora)有效成分含量与气候因子的相关性，筛选影响其质量的主导因子。结果表明，新疆不同产地气候因子存在较大差异，伊贝母总生物碱和西贝母碱含量与年均气温、地面温度、日照时数、相对湿度、降水量等5个气候因子无显著相关性；西贝母碱苷含量与年均相对湿度有极显著正相关(P<0.01)，与年均地面温度有显著正相关(P<0.05)，与年均日照时数有显著负相关(P<0.05)；水溶性成分腺苷含量与年均降水量和地面温度均有显著正相关(P<0.05)；水溶性成分β-胸苷含量与年均气温、相对湿度和地面温度均有显著正相关(P<0.05)，与年均日照时数有显著负相关(P<0.05)。上述相关分析结果与灰色关联度分析结果一致。年均气温、降水量、相对湿度和地面温度升高有助于伊贝母中西贝母碱苷、腺苷和β-胸苷的形成与积累，年均日照时数升高则抑制西贝母碱苷和β-胸苷的形成与积累。伊贝母最佳适宜生长的气候条件为年均气温13～27℃，降水量169～288 mm，相对湿度55%～66%，日照时数2140～2547 h，地面温度26～41 ℃。

基于数据挖掘分析治疗新型冠状病毒肺炎不同阶段中药处方用药规律

目的基于数据挖掘技术分析中医药治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)不同阶段中药处方用药规律,总结用药特点和思路,为中医药治疗提供依据。方法检索2020年6月10日之前国家、部分省、自治区和直辖市发布的中医药治疗COVID-19诊疗方案,及中国知网、万方、维普三大数据库中药治疗COVID-19相关文献报道,通过Microsoft Excel对中药进行药类、四气五味、归经的频次统计分析,IBM SPSS20.0进行聚类分析,IBM SPSS Modeler 18.0进行关联规则及网络视图分析,来研究治疗不同阶段核心用药规律及探讨其合理性。结果治疗COVID-19常用中药以清热药、解表药、补虚药为主,其药物归经主要集中在肺、脾,而四气五味以温、甘、苦、寒、辛、平为主;使用高频次药物为甘草、杏仁、石膏等;初期COVID-19的核心中药:杏仁、石膏、麻黄、生薏苡仁、苍术;中期COVID-19的核心中药:杏仁、甘草、葶苈子、大黄、石膏、桃仁,恢复期COVID-19的核心中药:甘草、北沙参、麦冬、茯苓、砂仁、陈皮、党参、法半夏。结论中药治疗初期COVID-19以化痰止咳平喘、清热泻火、发汗解表为主,中期COVID-19以化痰止咳平喘、清热解毒、补脾益气为主,恢复期COVID-19以理气开胃、健脾益肺、养阴生津为主,与病机相吻合。

分析中药治疗布鲁氏菌病的作用机制

目的:运用临床科研一体化模式,采用网络药理学技术分析中药对布鲁氏菌病的多成分、多靶点、多通路的治疗机制,为中药治疗布鲁氏菌病提供依据。方法:使用TCMSP数据库分析近30年治疗布鲁氏菌病的核心中药所包含的活性化合物,在Uniport和GeneCards数据库中匹配活性化合物的靶点基因,构建活性成分-靶点基因网络图。在STRING数据库中构建核心靶点PPI网络图,通过Metascape数据库分析GO功能和KEGG信号通路富集情况,绘制靶点基因-信号通路网络图;并利用Auto Dock Tool分别对蛋白及小分子化合物进行加氢、加电荷等处理,利用Auto Dock Vina进行对接计算。结果:获得310个中药化合物靶点基因与80个疾病靶点基因,得到核心靶点基因44个,富集在94条信号通路上,主要为IL-17 signaling pathway和Cytokine-cytokine receptor interaction信号通路,筛选出5个主要活性化合物均能与PTGS1、PTGS2和NCOA2等靶点蛋白结合,且结合能在-5.51kcal·mol^(-1)~-7.96kcal·mol^(-1)。结论:中药治疗布鲁氏菌病的主要活性成分为槲皮素、β-谷甾醇、山奈酚、豆甾醇和木犀草素等,其主要通过调节PTGS1、PTGS2、NCOA2、SCN5A、IL6、TNF、MMP9、TGFB1和MAPK14等靶点,调控IL-17 signaling pathway、Cytokine-cytokine receptor interaction、TNF signaling pathway、Thermogenesis和Osteoclast differentiation等信号通路来抑制炎症、调节体温、改善骨关节、增强免疫、保护神经及肝脏达到治疗目的,为布鲁氏菌病的中药治疗提供参考依据。

观察比较贝母类生物碱分布的3种切片方法

目的:建立一种能更清楚有效地观察贝母鳞茎中生物碱沉淀分布及含量的切片方法。方法:以新疆贝母为供试材料,利用石蜡切片法、徒手切片法及改良切片法制备植物鳞茎组织切片;切片经改良碘化铋钾处理,并通过Mikroskop Primo Star X2005显微镜观察和比较3种不同切片中生物碱沉淀分布。结果:改良切片法处理的切片中生物碱沉淀分布观察清晰,可用于定性及定量分析,并且实验过程中试剂对生物碱的影响较小,操作方法简便、快速、有效。结论:贝母鳞茎生物碱的观测适合采用改良切片法制片。

新疆贝母属药用贝母总生物碱含量测定研究

目的：探讨新疆贝母属药用贝母中总生物碱含量测定的最佳方法,并比较其总生物碱含量差异。方法：用氯仿∶甲醇（4∶1）混合溶剂提取总生物碱;采用酸性染料比色法测定新疆贝母属药用贝母中总生物碱含量。结果：酸性染料选择溴麝香草酚蓝比色的显色条件为p H 5.0缓冲液4.0 m L;氯仿萃取1次,每次2.6 m L;无水硫酸钠脱水用量0.25 g。西贝素在12.24~73.44μg范围内呈良好的线性关系;平均回收率101.53%,RSD为2.67%（n=5）。所测生物碱的含量在新疆贝母属药用贝母种间存在一定差异,除滩贝母和小花贝母总生物碱含量相对较低外,其余6种贝母总生物碱含量在0.589%~0.869%之间,比以往文献测定的总生物碱含量均较高。结论：所建立的方法简便、精确,重复性好,可用于新疆贝母属药用贝母总生物碱含量的测定,其总生物碱含量为新疆贝母属药用贝母资源进一步开发利用提供科学依据。

新疆贝母属药用贝母ISSR-PCR体系的确立和优化

目的:建立适合新疆贝母属植物总DNA的ISSR-PCR优化反应体系,为新疆贝母属8种药用贝母品种鉴定和遗传多样性研究提供依据。方法:综合利用单因素实验和L16(45)正交试验,对因素Taq DNA聚合酶、d NTPs、Mg2+、引物浓度、模板DNA含量进行优化,并考察循环次数、延长时间及退火温度。结果:每个因素的不同水平对PCR反应有显著影响,其中Mg2+影响最大。新疆贝母属植物总DNA的ISSR-PCR最适体系为50μL:5μL 10×Buffer、2.5 mmol/L Mg2+、0.30 mmol/L d NTPs、0.8μmol/L引物、0.75 U Taq酶、1.0 ng/μL模板DNA、33.35μL dd H2O。循环次数为45 cycle,延伸时间10 min,引物UBC853的最适退火温度为49.8℃。结论:建立的新疆贝母属植物总DNA的ISSR-PCR反应体系经23份新疆贝母属8种药用贝母样品检验,ISSR-PCR扩增效果显著,证明该体系具有较高的稳定性和可重现性,为新疆贝母属8种药用贝母遗传多样性的分子标记研究奠定基础。

基于临床科研一体化模式研究新疆地区新冠肺炎中医组方

目的基于临床科研一体化模式,研究新疆地区新冠肺炎中医组方。方法研究团队分为临床组和科研组,临床组通过查阅文献、古籍等探讨本地区新冠肺炎的发病机理及辨证要点,根据患者证候,每周1次会诊进行个体化给药治疗,直至病人治愈出院;科研组整理分析病例中105首中药处方中的1564条数据,通过Microsoft Excel软件对药物使用频次、分类、四气五味、性味归经等进行统计分析,IBM SPSS Modeler软件对药物进行关联规则和可视化网络图分析以全面展示药物之间的联系,IBM SPSS Statistics软件对药物进行聚类分析以研究药物临床使用的分类。结果临床组制定的个体化治疗方案对新冠肺炎的治愈达到了很好的效果;科研组发现,相关药物以清热解毒、化湿、止咳平喘等为主,药性以寒、温、平为主,药味以苦、甘、辛为主,主要归肺、脾、胃经。通过关联规则及可视化网络图分析,处方中的30味高频药物可分为3类;聚类分析显示,高频药物可聚为5类。结论新疆地区新冠肺炎的发病症状特点除了“湿”“寒”外,还略兼有“燥”。对于初中期的治疗,主方为达原饮、清燥救肺汤、甘露消毒丹、蒿芩清胆汤、清肺排毒汤的加减变化。

新疆伊贝母有效成分含量与土壤、气候和遗传因子相关性分析

目的通过对新疆伊贝母有效成分含量与土壤、气候和遗传因子相关性研究,筛选影响其质量的主导因子。方法应用系统相关分析法、灰色关联度分析和逐步回归分析进行综合分析。结果年均相对湿度和速效钾对伊贝母总生物碱含量的影响最大,多态性位点、多态性位点百分率和速效氮对伊贝母水溶性成分含量的影响最大。结论综合分析伊贝母有效成分与土壤、气候和遗传因子主导因子的相关性表明,在众多影响因子中,多态性位点、多态性位点百分率、年均相对湿度、速效钾和速效氮是影响伊贝母质量的主导因子,对伊贝母有效成分含量的积累具有重要意义。

研究中医药治疗布鲁菌病的用药规律

目的基于数据挖掘技术分析中医药治疗布鲁菌病中药处方与临床症状的用药规律,总结用药特点,为治疗布鲁菌病提供理论依据。方法检索中国知网、万方、维普三大数据库1986-2019年中医药治疗布鲁菌病的相关文献报道,全面系统整理治疗布鲁菌病的中药处方,并通过Microsoft Excel对中药进行药类、四气五味、归经以及症状的频次统计分析,IBM SPSS Modeler Subscription1.0进行关联规则及网络视图分析,来研究治疗布鲁菌病的中药处方用药规律。结果治疗布鲁菌病常用中药以补虚药、活血化瘀药、清热药为主,其药物归经主要集中在脾(胃)、肝(胆);而四气五味以温寒、甘苦为主;高频次用药为甘草、当归、秦艽等;临床高频次症状为乏力、关节肿痛、发热等,急性期核心用药为丹参、藿香、白豆蔻、秦艽、石膏、金银花等;慢性期核心用药为甘草、生薏苡仁、当归、人参、狗脊、延胡索等。结论中医药治疗布鲁菌病,急性期以清热化湿、解毒为主,慢性期以益气养血、活血通络为主,与布鲁菌病病机相吻合,可为布鲁菌病的中医药治疗提供参考依据。

新疆贝母属8种药用植物鳞茎的解剖学、组织化学和植物化学研究

目的研究新疆贝母属8种药用植物鳞茎的组织结构、生物碱及皂苷在鳞茎中的分布、西贝母碱苷、西贝母碱及贝母素乙的含量。方法采用解剖学、组织化学和植物化学方法。结果新疆贝母属8种药用植物鳞茎主要由表皮、皮层薄壁组织、有限外韧型维管束组成,其基本结构一致,并无种间差异。生物碱及皂苷在鳞茎中都有所分布,但其含量高低因品种不同而有一定的差异,生物碱主要分布于鳞茎的皮层薄壁组织细胞及维管束周围的薄壁组织细胞上,皂苷主要分布于鳞茎的表皮细胞和维管束周围的薄壁组织细胞上。黄花贝母、托里贝母、大白花贝母、裕民贝母同时含有西贝母碱苷、西贝母碱及贝母素,除了裕民贝母外,其余贝母中贝母素乙的含量高于西贝母碱苷、西贝母碱,在新疆贝母及伊犁贝母中不含有贝母素乙。结论提示新疆贝母属8种药用植物鳞茎中活性成分含量与维管束的数目及薄壁细胞在鳞茎中所占比例有一定关联,在选择药用品种时要充分考虑这一因素,同时本实验结果也可为合理采收及扩大新药源提供理论依据。

伊贝母药材适宜生长区分析

目的:研究比较新疆不同产地伊贝母中总生物碱、西贝母碱、西贝母碱苷、腺苷和β-胸苷的含量差异,应用主成分分析和聚类分析确定伊贝母的最佳生长区域。方法:采用酸性染料比色法,高效液相色谱(HPLC)及超高效液相色谱-蒸发光散射(UPLC-ELSD)法,对不同产地伊贝母药材中5个指标成分的含量进行测定,同时采用SPSS 19.0软件对上述5个指标成分数据进行分析。结果:新疆不同产地伊贝母中有效成分含量存在较大差异,但在同一产地的伊贝母样品中成分含量差异较小,其中新疆吉木萨尔县、木垒县和奇台县,新疆霍城县果子沟,新疆伊犁赛里木湖和新疆温泉县生长的伊贝母主成分得分及其排名相对最高,新源县那拉提生长的伊贝母主成分得分及其排名最低。结论:新疆吉木萨尔县、木垒县、奇台县,新疆霍城县果子沟,新疆伊犁赛里木湖和新疆温泉县为伊贝母的适宜产区,同时,不同产地的温度、水分、光照、土壤等气候条件对伊贝母中成分含量有一定影响,因此当选择伊贝母产区时要充分考虑这些环境因素。

中药辅助治疗艾滋病口腔病损的系统评价及基础用药筛选

目的系统评价中药辅助治疗艾滋病口腔病损的临床疗效,分析用药规律,筛选基础用药,为临床用药提供一定的参考。方法从中国知网、万方数据库、维普中文科技期刊等数据库中,筛选中药辅助治疗艾滋病口腔病损的随机对照试验(RCT);通过Cochrane和RevMan软件进行文献质量评价和Meta分析,IBM SPSS Modeler 18.0进行关联规则及网络视图分析,IBM SPSS 20.0进行聚类分析。结果最终纳入14项研究,共1189例患者,Meta分析表明,中药辅助治疗艾滋病口腔病损,在念珠菌镜检阳性率、口腔黏膜病损治疗有效率、口腔溃疡治疗有效率等方面,均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。数据挖掘显示治疗艾滋病口腔病损常用中药以补虚药、清热药为主,其归经主要集中在脾(胃)、肺(大肠)经,而四气五味以甘、寒为主;临床常用药物:甘草、黄连、黄芩、半夏、干姜、黄芪、人参。结论中药辅助治疗艾滋病口腔病损的疗效显著优于单独使用西药,治疗主要遵循攻补兼施,扶正与祛邪并用,重在清热解毒、健脾除湿,补中益气,达到标本兼顾,可为临床治疗提供参考。

新疆伊贝母有效成分含量与土壤因子相关性分析

目的:研究伊贝母有效成分含量与土壤因子的相关性,筛选影响其有效成分含量的主导因子。方法:理化分析法进行土壤因子(pH,总盐,有机质,全氮,全磷,全钾,速效氮,速效磷,速效钾)的测定,应用主成分分析、聚类分析、相关分析及灰色关联度分析进行综合分析。结果:新疆不同产地土壤因子的含量存在较大差异,在同一产地的土壤因子含量也存在一定差异。总生物碱含量与速效钾有极显著正相关(P<0.01),与总盐有显著正相关(P<0.05);西贝母碱与9种土壤因子无明显的相关性;西贝母碱苷含量与总盐有显著正相关(P<0.05);水溶性成分腺苷含量与总盐、有机质、全氮、速效氮、速效钾有极显著正相关(P<0.01),β-胸苷含量与全氮有显著正相关(P<0.05)。上述相关分析结果与灰色关联度分析结果一致。伊贝母最佳适宜生长的土壤条件为pH 6.4~6.9,总盐2.3~5.6 g·kg^(-1),有机质118~231 g·kg^(-1),全氮5.8~11.9 g·kg^(-1),全磷0.85~1.28 g·kg^(-1),全钾10.4~29 g·kg^(-1),速效氮428~906 mg·kg^(-1),速效磷31~57 mg·kg^(-1),速效钾424~494 mg·kg^(-1)。结论:综合考虑,土壤中速效钾、全氮、有机质、速效氮及总盐对伊贝母中有效成分的合成和积累起到了关键性作用。因此,无论选择土壤,还是生产中施肥,都应重视和合理使用速效钾、全氮、有机质、速效氮及总盐对伊贝母质量的影响。

贝母属药用贝母总DNA提取方法的比较研究

目的比较筛选最适于贝母属药用贝母的总DNA提取方法。方法利用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的SDS法提取贝母属药用贝母的总DNA;通过核酸蛋白检测仪及琼脂糖凝胶电泳方法检测其浓度和纯度;进行ISSR-PCR扩增检测所得总DNA质量。结果 3种方法均可提取出产量较高的基因组DNA,但试剂盒法相较提取的总DNA纯度最高,质量最好,并且均能扩增出丰富清晰的条带,稳定性高,操作简单耗时短。改良的CTAB法、SDS法提取的总DNA纯度、质量均次于试剂盒法,操作复杂耗时长,不适用于下游的分子生物学实验。结论试剂盒法为贝母属药用贝母总DNA提取的最佳方法,其所得样品适用于PCR及其他分子生物学研究。