青蒿防治球虫病研究进展

近年来,随着减抗替抗政策的发布,中药防治球虫病越来越受到人们的重视。使用青蒿防治球虫病,在抗球虫效果、增强免疫力、抗菌抑菌、缓解临床症状等方面具有独特的优势。本文主要就青蒿在防治球虫病的安全性、经济性、抗球虫效果和抗球虫作用机理等的研究进行综述,以期为生产一线畜禽球虫病的防控提供参考。

马属动物源十二指肠贾第虫流行研究进展

十二指肠贾第虫(Giardia duodenalis)是一种呈世界性分布的人兽共患寄生性原虫,主要寄生于人和多种哺乳动物的肠道内,造成宿主腹泻及生长发育迟缓等,严重危害畜牧养殖业发展和人体健康。加强对于十二指肠贾第虫的研究具有重要的公共卫生意义。论文对马属动物源十二指肠贾第虫的流行病学情况进行了总结,分析了不同地区、年龄、性别和养殖方式的马属动物感染十二指肠贾第虫的分布情况,阐明了不同风险因素对十二指肠贾第虫的流行率和基因型分布的影响,以期更好的了解十二指肠贾第虫在马属动物中的流行情况,为贾第虫病的综合防控提供参考。

双膦酸盐抗三种顶复门原虫研究进展

顶复门原虫可引起严重疾病威胁人类健康,如每年导致近100万人死亡的疟原虫,感染全球约1/3人口的弓形虫以及导致新生儿腹泻的隐孢子虫等。这3种顶复门原虫对全球的生物安全和公共卫生构成巨大隐患,且目前在临床上有效治疗药物有限。双膦酸盐临床上广泛用于治疗骨代谢疾病,但其化合物可有效抑制顶复门原虫生长,作用机制为竞争性抑制寄生虫类异戊二烯分子生物合成的2C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸途径(MEP途径)中的法尼基焦磷酸合酶,干扰类异戊二烯化合物的合成而发挥作用。本文综述了双膦酸盐化合物在疟原虫、弓形虫和隐孢子虫方面的相关研究,以期为临床治疗相关疾病提供理论基础。

中国兔源十二指肠贾第虫分子流行病学研究进展

对中国兔源十二指肠贾第虫的分子流行病学研究进行了总结,分析了不同地区、年龄、品种、经济用途和饲养地点的兔源十二指肠贾第虫的感染情况,阐明了不同地区兔源十二指肠贾第虫的基因型分布情况,以更好地了解十二指肠贾第虫在家兔中的流行情况。兔源十二指肠贾第虫集聚体B具有广泛的宿主适应性特征,其宿主适应性的分子机制值得深入研究,也是今后的重要研究方向之一。

我国涉农院校教学动物医院现状分析与发展建议

习总书记提出“人病兽防,关口前移”,给兽医学科发展指明了新的发展方向,提出了新的重要任务,给动物医学本科专业教育提出了新的培养领域和发展方向。在新农科建设背景下,动物医学专业人才培养目标要求学生不仅应具有扎实的理论知识,还应具有较强的实践能力,以满足动物诊疗活动的实践需求。

基于CRISPR/Cas9技术的HCT-8细胞基因编辑系统构建

【目的】构建人回盲肠癌(human ileocecal adenocarcinoma,HCT-8)细胞系的CRISPR/Cas9基因编辑系统,实现对目的基因的高效编辑。【方法】采用慢病毒感染的方式,将慢病毒载体质粒LentiCas9-Blast与包装质粒pSPAX2和pMD2.G共转染至人胚胎肾(human embryonic kidney 293T,HEK293T)细胞系获得高滴度的重组慢病毒液,并感染HCT-8细胞系,以未感染组为阴性对照,用杀稻瘟菌素进行抗性筛选,直至阴性对照组全部死亡;采用有限稀释法对阳性细胞进行单克隆筛选,对筛选得到的单克隆细胞系进行扩大培养,并采用PCR及Western Blot试验验证Cas9基因及其蛋白表达情况,而后对阳性单克隆细胞系进行基因编辑效率及细胞系活性验证。【结果】得到能成功表达Cas9蛋白的6株HCT-8-Cas9单克隆细胞系。其中HCT-8-Cas9_2和HCT-8-Cas9_4细胞系蛋白量表达较高;对所筛选单克隆细胞系进行基因编辑效率检测,pXPR_011慢病毒表达报告基因载体系统检测结果表明,HCT-8-Cas9_4单克隆细胞系Cas9基因编辑效率为48.82%,显著高于其他HCT-8-Cas9单克隆细胞系;单克隆细胞系活性检测结果表明,HCT-8-Cas9_2和HCT-8-Cas9_4单克隆细胞系细胞活性与HCT-8细胞系相比均无显著差异。【结论】HCT-8-Cas9_4细胞系能够稳定表达Cas9蛋白,具有良好的编辑效率,可用于后续靶标基因的高效编辑。

2012-2021年我国部分地区羊肠道寄生虫感染情况调查

为了解我国部分地区近10年羊肠道寄生虫感染情况,探讨羊肠道寄生虫流行特征,采用显微镜检查法对2012年1月至2021年12月来自全国17个省份46个地区的6745份羊粪便样品进行肠道寄生虫感染情况调查。结果显示,在这些样品中共检测出原虫(艾美耳球虫、隐孢子虫、贾第虫及阿米巴等)、线虫(毛尾线虫也称为鞭虫、毛细线虫、羊仰口线虫、细颈线虫和毛圆线虫等)、绦虫、吸虫(前后盘吸虫、歧腔吸虫及绵羊斯克里亚宾吸虫等)共4纲寄生虫。肠道寄生虫总感染率为82.15%,其中球虫感染率最高(73.73%),其次是阿米巴(37.49%);2012年感染率最高(97.58%),2018年最低(50.77%);放牧羊感染率(87.85%)高于舍饲羊(80.59%)。说明我国羊肠道寄生虫感染情况普遍存在,10年来寄生虫感染率无显著下降,应加强肉羊寄生虫病的防控。

吉尔吉斯斯坦养殖业和疫病防控科技现状

吉尔吉斯斯坦位于中亚东北部,天山山脉西麓,属于内陆国家。在地理位置上北边与哈萨克斯坦相接,西边为乌兹别克斯坦,西南为塔吉克斯坦,东边紧邻中国。吉尔吉斯斯坦划分为7州(省)2市:楚河州、塔拉斯州、奥什州、贾拉拉巴德州、纳伦州、伊塞克湖州、巴特肯州和比什凯克市、奥什市。吉尔吉斯斯坦是一个以农业和畜牧业为主的国家,拥有九万多平方公里的牧场和天然割草场,全年光照充足,气候适宜,这使吉尔吉斯斯坦的畜牧业拥有得天独厚的资源优势。

河南省宠物猫华支睾吸虫和其他肠道寄生虫感染状况分析

旨在了解宠物猫肠道寄生虫(特别是华支睾吸虫)的感染情况并分析其相关影响因素及临床表现,通过离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法对河南省11个地区898份宠物猫粪便样品进行显微镜检查,结果显示,总感染率为10.58%(95/898)。在95份阳性样本中,优势虫种为球虫(49.47%)和华支睾吸虫(29.47%),其次为钩口线虫(16.84%)、芽囊原虫(7.37%)、贾第虫(3.16%)和蛔虫(3.16%)。总体来看,肠道寄生虫在焦作地区、6月龄及以下、未驱虫、未免疫和出现腹泻症状的宠物猫中检出率更高。除与性别因素无关外(P>0.05),年龄、驱虫情况、免疫情况等因素均显著影响宠物猫华支睾吸虫的感染率,同时发现宠物猫的腹泻情况也与华支睾吸虫的感染率有显著相关性。临床症状分析表明,华支睾吸虫感染的宠物猫比其他寄生虫感染的宠物猫更消瘦(P<0.001)。综上所述,河南省宠物猫主人今后应重视对幼猫的科学饲喂、做好定期免疫和驱虫,以降低肠道寄生虫的危害及人兽共患华支睾吸虫病的传播风险。

Ⅱd亚型微小隐孢子虫感染昆明小鼠模型的初步建立

为建立稳定、可靠的Ⅱd亚型微小隐孢子虫感染的小鼠模型,本研究以1×10^(6)个/只剂量的Ⅱd亚型微小隐孢子虫卵囊感染3周龄雌性昆明小鼠,对感染前后小鼠粪便样品进行显微镜观察和隐孢子18S r RNA和GP60基因的套式PCR检测、以及对小鼠的排卵囊规律、临床症状变化、体质量变化、回肠组织病变特征和回肠绒毛指数进行分析。结果显示:通过形态学和PCR方法均能在粪便样品中检测到微小隐孢子虫;感染组小鼠较对照组在排卵囊高峰期体质量的增加略微减少,但总体增加趋势一致,在排卵囊高峰期时感染组小鼠饮水量减少、反应迟钝、粪便变稀,高峰期后小鼠精神状态逐渐恢复良好;通过对感染后7 d小鼠的回肠组织制备病理切片并经HE染色后观察发现,与对照组相比,感染组小鼠回肠组织中出现微小隐孢子虫附着,部分区域杯状细胞数量减少,上皮细胞排列轻微紊乱且部分脱落,黏膜层可见少量炎症细胞;回肠绒毛长度显著变短、变钝,隐窝深度变浅,但绒毛直径和黏膜厚度未见显著变化。上述结果与动物临床感染隐孢子虫的症状、病理变化等基本一致,表明本研究首次建立了Ⅱd亚型微小隐孢子虫感染昆明小鼠的模型。本研究该模型的建立为研究微小隐孢子虫的致病性、宿主的免疫调节机制以及药物和疫苗的筛选提供研究基础。

巢式PCR检测隐孢子虫卵囊的研究

隐孢子虫病是一种重要的人畜共患原虫病。为了在临床样品中更准确、快速地检测隐孢子虫卵囊,从初步纯化的含有不同数量隐孢子虫卵囊的样品中和含有不同数量隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中,直接提取DNA或用DNA纯化试剂盒对提取的奶牛粪便中卵囊DNA进行纯化之后用作起始PCR(Primary PCR)模板,以起始PCR的产物为模板进行巢式PCR(Nested PCR),用2对人工合成寡核苷酸分别作为两个PCR的引物,扩增片段大小分别为1325bp和820bp。优化了Mg2+浓度、引物浓度和dNTP浓度,并进行了特异性检验。建立的巢式PCR具有隐孢子虫属特异性,不仅扩增出新鲜样品DNA提取物中的目的片段,而且扩增出放置6年之久的DNA提取物中的目的片段。样品经过初步纯化之后,起始PCR和巢式PCR最低检测值卵囊分别为2 86×103个/ml和≤2 86个/ml;从含有隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中提取DNA,尔后经过DNA纯化试剂盒纯化,其起始PCR和巢式PCR粪便中卵囊最低检测值分别为2 86×107个/g和≤2 86个/g。有望发展为试剂盒。

PCR-RFLP鉴定隐孢子虫种类研究

为快速、准确鉴别人畜隐孢子虫种类,建立了巢式PCR扩增隐孢子虫18SrRNA基因的特殊区域,扩增片段测序结果表明:安徽牛源分离株(Cryptosporidiummuris)781bp;北京鸡源分离株(C.baileyi)776bp;北京牛源分离株(C.muris)781bp;河南牛源分离株(C.muris)725bp;长春牛源分离株(C.muris)776bp;宁夏鸡源分离株(C.baileyi)725bp,该片段位于18SrRNA全序列271～1103bp之间。使用Ssp 限制性内切酶消化发现C.muris产生418～420bp和305～363bp两个片段,C.baileyi产生544～545bp和185～231bp两个片段。所检测的6个分离株可以显著区分为C.muris和C.baileyi两个种,所建立的PCR-RFLP可以有效鉴别隐孢子虫种类。

贝氏隐孢子虫内生发育虫体的扫描电镜观察

贝氏隐孢子虫内生发育各阶段虫体寄生于气管和法氏囊的微绒毛丛中 ,鸭对贝氏隐孢子虫的易感性低于鸡和丝毛乌骨鸡。滋养体呈球形 ,平均直径 1 3μm ;typeⅠ裂殖体 ,平均直径 2 4μm～ 3 0 μm ,内含 8个裂殖子 ,呈逆时针旋涡状或呈桔瓣状排列 ;typeⅡ裂殖体内含 4个裂殖子 ,两种类型裂殖体的裂殖子之间填充着颗粒状残体并包围着一个大的球形残体。成熟裂殖子逸出的方式分为 4种类型。裂殖子大小为 3 0× 0 6 μm ,呈香蕉形。大配子体呈球形直径 3 3μm～ 4 2 μm ,小配子体直径为 3μm～ 3 6 μm。小配子呈子弹状 ,大小为 1 2 μm× 0 3μm ,并观察到成熟小配子的释放方式。带虫空泡可分为无球形残体和有球形残体两类 ,根据观察结果推测带虫空泡基部的梳状结构不具备营养器官的功能 。

郑州奶牛球虫病流行病学调查与虫种鉴定

通过对郑州市郊 8个奶牛场奶牛球虫感染情况的调查 ,发现 7个场为球虫阳性 ;球虫阳性率最高的场为 5 8 33% ,平均感染率 2 9 6 % ;成年牛感染率 9 82 % ,OPG值 16 3.6 4,青年牛感染率 40 % ,OPG值 36 9 2 3,犊牛感染率 6 3 0 4% ,OPG值186 2 0 7 发现 13种艾美耳属球虫和 2种等孢属球虫 ,分别是椭圆艾美耳球虫 (检出率 33.72 % ) ,奥博艾美耳球虫 (检出率12 2 7% ) ,阿拉巴艾美耳球虫 (检出率 0 6 5 % ) ,亚球形艾美耳球虫 (检出率 0 6 5 % ) ,怀俄明艾美耳球虫 (检出率 0 82 % ) ,伊利诺斯艾美耳球虫 (检出率 0 33% ) ,加拿大艾美耳球虫 (检出率 10 31% ) ,牛艾美耳球虫 (检出率 8 6 7% ) ,曼德拉艾美耳球虫 (检出率 12 77% ) ,柱状艾美耳球虫 (检出率 2 13% ) ,巴西艾美耳球虫 (检出率 3 2 7% ) ,邱氏艾美耳球虫 (检出率3 44 % ) ,博姆本艾美耳球虫 (检出率 6 4% ) ,以及等孢球虫 2个种

鸭源隐孢子虫种类鉴定及对鸡鸭致病性研究

为鉴定在河南地区鸭群中广泛存在的隐孢子虫种类及其致病性 ,我们将河南省鸭源隐孢子虫分离株传代增殖 ,1 0只鸡和 1 0只鸭分别逐只接种上述分离株 640万个卵囊 ,应用光镜和扫描电镜技术对样品进行观察。根据卵囊形态测定数据 ,排卵囊规律 ,寄生部位及其寄生特点鉴定该分离株为贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi)。该分离株接种鸡、鸭后主要引起呼吸道和法氏囊的炎症。病理形态学变化表现为气管纤毛脱落 ,杯状细胞排空 ,上皮细胞肥大或增生。除虫体寄生处之外 ,其他区域微绒毛尚保持完整。对虫体寄生密度 。

应用PCR检测隐孢子虫卵囊的研究

隐孢子虫病是一种重要的人畜共患原虫病。为了在临床样品中更准确、快速地检测隐孢子虫印囊,从初步纯化的含有不同数量隐孢子虫卵囊的样品中和含有不同数量隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中。直接提取DNA或用DNA纯化试剂盒对提取的奶牛粪便中卵囊DNA进行纯化之后用作PcR模板,用1对人工合成寡核苷酸作为PCR引物,扩增片段大小为452bp。优化了Mg2+浓度、引物浓度和dNTP浓度,并进行了特异性检验。建立的PCR具有隐孢子虫属特异性。不仅扩增出新鲜样品DNA提取物中的目的片段,而且扩增出放置6年之久的DNA提取物中的目的片段。样品经过初步纯化之后,最低检测值100个卵囊/ml;从含有隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中提取DNA,尔后经过DNA纯化试剂盒纯化,PCR最低检测值为105个卵囊/g粪便。