藏猪促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)多态性及其表达与免疫性状的关联分析

本研究以约克夏猪为对照,旨在分析藏猪和约克夏猪的血液生理指标和免疫相关器官组织表达谱方面的差异,结合藏猪外周血淋巴细胞在LPS刺激下,促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达情况,探究IL-1β、IL-6及TNF-α对藏猪免疫性状的影响。试验选择180日龄的藏猪和约克夏猪各40头按品种分为两个试验组,采集新鲜血液用于检测血液生理指标;采集猪外周淋巴血用于培养外周血淋巴细胞。随机选取藏猪和约克夏猪各8头按品种分为两个试验组,前腔静脉采集新鲜血液、屠宰后采集黄豆样大小的肝脏、脾脏、下颌淋巴结组织Trizol法提取RNA。每个个体样品设置3个重复,借助RT-qPCR和一代测序技术检测IL-1β、IL-6、TNF-α基因表达情况和基因多态性。设置4组浓度的LPS(0、1、10、100μg·mL^(-1)),每组设置3个重复去刺激外周血淋巴细胞,于0、24、36、48、72 h收集细胞,用RT-qPCR检测促炎因子mRNA的表达情况。结果表明:1)藏猪的WBC、RBC、HGB、HCT和PLT水平极显著高于约克夏猪(P<0.01),同时,平均MCV和PCT也在藏猪中显著高于约克夏猪(P<0.05)。2)RT-qPCR结果表明,在藏猪的血液、脾脏和肝脏组织中,IL-1β、IL-6和TNF-α基因的mRNA表达量也均显著高于约克夏猪(P<0.01);在藏猪的下颌淋巴结中,IL-1β和TNF-α基因的表达量显著高于约克夏猪(P<0.05),IL-6基因的mRNA表达量极显著高于约克夏猪(P<0.01)。3)SNP位点筛选结果发现,在IL-1β基因3′侧翼区存在5个突变位点,其中G^(690)T、C^(1383)G、C^(1480)T、A^(1497)G位点在藏猪和约克夏猪群体间存在极显著差异(P<0.01),C^(1454)T位点在藏猪和约克夏猪群体存在显著差异(P<0.05);IL-6基因3′侧翼区存在1个有义突变位点C^(265)T,两品种间呈显著差异(P<0.05),在5′侧翼区存在1个有义突变位点A-72G,两品种间呈极显著差异(P<0.01);TNF-α基因在5′侧翼区存在1个有义突变位点,但两品种间差异不显著(P>0.05)。4)不同浓度LPS刺激藏猪外周血淋巴细胞试验结果表明,10μg·mL^(-1)浓度的LPS对藏猪外周血淋巴细胞的增殖效应最为显著。在1、10μg·mL^(-1)浓度LPS刺激下,IL-1β基因作出较明显应答,在100μg·mL^(-1)浓度LPS刺激下,IL-6基因作出较强应答。综上所述,和约克夏猪相比,藏猪在血液生理指标、免疫组织器官中促炎因子表达以及基因多态性方面表现出更强的抗病能力。其中IL-6基因的A-72G位点可能与免疫性和抗病能力密切相关。在藏猪外周血淋巴细胞培养试验中,IL-1β和IL-6基因对LPS的显著应答突显了它们在免疫调控中的关键作用。

藏鸡屠宰性能及肉质特性

为研究藏鸡的肉用开发价值,测定了150日龄藏鸡的产肉性能、肉质指标、氨基酸和肌苷酸含量。结果表明,藏鸡公、母屠体率分别为88.95%和88.74%,半净膛率分别为75.55%和74.65%,全净膛率分别为56.30%和55.34%,胸肌率分别为15.00%和15.97%,腿肌率分别为23.69%和23.09%,胸肌滴水损失分别为2.68%和2.62%,肉色分别为3.52和3.74,剪切力值分别为2.95和3.08 kg,熟肉率分别为72.03%和71.12%,氨基酸质量分数分别为20.67%和19.78%,肌苷酸分别为2.32和2.50 mg/g。与我国其他地方鸡种比较,藏鸡屠宰性能低,但胸肌和腿肌率高,氨基酸含量高,人体必需氨基酸和鲜味氨基酸比例大;因此藏鸡具有肉质鲜美的特点,是发展具有高原特色优质养殖业的良好品种。

西藏不同产区藏鸡体重和体尺性状的测定与分析

藏鸡是生活在青藏高原上的原始地方小型鸡种,为了了解西藏不同分布区藏鸡体型特征与体重、体尺性状间的关系,测定了西藏5个典型产区的成年藏鸡体重和体尺性状指标,并进行了相关分析。结果表明,嘉黎县藏鸡体重、多项体尺性状指标较高,尼木县藏鸡较低;体重与体尺性状间存在极显著的相关关系(P<0.01),其中体重与胫长的相关系数最高,达0.763 5;建立的最优回归方程表明,对体重影响的重要性依次为胫长、胸围、胸宽、胸骨长和髋宽;主成分分析显示,5个主成分含有体重和体尺8项指标90.27%的信息量,说明不同产区藏鸡体重和体尺性状存在差别,但都具有体重轻、体型小、身体较长、胫长长等特点。

高原环境中藏猪血液生理指标测定与比较

藏猪是青藏高原特有的地方猪种。为了解其血液生理特征,本研究采用全自动血液分析仪测定6月龄藏猪和同环境中长白猪的血液常规生理指标,比较品种和性别的影响。结果表明性别对6月龄猪血液生理指标影响均不显著(P>0.05),藏猪比长白猪具有较高的WBC、LY#、Mid#、Mid#、PLT、PEW和PCT,但RBC、HGB、HCT、MCH明显较低(P<0.05)。藏猪血液生理指标具有高海拔低氧适应特征,抗病性能好,血液生理指标与人类有一定的相似性,适合用于医学实验动物。

藏鸡体重和胫长Gompertz生长曲线及相关性分析

测定了藏鸡0至20周龄的体重和胫长,运用Gompertz模型拟合其生长曲线。结果表明,Gompertz模型适宜模拟藏鸡的生长过程。Gompertz模型参数显示,藏鸡性别间生长存在差异:公鸡比母鸡有较高的成年体重、初始生长速度和拐点体重,公鸡拐点年龄略大于母鸡;但性别间成年胫长、拐点胫长未见显著差异。6周龄的体重和胫长与后期体重具有极显著的相关性,可用来估计藏鸡后期体重,作为藏鸡早期选育的性状之一。

藏鸡血管内皮生长因子基因表达与低氧适应

比较藏鸡在常氧(O2,21%)和低氧(O2,13%)浓度孵化环境中,胚胎尿囊绒毛膜(CAM)组织VEGF基因mRNA表达变化及其与低地矮小隐性白鸡的差别,分析VEGF表达与低氧适应的关系。结果发现低氧刺激使藏鸡和矮小隐性白鸡CAM组织VEGF表达均上调,矮小隐性白鸡上调程度明显大于藏鸡。结果说明在低氧环境中藏鸡CAM组织VEGF表达表现一定程度的增加,有利于血管形成,表现对低氧环境的适应;而低地鸡胚胎VEGF可能表现异常表达,不利于胚胎发育和存活。

藏猪屠宰性能和肉质测定与分析

屠宰测定了生活在西藏高海拔环境中的藏猪产肉性能和肉质指标。结果表明:藏猪公、母猪屠宰率分别为59.82%和60.66%,瘦肉率分别为60.28%和57.12%,腿臀率分别为28.28%和30.71%,肉色评分分别为4.45和4.30,滴水损失分别为1.42%和1.37%,头、心、肺、肝等器官占身体比重较大,表明藏猪产肉性能和猪肉品质良好。

藏猪激素敏感脂肪酶(HSL)基因遗传多样性分析

激素敏感脂肪酶(HSL)是猪脂肪沉积相关的重要候选基因之一。本研究采用PCR-RFLP和SSCP技术检测了藏猪HSL基因exon1G→A和exon8G→T突变位点多态性。结果显示,藏猪群体中2个位点均出现3种基因型,表现多态性,其中,exon1G→A位点等位基因A和G频率分别为62.50%和37.50%,exon8G→T位点等位基因A和B频率分别为77.68%和22.32%。与报道的其他猪种相比,藏猪HSL基因2个突变位点的基因分布均处于瘦肉型外种猪和脂肪性地方猪之间,表现出其与其他猪种的差异。

藏猪黑素皮质激素受体-4基因TaqI多态性分析

藏猪是我国青藏高原特有的小型原始地方猪种,文中采用PCR-RFLP技术分析了藏猪黑素皮质激素受体-4(MC4R)基因TaqI酶切位点多态性。结果表明:藏猪MC4R基因TaqI酶切位点优势基因型为11,基因型频率达93.56%,与国内梅山猪、二花脸猪、民猪和金华猪等较接近,与汉普夏、大白、杜洛克等外种猪差别较大。

藏猪新品系的选育初报

在藏猪中心产区建立藏猪选育基础群,对其外貌特征、繁殖性能和生长发育进行个体测定。采用综合育种值对基础群藏猪按照高繁殖力和快生长高瘦肉率2个方向进行选种。经过3个世代的选育,2个品系藏猪外貌体型更典型;高繁殖力品系总产仔数、产活仔数、初生窝重、断奶仔数和断奶窝重分别达到了7.65头、7.16头、5.42 kg、6.46头和31.05 kg;快生长高瘦肉率品系初生重、断奶重、25 kg日龄、屠宰率、腿臀率、瘦肉率和眼肌面积分别达到了0.78kg、7.87 kg、260.5 d、61.65%、31.44%、63.49%和9.13 cm2,背膘厚减小至8.19 mm,肉质性状变化不大,保持了藏猪良好的特性。

高海拔地区隐性白羽肉鸡生长曲线的拟合与分析

试验测定了隐性白羽肉鸡在高海拔饲养环境中2～20周龄的体重和胫长,用logistic、Gompertz模型拟合了生长曲线。结果表明隐性白羽肉鸡体重和胫长生长受高海拔环境抑制,logistic和Gompertz模型都适宜拟合隐性白羽肉鸡在高海拔体重和胫长的生长过程,拟合度高,其中logistic模型优于Gompertz模型。隐性白羽公鸡比母鸡有较高的成年体重、拐点体重、绝对生长速度和相对生长速度。

藏北自然生态环境与家畜种群分布的关系

通过对藏北 (那曲地区 )家畜生态条件进行的研究 ,得出那曲地区家畜的适宜分布比例 ,并结合家畜在自然生态下的数量分布 ,推论藏北家畜最适分布区域和适宜分布区域 ,以及该区域的优势家畜 ,为藏北畜牧业发展提供理论依据。

藏猪IGF Ⅰ基因外显子4和IGF Ⅱ基因内含子7 PCR-RFLP分析

藏猪为我国高原特色的原始小型猪种,其生长发育速度缓慢。本研究采用PCR-RFLP技术检测藏猪IGF Ⅰ基因外显子4和IGF Ⅱ基因内含子7酶切多态性。结果发现藏猪IGF Ⅰ基因exon4-PCR-HhaI-RFLP出现AA、AB和BB 3种基因型,AA基因型频率较高,为66.07%;等位基因A和B频率分别为80.36%和19.34%。藏猪IGF Ⅱ基因intron7-G162C位点全部为GG基因型,intron7-C179G位点全部为CC基因型。藏猪这2个基因的基因型分布与国内外其他猪种表现差异,这可能与其生长速度慢有关。

影响西藏高原禽蛋孵化率的因素及对策

针对西藏高海拔、缺氧， 家禽品种单一， 生产性能低下， 远不能满足林芝地区市场对禽产品的需求等情况， 揭示高原养禽业孵化中存在的主要问题， 认为良种禽蛋在高原孵化率低是受蛋源、缺氧、温湿度、存贮等因素的影响， 并提出以种蛋的来源选择、存贮位置和方式、充氧、增加温湿度。

藏猪脂蛋白脂酶基因内含子6遗传变异分析

藏猪是我国特有的能适应高海拔地区的地方小型瘦肉型猪种。本研究采用PCR-RFLP技术检测藏猪群体中脂蛋白脂酶(LPL)基因内含子6的SmaⅠ酶切多态性。结果发现,藏猪群体中AB为优势基因型,等位基因A和B的频率分别为65.18%和34.82%,与国内许多地方猪种不同。本研究在藏猪群体LPL基因内含子6内还发现另外5个突变位点。

藏东南牦牛业发展的制约因素及对策

藏东南牦牛生产性能低、生产周期长、产品率和商品率低等主要制约因素为草畜矛盾 ,繁育技术 ,适龄母牦牛在畜群中比例低等。利用良好生态环境进行草场建设 ,合理饲养 ,建立牦牛原种场 ,用胚胎移植扩繁、改良 ,导入野血复壮 。

藏猪生长发育性状遗传力的初步估计

猪的生长发育是重要的经济性状。估测其遗传参数对制定选种方法、设计选择指数、预测选育进展、提高选种效果都有一定的现实意义。生产性状的遗传参数是畜禽品种重要的特性指标，虽然具有通用性的一面，但也随着品种、畜群、饲养条件的不同而有所差异，具有“不稳定”现象。目前，有许多对各品种（系）猪群体遗传参数的研究报道（金海国等，2002；施启顺等，2006；陈斌等，2007），对猪的育种工作起到了很大的作用。藏猪是比较特殊的高原型原始猪种。很有必要对其主要经济性状的遗传参数进行测定，为藏猪选育工作者提供参考。

藏猪全同胞和半同胞亲缘关系鉴定

本实验采用PCR结合荧光半自动检测技术 ,对采集的 15头藏猪耳组织样本 ,用 12个微卫星标记座位作亲缘关系鉴定。测定结果与系谱记录完全一致 ,本次实验的准确率为 10 0 % ,说明测定方法和测定技术都十分可靠 。