微量生物样品中糖蛋白N-糖链电喷雾电离质谱分析前处理方法的建立

基于电喷雾电离质谱检测技术,建立了一种可靠、高效、简单,适合于微量糖蛋白N-糖链解离、富集纯化的方法。以糖蛋白牛胰核糖核酸酶(Rib B)和卵清白蛋白(OVA)为模型蛋白直接酶解,比较了4种方法纯化酶解样品的效果。比较了直接酶解和经过聚偏氟乙烯(PVDF)膜富集后酶解微量复杂生物来源样品胎牛血清的酶解效果,最终建立了微量生物样品中糖蛋白N-糖链的质谱分析前处理方法。采用PVDF膜吸附复杂生物样品中的糖蛋白,N-糖苷酶F(PNGase F)酶直接在膜上完成糖链释放(37℃,24 h),采用微晶纤维素柱结合石墨碳柱对糖链进行富集纯化,用于微克级胎牛血清和健康人血清中N-糖链质谱分析的前处理。本方法通用性好,在微量生物样品糖链质谱分析检测的前处理方面具有一定应用价值。

人肝癌细胞HepG2与正常肝细胞L02的O-糖链的比较分析

以培养的原发性肝细胞癌Hep G2细胞和正常肝细胞L02为研究对象,用细胞裂解液提取总蛋白,然后采用Carlson还原性β-消除法释放O-糖链,以阳离子交换柱结合C18柱纯化分离O-糖链,用电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对O-糖链进行序列鉴定,以β-环糊精为内标对2种细胞系的O-糖链进行定量比较分析.结果表明,在肝癌细胞系Hep G2中检测到10种O-糖链,正常细胞系L02中检测到9种O-糖链,其中9种O-糖链是2种细胞系中共有的,但Hep G2中存在癌细胞中特有的缩短的O-糖链N1A1(Neu Ac-Gal NAc,sialyl Tn抗原).t检验结果表明,Hep G2与L02相比,在检测到的10种O-糖链中有5种的含量具有极显著性差异(P<0.01),2种的含量具有显著性差异(P<0.05).

素质教育与中学英语教学

素质教育是近几年来最热门的话题之一,如何把素质教育繁多的概念演绎转变为广大教育实践者的切实行动,笔者以为是当务之急.李岚清副总理在"关于外语教学的重要讲话"中强调,"从某种意义上可以说,普及外语和培养外语人才,改进外语教学法和提高外语教学水平,已经不是一般的教学问题,而是影响我国对外开放方针的更好实施和推动我国经济发展的重大问题".

花生致敏糖蛋白Ara h1糖链决定簇的质谱分析

以花生种子总蛋白及其主要致敏糖蛋白Ara h1为研究对象,采用'一釜法'对蛋白上的糖链进行释放并同时进行衍生化标记,通过C18固相萃取柱纯化,以电喷雾质谱(ESI-MS)、多级串联质谱(MSn)和亲水性液相色谱-质谱联用(HILIC-MS)进行结构解析和定量分析.结果表明,蛋白Ara h1共有10条N-糖链,其中7条为高甘露糖型,2条为木糖修饰,另外1条为与过敏原相关的核心α1,3-Fuc修饰N-糖链,其含量约占总糖链的12.45%.

2002年高考听力题评析及与2001年高考听力题之比较

2002年高考听力试题基本上沿袭了2001年的高考听力试题的题型特点及考查要点。但今年所选听力材料的话题不同，对话中所用的词汇、短语、句式也要略为复杂一些。再者，去年的听力试题中前九段材料为对话，第十段材料为一段独白，而今年的十段材料全为对白。总体上看，今年的听力试题较去年的听力试题难度有所加大。

企业内部控制与风险管理

随着国内社会经济的日益发展与经济全球化进程的推进,在为国内企业带来良好发展前景与发展机遇的同时,也为企业生存发展带来了一定挑战。为保证自身企业在激烈的市场竞争环境下占据先机,创新企业内部管控模式与风险管控模式势在必行。基于此,本文深度分析企业内部管控工作与风险管理工作之间的关联,并且提出相应的优化策略,供广大相关从业人员参考。

动画技术对动画艺术发展的影响

动画是一种艺术表现形式,而这种艺术形式的呈现主要依靠动画技术,只有动画技术不断提升,才能够更好地制作出品质优良的动画作品,给观众带来视觉上的享受和动画艺术的审美体验。动画技术的发展为动画艺术发展提供了物质和技术的基础保障,动画技术的发展还能够为动画制作者带来灵感,能够有效提升动画的品质。文章从我国动画技术发展现状出发,对动画技术推动动画艺术继续发展的策略进行探究。