苏云金芽孢杆菌发酵液中晶体蛋白定量测定方法的探讨

探索了一种苏云金芽孢杆菌发酵液中晶体蛋白化学定量测定的方法。发酵液经离心技术处理后,其晶体蛋白由还原剂、变性剂组成的裂解液溶解,再用紫外光谱吸收法或考马斯亮蓝染色法定量。该方法测得的晶体蛋白量与经生物测定得到的毒力之间有较好的相关性,在苏云金芽孢杆菌的研究和生产上有一定的实用价值。

中国苏云金杆菌工作的主要成就

苏云金杆菌是目前国际上生产量最大并成功地用于防治农、林、贮粮害虫和一些卫生害虫的微生物杀虫剂。我国早在50年代末、60年代初就已开始研制、应用工作,经历了30多年曲折的发展过程。为了更有效地控制害虫危害,保持生态平衡和减少环境污染,苏云金杆菌先后被国家列入“863”计划,“七五”、“八五”重点科技攻关项目和部、省级的重点课题,近年还列为国家“火炬计划”和“技改”计划及全国推广项目。近10多年来它的研究、生产、应用都获得较大的进展,主要有以下几个方面:

小菜蛾作供试虫生物测定苏云金杆菌制剂毒效的研究

作者多年来试用过数种昆虫,最后证实小菜蛾对国内当前大量生产的苏云金杆菌几个血清型菌株均具有一定的敏感性,制定了用芥蓝菜子叶人工大量饲养的条件和方法,三年来室内饲养45代,各项生物学特征稳定,无退化现象,饲养和感染方法简便、经济、易行,因此,小菜蛾是测定我国苏云金杆菌制剂质量的理想昆虫,建议试用后推广。

用小菜蛾测定苏云金杆菌毒力的感染方法

用两种感染方法,以3龄小菜蛾作供试虫,美国标准品HD—1—1980作对照的生物测定法,对H_3和H_5两菌株粉剂的毒力效价进行了比较测定,提出了检定该类制剂毒力适用和可靠的方法及其测定程序。

苏云金杆菌D—1(血清型H3ab)新菌株的研究

D—1菌株系从自然死亡的灯蛾虫尸分离的一株苏云金杆菌新菌株。经菌种鉴定与Bt.var.kurstaki相同,属血清Ⅲ型。其培养特性表现为:对培养基成分和培养温度适应范围较小,在温度28-30℃,培养基含固量为4.1-6.7％,C/N为5.7-6.2时发酵正常。32℃以上和浓培养基则影响其正常繁殖。这与HD-1菌株相吻合。对菜青虫、棉铃虫、玉米螟和松毛虫等4种昆虫毒力测定结果表明,D—1菌兼有H_5型青虫菌81—6和H_3型HD-1的杀虫特性。它对菜青虫和松毛虫的毒力与81—6相接近而高出HD—12.7—5.1倍。对棉铃虫和玉米螟的毒力则明显高于81—6也比HD—1强。