定量PCR监测骨髓移植患者人巨细胞病毒感染

目的用定量PCR方法监测骨髓移植患者中人巨细胞病毒 (humancytomegalovirus,HCMV)活动性感染。 方法用双标记探针水解的荧光定量PCR方法 ,检测 4例骨髓移植患者移植前、后随访的血标本 14 0份 (其中血浆与外周血多形核细胞各 5 0 % )中HCMVDNA拷贝数 ,并作动态分析。血浆标本中HCMVDVA的检出与HCMVIgG和IgM作平行比较。 结果 4例患者除病例 4外 ,均在术后 30～ 5 0d间HCMVDNA拷贝数增加 ,同一时间外周血多形核细胞中HCMVDNA的拷贝数高于血浆。当给予适量更昔洛韦 ,则能抑制其继续升高。 4例患者血清中HCMVIgM始终呈阴性 ,IgG始终呈阳性。 结论荧光定量PCR方法是用以监测骨髓移植患者中HCMV活动情况。

国产某品牌谷胱甘肽还原酶试剂盒多中心横向联合性能评价

目的采用多中心横向联合评价方法对国产某品牌谷胱甘肽还原酶(GR)试剂盒的检测性能进行评价。方法在全国范围内选择9家三级甲等综合性医院实验室,按照统一的方案对国产某品牌GR检测试剂盒的重复性、室内精密度、偏移评估、批间差、线性范围和最大稀释倍数进行评价,并进行试剂间比较和仪器间比较。结果9家实验室的重复性精密度和实验室内精密度均满足要求[分别小于室间质量评价(EQA)标准的1/4(5%)和1/3(6.67%)]。除1家实验室低浓度样品和另1家实验室中浓度样品批间差>8%(厂家声明)外,其余7家实验室所有样品检测结果批间差均符合要求。在厂家声明的线性范围内,9家实验室验证结果均为线性,最大稀释倍数(5倍)验证回收率为92.6%~106.3%。使用40份血清样品与进口试剂进行偏移评估,相关系数(r)为0.997~1.000,偏移均小于EQA标准的1/2(10%)。国产试剂组和进口试剂组组内9家实验室之间的检测结果均具有显著相关性(P<0.01);国产试剂组和进口试剂组检测结果一致性良好(r=1.000,P<0.01),配对t检验结果显示差异无统计学意义。国产试剂组和进口试剂组组内平均变异系数(CV)分别为6.48%、6.68%。A、B、C仪器组检测结果两两配对t检验结果显示,国产试剂B仪器组和C仪器组检测结果差异有统计学意义(P<0.01),进口试剂C仪器组与A、B仪器组的检测结果差异均有统计学意义(P<0.01)。结论该品牌GR试剂盒检测性能良好,能满足临床的检测需求。

TNF生物学检测法质量控制的初步探讨

为探讨肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）生物学检测的质量控制管理的方法，以Ｌ９２９ 细胞为靶细胞，ＴＮＦ标准品为考核标准，比较了细胞数量、细胞胞龄和放线菌素Ｄ浓度的影响，并用自制室内质控血清进行监控。结果表明靶细胞胞龄以传代后续培养２４～４８ ｈ 为最适。此期细胞的代谢旺盛，对ＴＮＦ最敏感；当选择用每孔细胞数量为４×１０４培养２４ ｈ 时，ＴＮＦ的作用均一，ＴＮＦ活性含量与Ａ值显示出较好的直线相关性（ｒ＝ ０．９９２）；绝对差值最高，放线菌素Ｄ浓度则选择在２ μｇ／ｍ ｌ。认为ＴＮＦ细胞生物活性的检测受诸因素影响。