角膜缘干细胞标志物

角膜缘干细胞是角膜上皮再生的源泉,属成体干细胞,有其独特的生物学特性。角膜缘干细胞标志物的确立,对于建立规范的角膜缘干细胞分离纯化和培养方法、进一步研究其生物学特性起着决定性的作用。通过查阅国内外文献资料,对角膜缘干细胞标志物的最新研究进展作一综述。

间充质干细胞通过调节趋化因子及血管内皮生长因子异常表达减轻大鼠碱烧伤角膜的机制研究

目的分析趋化因子及血管内皮生长因子异常表达与大鼠碱烧伤角膜的关系及间充质干细胞的调节作用,为相关治疗提供参考。方法 50只大鼠(100眼)随机分为5组:对照组、碱烧伤角膜模型组、间充质干细胞小剂量组、间充质干细胞中剂量和间充质干细胞高剂量组(n=20)。除对照组大鼠给予等量的生理盐水处理外,其余各组大鼠采用1 mol/L的Na OH溶液复制大鼠碱烧伤角膜模型,间充质干细胞治疗组采用对应剂量(0.25×10~6,0.5×10~6,1.5×10~6)进行治疗,对照组大鼠给予等量的生理盐水。Western Blotting法分析各组大鼠角膜组织中趋化因子CC趋化因子配体(CCL)2、CCL3、CCL8、CCL14、趋化因子基质细胞衍生因子-1受体4(CXCR4)、基质细胞衍生因子1(SDF1)、VEGF、VEGFR及白细胞介素的表达变化。结果碱烧伤大鼠角膜CCL2、CCL3、CCL8、CCL14、IL-1β、IL-2及IL-6、VEGF及VEGFR表达明显增强,而SDF1和CXCR4表达明显减弱,且与对照组相比差异有显著性(P<0.05);经间充质干细胞治疗后上述蛋白的异常表达得到部分恢复(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论间充质干细胞能够通过调控趋化因子及血管内皮生长因子表达发挥改善大鼠碱烧伤角膜的作用,且作用具有剂量依赖性效果。

碱烧伤小鼠角膜组织中SDF-1/CXCR4的表达及意义

目的探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和CXCR4在小鼠角膜碱烧伤新生血管形成中的作用。方法应用在角膜中央放置NaOH滤纸片的方法构建C57/BL小鼠角膜碱烧伤角膜新生血管动物模型,通过免疫组织化学、RT-PCR、Western blot法检测碱烧伤后不同时间点角膜组织中SDF-1和CXCR4 mRNA及蛋白的表达情况。结果免疫组织化学检测显示,正常小鼠角膜基质层无明显SDF-1的阳性表达,CXCR4仅在角膜上皮层呈弱阳性表达。RT-PCR检测显示,与正常对照组相比,碱烧伤后各时间点SDF-1和CXCR4 mRNA表达均明显升高(P<0.05);Western blot检测显示SDF-1和CXCR4蛋白的表达也可见相似的变化趋势(P<0.05)。SDF-1和CXCR4在角膜中的表达于第7天达高峰,第14天开始下降,但仍高于正常。结论SDF-1/CXCR4在碱烧伤后小鼠角膜组织中的表达增加,在角膜碱烧伤的炎症和新生血管的形成和发展过程中可能发挥重要作用。

间充质干细胞联合环孢霉素A对大鼠角膜移植排斥的效果分析及炎症反应因子的参与作用研究

目的探讨间充质干细胞联合环孢霉素A对角膜移植排斥的效果及炎症反应因子的参与作用。方法采用远交系Wistar雌性大鼠和SD雌性大鼠建立穿透性角膜移植排斥模型。随机分为空白对照组(尾静脉及肌肉分别注射不含药物的PBS,0.1 ml/kg和1 ml/kg),角膜移植排斥组(尾静脉及肌肉分别注射不含药物的PBS,0.1 ml/kg和1ml/kg)、治疗高剂量组[尾静脉注射MSCs(5×106)+肌注Cs A 10 mg/(kg·d)]、中剂量组[尾静脉注射MSCs(5×106)+肌注Cs A 5 mg/(kg·d)]、低剂量组[尾静脉注射MSCs(5×106)+肌注Cs A 2 mg/(kg·d)],每组8只。观察各组大鼠治疗后的角膜植片存活情况,并检测血清中相关的炎症反应蛋白水平。结果与空白对照组比较,角膜移植排斥组大鼠的角膜植片存活时间明显缩短(P<0.01),而治疗组大鼠的存活时间明显延长,且存在剂量依赖性(P<0.05,P<0.01);角膜移植排斥组大鼠炎症反应因子白介素细胞(IL)-2、IL-6、IL-10、纤维介素蛋白2和单核细胞趋化蛋白1、转化生长因子(TGF-β)、Smad1及Smad3、内质网跨膜蛋白肌醇酶1(IRE1)及其下游转录因子(XBP1)水平明显高于对照组(P<0.01),而治疗组大鼠的上述炎症因子水平明显降低,且存在剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论间充质干细胞联合环孢霉素A对角膜移植排斥有良好的治疗效果,且其作用可能与调控体内炎症反应因子水平异常有关。

碳纤维增强树脂基复合材料孔隙率检测方法的分析比较

碳纤维增强树脂基复合材料生产过程中会产生孔隙的缺陷,孔隙会对性能造成影响,故需要对孔隙含量进行标定。以碳纤维增强双马酰亚胺树脂为研究对象,分别采用密度法、显微照相法、超声检测法、高精度X射线数字成像法等4种方法,对热压罐和微波固化成型法制备的层压板孔隙缺陷进行检测,并计算其孔隙率。研究结果表明,显微照相法、高精度X射线数字成像技术法测试的孔隙率接近,密度法的误差较大。

LASIK手术患者人格特征分析

目的:研究准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)患者人格特征,为屈光手术方式的选择提供心理学评估依据。方法:选择53例个体化LASIK手术患者(A组)、75例标准LASIK手术患者(B组)及71例屈光不正非手术患者(C组),采用卡特尔16种个性因素测验(16PF),对三组患者进行个体测试并运用SPSS 11.0统计软件对数据进行单向方差分析。结果:与C组比较,A组患者持强性和紧张性因素的得分显著偏高,稳定性因素得分偏低,差异有统计学意义(P<0.05),而B组患者敢为性和实验性因素得分偏高,怀疑性因素得分偏低,差异显著(P<0.05)。A,B两组比较,持强性、敢为性和怀疑性因素得分有显著差异(P<0.05)。结论:LASIK手术患者具有特殊人格特征,固执己见,遇事多疑的患者更趋于选择个体化手术方式,手术前应采用适当心理评估。

经后路白内障摘除预防角膜内皮失代偿的疗效观察

目的观察经后路白内障摘除对预防角膜内皮失代偿的效果。方法对13例伴有严重角膜内皮异常但保持屈光透明的白内障患者行经后路白内障摘除术,并对术后矫正视力、主要并发症及角膜内皮密度进行评估,术后随诊8～28个月。结果 13例患者手术顺利,除1例患者因Fuch's角膜内皮营养不良继发大泡性角膜病变于术后5个月矫正视力下降外,余患者术后矫正视力均有不同程度提高。术前、术后角膜内皮细胞平均密度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论经后路白内障摘除可最大程度减少医源性角膜内皮损伤,是伴有严重角膜内皮病变白内障患者安全、有效的手术方式。

淡紫拟青霉致角膜溃疡1例并文献复习

淡紫拟青霉（Paecilomyces lilacinus）是土壤和植物中普遍存在的腐生菌,是实验室及医疗器械常见的污染菌之一,对人类是一种机会致病真菌。其感染常为医源性感染或外伤所致,尤其好发于免疫缺陷宿主。本文报道1例由淡紫拟青霉引起的角膜溃疡。1病历摘要患者,女,66岁,于4年前在农田作业时用衣物擦拭右眼后即出现眼红、眼痛、畏光、流泪,伴视力下降,未予特殊处理。

Nd:YAG激光治疗白内障超声乳化人工晶体植入术后前房内玻璃体纤维条索牵引

目的观察Nd:YAG激光切断术治疗白内障超声乳化人工晶体植入术后前房内玻璃体纤维牵引条索的效果。方法白内障超声乳化人工晶体植入术后伴有瞳孔变形、闪光感、眩光、视力下降、人工晶体偏位等的前房内玻璃体纤维条索牵引的患者31例(31眼),在表面麻醉下,用Nd:YAG激光将前房内切口与瞳孔后相连的玻璃体纤维牵引条索击断。结果所有病例均成功切断玻璃体纤维条索,瞳孔恢复正圆形,症状得到改善,随访期间均未出现黄斑囊样水肿和视网膜裂孔及脱离。结论 Nd:YAG激光切断术是解除白内障术后前房内玻璃体纤维条索牵引、恢复正圆形瞳孔的非侵入式良好治疗手段。

新月弯孢霉致角膜溃疡1例

报道1例由新月弯孢菌感染引起的角膜溃疡。患者女,42岁。右眼反复红肿、疼痛、伴视力下降长达7 a,曾在某院眼科中心诊断为"真菌性角膜炎并穿孔",给予药物治疗后病情好转,但上述症状反复多次出现,并逐渐加重,视力严重下降,为求进一步诊治来我院就诊,行右眼穿透性角膜移植+前房成形术,手术顺利,无手术并发症。术后15个月再次出现眼红、眼痛,眼角膜刮片镜检可见宽大分隔菌丝、培养为新月弯孢菌。予抗真菌治疗,病情好转出院。

葡萄糖浓度对培养的兔晶状体上皮细胞的影响

目的:观察不同浓度葡萄糖培养基对培养的兔晶状体上皮细胞形态、生长状态、细胞分化及TGF-β2表达的影响。方法:以4.5,9,18和36g/L葡萄糖培养基处理原代培养的第2代兔晶状体上皮细胞,MTT法检测细胞生长状态,免疫组化法检测TGF-β2,α-SMA及PCNA。结果:相对于4.5g/L葡萄糖培养基,高浓度葡萄糖培养基可增强晶状体上皮细胞α-SMA与TGF-β2的表达,而PCNA的表达无明显差异;MTT所反映的细胞生长状态呈下降趋势。结论:高浓度葡萄糖培养基可促进晶状体上皮细胞分化,对细胞的增殖有抑制作用,在此过程中TGF-β2可能发挥着重要的作用。

眼内窥镜辅助下硅油取出联合人工晶状体悬吊术的临床观察

目的 评价眼内窥镜辅助下硅油取出联合人工晶状体(IOL)悬吊术的安全性与疗效。方法 将2018年6月至2022年5月在中国人民解放军南部战区总医院眼科行眼内窥镜辅助下硅油取出联合IOL悬吊术的32例(32眼)晶状体囊膜不完整的硅油填充眼纳入研究。记录手术时间,观察术前及术后1 d、1个月、6个月、12个月最佳矫正视力(BCVA)、眼压、角膜内皮细胞密度、角膜内皮细胞面积变异系数、六边形细胞比例和角膜内皮细胞数的变化,观察并记录术后IOL位置,同时记录术中、术后并发症情况。结果 术中硅油取出的时间为15.8~45.2(21.3±7.5)min, IOL悬吊手术的时间为16.7~33.6(22.3±6.8)min,联合手术的总时间为29.8~53.2(34.7±8.8)min。术前BCVA(logMAR)为1.913±0.854,术后1 d、1个月、6个月、12个月的BCVA(logMAR)分别为1.319±0.790、0.934±0.610、1.003±0.710、0.963±0.689,与术前相比,术后1个月、6个月及12个月患者BCVA均显著提高(均为P<0.05)。术后不同时间患者眼压与术前比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术后不同时间角膜内皮细胞密度、角膜内皮细胞面积变异系数、六边形细胞比例和角膜内皮细胞数与术前比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术后1 d、1个月、6个月、12个月所有患者IOL的倾斜度波动于3°~5°,IOL的偏心量波动于0.25~0.32 mm,悬吊的IOL均无明显倾斜且位置居中。随访期内,视网膜脱离复发1眼(3.1%),均未见硅油残留和持续性角膜水肿发生。结论 眼内窥镜辅助下硅油取出联合IOL悬吊术是治疗晶状体囊膜不完整的硅油填充眼安全有效的方法。

眼内窥镜引导简化硅油取出的方法

目的利用眼内窥镜的优点,探讨简化玻璃体腔硅油取出的方法。方法回顾82例(97眼)内窥镜引导下的无晶状体眼或联合白内障摘除术的硅油取出术的病例,记录其手术时间和术中并发症,随访27~60个月,观察其术后1 d、1周、1个月、6个月的视力、眼压、角膜内皮细胞密度、视网膜脱离复发率、硅油残留率和其他并发症。结果手术时间15.6~46.3 min,平均(20.6±8.3)min,术中未见明显并发症。术前最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)为(2.04±0.58)LogMAR,术后1 d、1周、1个月、6个月的BCVA为(1.92±0.79)LogMAR、(0.94±0.57)LogMAR、(0.98±0.61)LogMAR、(0.96±0.69)LogMAR,术后1 d视力与术前比较,差异无统计学意义(P>0.05),但术后1周、1个月、6个月与术前视力比较,差异有统计学意义(P<0.05);术前眼压为(17.65±1.33)mmHg,术后1 d、1周、1个月、6个月眼压为(9.21±3.81)mmHg、(13.57±2.93)mmHg、(14.75±3.60)mmHg、(15.15±2.32)mmHg,术后1 d与术前眼压比较,差异有统计学意义(P<0.05),术后1周、1个月、6个月与术前眼压比较,差异无统计学意义(P>0.05);比较不同年龄亚组的术前、术后的角膜内皮细胞密度可知,各年龄组的角膜内皮细胞密度术后1 d与术前比较,差异有统计学意义(P<0.05),术后1周、1个月、6个月角膜内皮细胞密度与术后1 d比较所有升高,与术前角膜内皮细胞密度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后视网膜脱离复发1例(1眼,1.03%),无硅油残留和持续性角膜水肿病例。结论眼内窥镜引导下的简化硅油取出法,简化了硅油取出的操作,减少了手术创伤,减少了术后硅油残留,并且不增加术中术后并发症,是一种安全有效的新方法。

荧光激活细胞分离技术在角膜缘干细胞研究中的应用

目的探讨荧光激活细胞分离技术(FACS)在体外培养的兔角膜缘上皮细胞生物学特性研究中的应用。方法收集新西兰白兔的角膜缘组织进行组织块培养。采用FACS分离出体外培养的兔角膜缘上皮细胞中的侧群(SP)细胞和非SP细胞。用2%锥虫蓝染色法对分离出的SP细胞进行克隆形成率(CFE)检测以评估SP细胞的活性,用免疫组织化学染色检测K3/12和ABCG2蛋白在SP细胞和非SP细胞中的表达。结果SP细胞在体外培养的兔角膜缘上皮细胞中占(0.22±0.09)%,分离出的SP细胞的CFE为(5.52±0.45)%,而非SP细胞为(0.78±0.73)%,二者差异有统计学意义(t=2.17,P<0.01);大部分SP细胞呈K3/K12抗原阴性,ABCG2免疫标记呈阳性;而非SP细胞呈K3/K12抗原阳性,ABCG2免疫标记呈阴性。结论FACS可以应用于体外培养的兔角膜缘上皮细胞的SP细胞分离,分离出的SP细胞具有较强的增生能力。

色素上皮衍生因子在角膜疾病治疗中的应用

色素上皮衍生因子(PEDF)是一种50 kDa分泌型糖蛋白,具有多种生物学效应和生理活性,包括抗血管生成、抗肿瘤和神经营养活性等。从1987年PEDF被发现以来,许多研究证实PEDF或PEDF的多肽片段具有治疗多种疾病的潜力,尤其是伴有新生血管形成、神经损伤、肿瘤等病理改变的疾病。角膜疾病常出现新生血管浸润、炎性反应、神经损伤等,目前PEDF在角膜疾病治疗中的应用也逐渐成为研究热点,现将此方面的研究进展进行综述。

高海拔诱导角膜移植术后排斥反应1例

患者,男,37岁,2012年2月因'双眼被炸伤并氧化钙进入5 d'入本院就诊,本院处于广东省广州市,海拔为43.4 m;入院检查:Vod=光感,定位不准确;Vos=光感,定位准确;双眼Tn,右眼颧弓部、外眦部、上睑皮肤缺损、结痂,睑缘皮肤糜烂,眼睑闭合不全,左眼睑缘皮肤糜烂,眼睑轻度闭合不全;双眼结膜充血,角膜灰白色混浊,角膜缘全周苍白,眼内结构窥不清(图1)。给予抗炎、抗纤维溶解、降眼压等治疗。

城市桥梁施工安全管理探析

我国经济及建筑行业自改革开放以来就得到了快速发展,并带动了城市化发展,使人们的经济水平及生活水平都得到提高,促进我国综合国力的提高。但建筑行业及城市化的发展提高了城市桥梁施工要求,尤其是桥梁施工安全管理要求,因为桥梁施工不但关系到城市桥梁工程的质量,还关系到城市桥梁的使用寿命及使用价值,更影响到整个城市的发展,理应得到城市桥梁施工单位及施工管理人员的高度重视与关注。对此,本文作者根据自己的桥梁施工经验,对城市桥梁施工安全管理进行详细分析,希望能够给需要的人提供一定的参考价值。

现浇箱梁跨河支架基础的设计与施工

成彭高架现浇箱梁跨越府河,采用钢管桩和工字钢作平台基础。文中介绍了成彭高架现浇箱梁钢管桩的设计方案与受力验算,概述了其施工技术,提出了利用贯入度和桩长两者同时控制桩的施工长度的方法,以保证施工安全。

结膜下注射AMD 3100对小鼠角膜碱烧伤血管新生的治疗作用

目的探讨结膜下注射AMD 3100对小鼠角膜碱烧伤血管新生的治疗作用及其机制。方法采用碱烧伤法诱导小鼠角膜血管新生(CNV)形成。在碱烧伤后当天,治疗组和对照组分别在球结膜下注射AMD 3100 5μg(10μL)和生理盐水(10μL),每日1次,连续用药7 d。裂隙灯显微镜下观察不同时间点角膜炎症指数。病理组织学检查观察炎症细胞数量,并采用免疫组化检测角膜组织微血管密度。结果实验组在碱烧伤后不同时间点的炎症指数、炎症细胞数量和微血管密度均明显少于对照组(P<0.05)。结论AMD 3100可有效抑制CNV,可能与减轻碱烧伤后炎症反应有关。

体外共培养模式下神经干细胞对视网膜小胶质细胞生物学功能的影响

目的:通过构建体外共培养体系,探讨神经干细胞(NSCs)对脂多糖(LPS)活化后的视网膜小胶质细胞(RMG)生物学功能的影响及TIMP1/MMP9途径在其中的可能作用。方法:采用振荡分离法获取C57/BL6小鼠原代RMG,通过免疫荧光技术检测细胞Iba1的表达对其进行鉴定。采用含有LPS的培养基(终浓度为1μg·mL^-1)刺激RMG 24h后,将其分为LPS对照组、NSCs组、TB-NSCs组,其中NSCs组将RMG与NSCs共培养24 h,TB-NSCs组将RMG与用中和性抗体封闭TIMP1的NSCs共培养24h;同时,未予以LPS刺激的RMG作为空白对照组。采用免疫荧光技术检测各组RMG的Ki67表达情况,观察其增殖能力;TUNEL技术检测各组RMG凋亡情况;ELISA方法检测各组RMG上清液中TNF-α、IL-1β的蛋白质量浓度。结果:采用振荡分离法获取的原代RMG经免疫荧光染色鉴定Iba1呈阳性。NSCs组Ki67阳性率较LPS对照组降低(P<0.05),而TB-NSCs组Ki67阳性率较NSCs组升高(P<0.05)。NSCs组TUNEL阳性率较LPS对照组明显升高(P<0.05),而TB-NSCs组TUNEL阳性率与NSCs组间差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照组、LPS对照组、NSCs组、TB-NSCs组RMG上清液中TNF-α蛋白质量浓度分别为(2.10±0.65)、(25.69±2.01)、(20.01±1.63)、(23.76±1.45)ng·mL^1,总体比较差异显著(FTNF-α=302.65,PTNF-α<0.05);IL-1β蛋白质量浓度分别为(1.77±0.74)、(15.38±1.18)、(10.88±0.95)、(13.45±1.41)ng·mL^-1,总体比较差异非常显著(FIL-1β=179.84,PIL-1β<0.05);其中,NSCs组TNF-α及IL-1β蛋白质量浓度均较LPS对照组显著降低(P<0.05),TB-NSCs组TNF-α及IL-1β蛋白质量浓度较NSCs组明显升高(P<0.05)。结论:体外共培养模式下,NSCs可抑制RMG增殖能力,提高其凋亡水平,并抑制其分泌促炎因子TNF-α及IL-1β,该效应可能与调控TIMP1/MMP9相关。