一种复方麻醉剂对圈养马来熊麻醉效果的研究

为了探索一种适合熊科动物使用的理想复合麻醉药物,该研究采用TMZB(布托啡诺-右美托咪啶-替来他明-唑拉西泮)复合麻醉药物以0.20-0.30 mg/kg的剂量对10只圈养马来熊采用肌肉注射的方式进行全身麻醉。并对麻醉后动物的镇痛效果、镇静效果、肌松效果、苏醒效果及各项生理机能进行观察和评分。结果显示:麻醉动物的肌松、镇静、镇痛效果良好,麻醉后动物体温、呼吸率、心率、血氧饱和度、平均动脉压与原基础值相比,均差异不显著。研究表明:TMZB组合是一种理想的熊科动物复合麻醉药物,为熊科动物的饲养管理、疾病诊断、手术治疗等提供较好的保定、麻醉、镇静、镇痛及肌肉效果,且麻醉效果稳定。

棕熊蛔虫ITS rDNA的PCR扩增与序列分析

目的以核糖体DNA（rDNA）的第一与第二内转录间隔区序列（ITS-1及ITS-2）鉴定从广州动物园棕熊分离的蛔虫种类。方法应用PCR方法以保守引物NC5和NC2扩增蛔虫样本的ITS及5．8SrDNA序列，将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-TEsay载体，用菌落PCR及酶切鉴定阳性菌落，对阳性菌落进行测序，并与Gen．Bank“公布的人蛔虫（Ascaris lumbricoides）、猪蛔虫（Ascariis suum）、浣熊贝利斯蛔虫（Baylisascaris procyonh）及狮弓蛔虫（Toxascaris leonina）ITS序列比较。结果从棕熊分离的2个蛔虫样本的ITS及5．8SrDNA总长为859—861bp，种内相似性为99．7％，与GenBank^TM公布的人蛔虫、猪蛔虫、浣熊贝利斯蛔虫及狮弓蛔虫的相似性分别为84．6％、84．5％、89．3％及72．3％，序列差异明显。结论棕熊蛔虫不同于上述种类蛔虫，可能为Baylisacaris transfuga.

右美托咪啶与舒泰对圈养虎麻醉效果的观察

为了评估右美托咪啶与舒泰（替来他明和唑拉西泮合剂）对虎的麻醉效果,17只虎（4只孟加拉虎、4只华南虎和9只东北虎）按0.025~0.038 ml/kg的剂量肌肉注射进行麻醉,最终以阿替美唑进行苏醒,分别对诱导、麻醉及苏醒效果进行观察和评分。右美托咪啶和舒泰联合用药对虎的诱导期为（12.24±4.56）min,侧卧姿势进入麻醉期,平均诱导效果判定为1（极好）,麻醉期间体温为（39.4±0.95）℃,较正常体温高;呼吸频率为（7.50±2.56）次/min,下降极显著,血氧饱和度为（87.32±8.43）%,与麻醉前相差不大。平均麻醉效果判定为4~5（中度麻醉至外科麻醉水平）,静脉注射颉颃药阿替美唑后,苏醒时间（8.31±3.87）min,平均麻醉效果为2~3（一般,好）,苏醒过程中所有虎出现较明显的共济失调或不协调的现象,苏醒后6 d内未见神经症状及其他副作用。右美托咪啶与舒泰联合用药对健康的虎是一种有效的麻醉药物,但苏醒过程中可能出现共济失调现象。

华南虎血巴尔通体感染的诊疗

了解华南虎血巴尔通体的临床诊断和PCR检测方法,介绍对症治疗的方法。笔者对1头患病的华南虎进行症状观察、血液涂片检查和PCR检测,利用土霉素进行治疗。患病动物出现高热稽留、厌食、贫血等症状,血液涂片中红细胞发生皱缩、每个视野中有多个巴尔通体,并通过PCR检测证实华南虎源血巴尔通体为大型猫血巴尔通体,利用土霉素治疗使动物康复,从症状观察结合实验室检查可以诊断华南虎的血巴尔通体病,土霉素对猫科动物血巴尔通体感染有较好的治疗效果。

小熊猫蛔虫ITS及5.8S rDNA序列的克隆与分析

以广州动物园小熊猫体内分离出的蛔虫为研究对象,运用PCR方法,以保守引物NC5和NC2扩增其核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区(ITS)和5.8S序列,并对扩增后的片段进行纯化、克隆至pGEM-Teasy载体、转化、测序和序列分析,以鉴定小熊猫蛔虫的种类。结果显示2条蛔虫样品的ITS及5.8S rDNA序列基本一致,总长为913 bp,样品间序列相似性为99.7%。将序列与GenBank^(TM)公布的相关序列进行比较分析,结果显示2条蛔虫的ITS及5.8S序列与黑熊横走贝蛔虫(Baylisascaris transfuga注册号AB571304)相似性分别为98.1%、98.4%,与大熊猫西氏贝蛔虫(Baylisascaris schroederi注册号JN210912)相似性分别为96.9%、97.1%,与猪蛔虫(Ascaris suum注册号AB571302)相似性分别为89.9%、90.1%,与人蛔虫(Ascaris lumbricoides注册号AB571296)相似性分别为89.8%、90.1%,ITS-1序列与浣熊贝蛔虫(Baylisascaris procyonis注册号AB053230)相似性分别为92.0%、92.3%。研究结果表明小熊猫体内分离的蛔虫可能为贝蛔属蛔虫,从而为蛔虫的进一步分类、鉴定和遗传变异研究奠定了基础。

非洲狮附红细胞体病的诊治

2007年4月，我园的1头非洲狮出现高热稽留、精神沉郁、厌食和贫血等症状，经调查诊断为附红细胞体病。经应用强力霉索取得较好的治疗效果。现报道如下：

6种麻醉药和化学保定药剂对虎的保定效果比较

使用氯胺酮、氯胺酮+安定、麻保静、复方麻保静、鹿眠宁、846合剂等6种麻醉药和化学保定药对华南虎、东北虎、孟加拉虎等3亚种虎22头共进行163次麻醉或化学保定,根据临床效果观察对其作了比较分析.结果表明复方麻保静、鹿眠宁对3亚种虎的化学保定效果最佳;麻保静、氯胺酮+安定次之;氯胺酮、846合剂较差.且同一种药剂对不同亚种虎的麻醉或化学保定效果没有明显不同.

狒狒附红细胞体病的诊治

对1头患病的阿拉伯狒狒进行症状观察和血液涂片检查,利用盐酸缺氧土霉素进行治疗。结果表明,患病动物出现高热稽留、厌食、贫血等症状,血液涂片中红细胞发生皱缩、每个视野中有较8-12附红细胞体,利用盐酸缺氧土霉素治疗动物康复。由此可见,症状观察结合血液涂片检查可以诊断阿拉伯狒狒的附红细胞体病,盐酸缺氧土霉素对附红细胞体病有较好的治疗效果。

虎源传染性鼻气管炎病毒gD基因重组真核表达载体的构建

根据从虎气管组织扩增获得的猫传染性鼻气管炎病毒相关核酸序列,设计扩增编码虎源猫传染性鼻气管炎病毒gD蛋白基因片段的引物,通过PCR扩增出gD基因片段,并成功插入到pMD18-T Simple载体中,筛选获得重组质粒,命名为18T-gD。重组质粒通过HindⅢ和XhoⅠ酶切后,插入pcDNA 3.1(+)真核表达载体构建出gD基因的重组真核表达质粒pcDNA-gD。用脂质体将重组真核表达质粒pcDNA-gD转染293T细胞,通过RT-PCR和Western blot检测,结果显示gD基因在真核细胞中得到正确转录和表达,所表达蛋白分子质量约为42.29ku,为虎源猫传染性鼻气管炎基因疫苗的研究奠定了基础。

长颈鹿血矛线虫ITS的PCR扩增与序列分析

目的利用分子生物学方法对来自长颈鹿皱胃的血矛线虫进行虫种鉴定。方法对样品XM9和XM11的核糖体DNA内转录间隔区(ITS-1、5.8 S、ITS-2)进行PCR扩增及序列分析,并与GenBank公布的血矛线虫(Hae-monchus)相应序列进行比较。结果来自长颈鹿皱胃的2条血矛线虫具有相同的ITS序列,5.8 S与ITS-1分别为153 bp、404 bp,与GenBank分布的捻转血矛线虫序列是一致的。ITS-2序列为231 bp,第753位是一个多态位点,该序列与来自国外的H.contortus,H.placei,H.longistipes存在0-18个碱基差异。结论来自长颈鹿的血矛线虫是捻转血矛线虫。

中国豹源豚鼠气单胞菌的分子鉴定与毒力基因分析

从表现为急性出血性败血症的中国豹分离到一株细菌,为了鉴定这株细菌,并对其主要毒力基因进行检测分析,实验中进行了细菌的分离培养、生化鉴定及动物毒力试验;PCR扩增gyrB基因并结合系统发育树的构建和分析进行了菌种的分子鉴定;对分离菌进行了气溶素(aerolysin,aer)、热敏感细胞肠毒素(heat-Labile cytotonic enterotoxin,alt)、细胞毒性肠毒素(cytotoxic enterotoxin,act)、热敏蛋白酶(temperature-sensitive protease,eprCAI)、丝氨酸蛋白酶(serine protease,ahp)5种毒力基因的PCR扩增和测序。结果显示:根据培养特性、生化试验、小白鼠毒力试验鉴定分离菌为豚鼠气单胞菌;中国豹源细菌gyrB基因与豚鼠气单胞菌(JQ815381)的同源性为98.9%,应为豚鼠气单胞菌;具有act、alt、eprACI 3种毒力基因。该研究可为快捷、准确检测气单胞菌引起的疾病提供参考。

环尾狐猴源弓形虫的检测与鉴定

为了确定引起广东环尾狐猴（Lemur catta）呼吸困难、厌食和出血性肺炎症状的病原,从2只死亡的环尾狐猴体内无菌采集心肝肺肾组织样本。通过病原形态学观察,鉴定为弓形虫（Toxoplasma sp.）后,另外采集在狐猴笼舍出现的2只老鼠和1只猫4份组织样本。所有样本分别采用荧光定量PCR及一步法PCR技术进行弓形虫的检测与529 bp重复序列分析。以弓形虫B1基因片断为扩增对象的荧光定量PCR检测显示6份样本的CT为25.84~30.29,溶解曲线中均出现明显峰值,核酸定量峰值均大于阳性对照。用一步法PCR自6份样本中均扩增出529 bp目的片段,测序和Blast分析显示,该目的片段与GenBank中登录号为KC607824和DQ779189的刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）核苷酸序列相似性最高,均为98.7%;与国际标准强毒虫株RH的核苷酸相似性为98.5%。这些结果表明,荧光定量PCR技术可以用于环尾狐猴弓形虫病的快速诊断,本次环尾狐猴的死亡可能是由于弓形虫的感染引起的,刚地弓形虫可能由野猫与老鼠传播。

蓝鹇源H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因序列分析

为了探查禽流感病毒H9N2在圈养蓝鹇中的流行规律及变异情况,从圈养蓝鹇(Lophura swinhoii)分离1株H9N2亚型禽流感病毒,对其HA及NA基因进行PCR扩增并进行序列分析。本分离株的HA基因序列与Genbank中广西鸡源2014年分离株A/chicken/Guangxi/CLB02/2014(H9N2)(KT023046)的核苷酸序列相似性最高,为99%;而NA基因与登录号为KM455874,2013人源分离株A/Lengshuitan/11197/2013(H9N2)的NA核苷酸序列相似性最高,为97%。HA蛋白序列分析显示:HA的226位氨基酸残基为亮氨酸(Leu),具有哺乳动物SAα2-6受体结合的特性,裂解位点处的基序PSRSSR↓GL,明显发生1个碱性氨基酸的变异。HA蛋白具有9个潜在N-糖基化位点,分别位于29、82、141、218、298、305、313、492、551位;HA受体结合位点氨基酸变异明显。NA蛋白序列分析显示:NA蛋白颈部63~65位氨基酸缺失,具有7个潜在的糖基化位点,分别位于69、86、146、200、234、264、368位;NA蛋白红细胞结合位点、抗原决定簇区域氨基酸变异活跃。HA、NA基因进化树分析显示该分离株属于欧亚分支中Y280-Like小进化分支,与疫苗株虽属于同一进化分支中,但亲缘关系较远。蓝鹇源H9N2亚型禽流感病毒(LS/GD/P29/16)HA和NA基因发生一定程度的变异,需要加强流行病学监测。

2例印度羚骨折内固定手术及护理

印度羚四肢骨折多为外力撞击所致,是动物园野生动物中常见的创伤性骨折。为探讨印度羚骨折的手术治疗方法,本文选用美托咪啶、丙泊酚配合异氟烷吸入麻醉的方法对2头印度羚进行化学保定,在麻醉效果确切的前提下,采用PRCL动物专用锁定骨板系统和双板固定技术进行前肢桡尺骨骨折的内固定手术。结果：整个手术过程约3 h,期间各项监护指标相对在正常范围：ETCO_2 60~64 mmHg、SPO_2 89%~99%、脉搏102~121t/min、体温36.8~37.1℃。术后X光检查可见骨头断端吻合。40 d后病兽仅前肢稍显萎缩,创口愈合良好,断面基本愈合,运动时可见有着地,X光检查发现骨痂生长良好。79 d后患肢着地行走自如,放回展区合群饲养。结论：利用PRCL动物专用锁定骨板系统和双板固定技术对印度羚骨折具有良好的医疗效果,值得推广应用。