鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留分析方法

采用超高效液相色谱-串联质谱技术,以鸡蛋为研究对象,建立一种高效测定鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留测定方法。样品用乙腈提取,并通过固相萃取技术对样品进行净化处理,供超高效液相色谱-串联质谱仪进行检测。实验结果表明,该方法能够有效地分离和测定氟虫腈及其代谢物残留。在3个不同的添加水平(0.005、0.010、0.020 mg/kg)下,4种农药的回收率范围为81.3%~92.5%,相对标准偏差均低于5.5%。;在0.001~0.050μg/mL浓度范围内,线性关系良好,相关系数均大于0.990 4;氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈砜与氟虫腈亚砜的检出限分别为0.001、0.002、0.002、0.002 mg/kg。该方法准确、灵敏、快速,可满足对鸡蛋中氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈砜与氟虫腈亚砜4种药物残留的检测需要。

李氏杆菌感染雌性小鼠生殖器官的病理学观察

为了研究李氏杆菌对生殖器官的影响,从感染病羊分离纯化得到李氏杆菌,以雌鼠为模型,设立试验组与对照组,试验组小鼠腹腔注射李氏杆菌,对照组小鼠注射同剂量的灭菌生理盐水,对小鼠进行剖检,H. E.染色后镜检观察雌鼠生殖器官的组织病理学变化。结果显示,试验组小鼠的子宫组织间隙较大,肌层增厚,出血严重,子宫内膜上皮脱落,淋巴细胞浸润;卵巢髓质处出血,颗粒细胞凋亡,黄体细胞空泡化。本试验对进一步探讨母畜感染李氏杆菌的发病机理和临床防治提供基础资料。

运输应激对小鼠肾脏显微结构及热休克蛋白表达的影响

为探究运输应激对小鼠肾脏造成的病理损伤以及热休克蛋白表达的影响,本试验采用H.E.染色、免疫组织化学、蛋白质免疫印迹方法,分析运输条件下小鼠肾脏病变的显微结构,热休克蛋白(HSP27、HSP70和HSP90)的表达部位和表达量。结果显示,运输应激条件下小鼠肾小管和肾间质具有不同程度的病理变化,肾小管病变明显,管腔缩小或消失,上皮细胞发生变性、坏死,细胞排列疏松不规则;肾间质血管有出血、充血现象。免疫组织化学结果表明,HSP27、HSP70和HSP90主要定位于肾小管上皮细胞,但运输应激后HSP90在肾小管基本无表达。免疫印迹分析可知,与对照组相比,应激组HSP27蛋白表达量未见明显变化,HSP70蛋白表达量明显上升(P<0.05),HSP90蛋白表达量明显下降(P<0.05)。表明运输应激会对小鼠肾脏造成一定的损伤,HSP70和HSP90与肾脏的应激损伤存在一定的关联。

高效液相色谱/蒸发光散射法测定多黏菌素类原料药中主成分含量

建立了高效液相色谱/蒸发光散射法测定多黏菌素B和多黏菌素E原料药中主成分含量的分析方法。采用Phenomenex Kinetex Biphenyl色谱柱(50 mm×4.6 mm i.d.,5μm)分离,甲醇和20 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.6%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 mL/min;蒸发光散射检测器参数为:漂移管温度55℃,气体压力20 psi,增益250。结果表明,多黏菌素B和多黏菌素E在10~200μg/mL质量浓度范围内线性良好,检出限分别为0.8μg/mL和1.2μg/mL,定量下限分别为2.6μg/mL和4.0μg/mL。批内回收率分别为100%~104%和101%~103%,批内相对标准偏差(RSD)分别为0.90%~2.4%和0.90%~2.6%,批间回收率分别为101%~103%和101%~102%,批间RSD分别为1.1%~1.9%和1.3%~1.7%。与微生物检定法相比,该方法简便,能够更准确地反映原料药中目标分析物含量,精密度更高,可用于多黏菌素B和多黏菌素E两种原料药的质量控制。

硅胶表面霉酚酸分子印迹聚合物的合成及应用

【目的】合成一种对霉酚酸具有特异性识别的分子印迹聚合物吸附材料,用于青贮饲料中霉酚酸的净化、富集和分析检测。【方法】以γ−甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷(γ-MPS)改性的硅胶为载体、霉酚酸酯为虚拟模板,合成硅胶表面接枝分子印迹聚合物,采用扫描电镜对制备材料进行表征,通过平衡吸附试验评价材料吸附特性。建立基于合成的分子印迹聚合物固相萃取−高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)法检测青贮饲料中霉酚酸。【结果】改性硅胶表面成功包裹一层印迹聚合物。静态吸附试验表明,印迹材料饱和吸附量为4.5 mg/g;动态吸附试验表明,该材料吸附速率快,60 min内即达到吸附平衡。基于该印迹材料作为固相萃取吸附剂建立了HPLC法,霉酚酸的回收率为76.0%~81.2%,相对标准偏差小于7%,检测限达60μg/kg。【结论】制备的硅胶表面霉酚酸分子印迹聚合物可特异性吸附霉酚酸,建立的分子印迹聚合物固相萃取–HPLC法可用于日常青贮饲料中霉酚酸的分析测定,了解青贮饲料被霉菌毒素污染的状况。研究结果可为青贮饲料的质量安全控制提供指导。

运输应激对小鼠脾脏HSP70、TNF-α及IL含量的影响

为了探讨运输应激对小鼠脾脏IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α和HSP70含量变化的影响,本试验将清洁级小鼠分为对照组(不处理)、处理组1(160 r/min,运输2 h)、处理组2(160 r/min,运输6 h),每组各10只,运输2 h和6 h用恒温培养震荡器模拟运输应激条件进行处理,运用双抗夹心ELISA法测定小鼠脾脏组织IL-2、IL-4、IL-6、HSP-70、TNF-α的浓度。结果表明,与对照组相比,运输2 h后IL-4含量显著降低(P<0.05),运输6 h后含量下降(P=0.083);运输2 h后TNF-α含量有升高趋势(P>0.05),运输6 h后TNF-α含量显著升高(P<0.05)。可见,运输2 h和6 h小鼠脾脏中IL-4水平降低,TNF-α含量升高,提示运输对小鼠免疫功能有影响,脾脏IL-4和TNF-α含量可作为小鼠运输应激的候选评判分子指标。

江西省萍乡市某羊场布鲁菌病的流行病学分析

江西省萍乡市某山羊场妊娠母羊散发流产,为了分析该羊场流产的发生是否与布鲁菌感染有关,同时掌握该羊场布鲁菌病的流行情况,随机抽样采血共分离得到100份山羊血清,首先使用虎红平板凝集试验进行初步鉴定,然后通过试管凝集试验重新检测阳性血清。结果表明,该羊场布鲁菌病阳性率为20%。由此可以得出,该羊场的布鲁菌病防控工作存在较严重的问题,应制定有效的防治措施,将山羊布鲁菌病的检测纳入日常疾病监测工作中,最终达到净化该病的目的。

BDNF和TrkB蛋白在5月龄和10月龄雌猫子宫和卵巢表达的研究

为探讨脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸激酶B(TrkB)在幼龄和初情期猫子宫和卵巢的表达规律,试验采用免疫组织化学方法检测BDNF和TrkB在5月龄、10月龄雌猫子宫和卵巢上的表达差异。结果表明:BDNF和TrkB在原始卵泡和各级卵泡中均有表达,BDNF在窦状卵泡的颗粒细胞、膜细胞和卵母细胞中表达明显,10月龄蛋白表达强度强于5月龄,颗粒细胞的蛋白表达增强明显;TrkB表达部位与BDNF基本一致,但卵泡液和卵母细胞表面出现强表达,10月龄表达强度与5月龄基本一致。此外在猫卵巢发现含有多个卵母细胞的卵泡。BDNF在子宫内膜、腺体和小血管均有表达,10月龄子宫的蛋白表达强度高于5月龄,BDNF在10月龄子宫肌层有表达、5月龄无表达;TrkB在10月龄子宫内膜、腺体、肌层弱表达,小血管强表达,TrkB蛋白除了在5月龄子宫的小血管强表达外其他部位几乎无表达。

肉用犊牛源产气荚膜梭菌的分离鉴定与药敏试验

为了确定宜春市肉牛犊牛腹泻的发病原因,试验采用牛腹泻五联病原体快速诊断试剂盒初步检验9头腹泻犊牛的粪便样品,对试剂盒检测为阳性的样品进行细菌的分离、纯化、生化鉴定和药敏试验。结果表明:使用牛腹泻五联病原体快速诊断试剂盒检测到有7份产气荚膜梭菌为阳性,2份大肠杆菌为阳性;细菌分离培养、生化鉴定结果符合产气荚膜梭菌的特性;青霉素、呋喃唑酮、多西环素和苯唑西林等药物能够明显抑制分离菌的生长。说明产气荚膜梭菌感染是引起犊牛腹泻的主要原因。

BDNF和TrkB在幼犬生殖器官中的表达

为了探讨脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体酪氨酸蛋白激酶受体B（TrkB）蛋白在幼犬生殖器官中的表达情况,选取4只40日龄左右的幼犬分别进行手术采集卵巢、子宫、输卵管和睾丸样品,运用免疫组织化学方法分析BDNF和TrkB蛋白在这4种器官中的分布情况。结果表明,BDNF蛋白在卵泡细胞胞质中强表达,在初级卵母细胞中表达较弱,而TrkB仅在卵泡细胞中表达,此外,BDNF和TrkB都在卵巢间质细胞中表达。BDNF和TrkB在子宫内膜上皮和腺上皮以及输卵管黏膜上皮细胞中都有表达,TrkB在子宫和输卵管的固有层和肌层部分细胞中也可见表达。BDNF和TrkB都在睾丸的精原细胞中表达。结果提示,BDNF蛋白对幼犬生殖器官的活动有一定的调节作用,可能通过与其受体TrkB的特异性结合来实现其功能。

HSP90、HSP70、HSP27在不同发育时期猫卵巢的表达规律研究

为了探究HSP90、HSP70、HSP27在不同发育时期猫卵巢的表达规律,试验运用免疫组织化学方法检测了5月龄、10月龄、1岁龄、1.5岁龄(未妊娠)和1.5岁龄(妊娠20 d)猫卵巢的HSP90、HSP70、HSP27蛋白表达情况。结果表明:HSP90在5月龄猫卵巢上为强表达,在10月龄猫成熟卵泡、1岁龄猫初级卵泡、1.5岁龄(未妊娠)猫初级卵泡、1.5岁龄(妊娠20 d)猫黄体与原始卵泡、初级卵泡上弱表达,在1岁龄猫原始卵泡表达较强;HSP70在5月龄、10月龄、1岁龄猫的卵巢各级卵泡和1.5岁龄猫的黄体强表达;HSP27在10月龄猫卵巢中未见表达,在5月龄猫卵巢中各级卵泡呈弱表达,在1岁龄、1.5岁龄(未妊娠)、1.5岁龄(妊娠20 d)猫卵巢中强表达。说明HSP90、HSP70、HSP27在猫卵巢不同发育时期都有不同程度的表达,提示其在卵巢卵泡发育、卵母细胞成熟、黄体形成和退化等过程发挥重要作用。