正交设计优化蟾酥注射液的提取工艺

试验旨在优化蟾酥注射液的提取工艺,试验以吲哚类总生物碱(以5-羟色胺盐酸盐计)的含量为考察指标,以加水倍数(A)、加热温度(B)和提取时间(C)为考察因素,通过L_(9)(3^(4))正交试验优化蟾酥注射液的提取工艺,确定提取工艺参数,并采用最大极差法对正交试验数据分析处理。结果显示,加水倍数是影响蟾酥注射液主要成分含量的主要因素,蟾酥注射液的最佳提取工艺为10倍加水量浸泡,加热煮沸(100℃),提取时间4 h。验证性试验按最优工艺制备3批样品,采用紫外可见分光光度(UV)法测定蟾酥注射液中吲哚类总生物碱的含量为9.92 mg/L。研究表明,该提取工艺稳定可靠,可用于中试生产。

在线资源在动物药理混合式教学中的研究与应用实践

研究以学银在线为平台开展动物药理混合式教学的研究与应用。在学银在线建立在线课程,课程资源包含授课视频18个、授课视频总时长152 min、非视频资源36份和课程资料53个等。对7个班级总共256名学生进行混合式教学实践,开展课前线上虚拟课堂、课中线下课堂、课后线下课堂的混合式教学模式,其中线上参与活动总人次601次,参与问卷总人次426次,参与作业人数256人;256名学生全部通过课程考核,拿到学分,其中90分以上占5.47%、80~89分占28.91%、70~79分占46.09%、60~69分占19.53%。

母源抗体对禽流感-新城疫疫苗免疫后抗体效价的影响规律研究

为研究母源抗体对鸡免疫禽流感-新城疫灭活疫苗后抗体效价的影响及其变化规律,试验将1日龄鸡苗随机分成A、B两组,分别于1、7日龄接种禽流感(H9)-新城疫二联灭活疫苗,并在1、7、21、35、42日龄分别采血,HI试验测定禽流感和新城疫抗体效价,试验期42 d。结果显示:A、B两组鸡免疫21d后禽流感抗体效价持续下降并达到最低值,A组禽流感抗体下降速度和幅度较B组高,禽流感抗体阳性率21日龄最低,A组抗体阳性率较B组低约30%,A组抗体效价明显低于B组(P<0.05);A、B两组新城疫抗体效价持续下降,21日龄达到最低值,28日龄开始上升,35日龄达到峰值,两组间各日龄抗体效价、峰值均无显著差异(P>0.05),A组新城疫抗体效价下降和上升的速度较B组慢。结果表明高母源抗体对禽流感灭活疫苗免疫后抗体效价影响较大,在高母源抗体基础上免疫禽流感疫苗,影响免疫后抗体效价的上升速度和幅度;高母源抗体对新城疫灭活疫苗免疫后效价影响较小,早免疫能有效保护鸡群。

蟾酥微丸的急性与亚慢性毒性研究

试验旨在观察蟾酥微丸对小鼠急性毒性和大鼠长期毒性作用,评价其安全性,为临床用药提供理论依据。急性毒性试验选取昆明小鼠,2次灌服蟾酥微丸,测定蟾酥微丸的急性毒性。亚慢性毒性试验选取120只SD大鼠,平均分为低、中、高蟾酥微丸药物组和空白组(给予等体积的蒸馏水),灌胃给药,分别在连续给药28d后和停药2周后称重,随机选取每组20只大鼠(停药后余下10只)心脏采血处死,检测血液学、血液生化指标并做病理组织学检查。急性毒性试验用药死亡时间集中在1~4h,经计算LD_(50)为13.21g/kg。亚慢性毒性试验中,连续给药28d后,高、中剂量组雄性大鼠的体重与空白组差异极显著(P<0.01);高剂量组的谷草转氨酶与碱性磷酸酶与空白组相比差异极显著(P<0.01);高、中剂量组的肾脏系数与空白组相比差异极显著(P<0.01)。经过2周停药恢复,高剂量组的生化指标恢复不佳,而中、低剂量组则恢复良好。病理学检查结果表明,高、中剂量组大鼠的肝脏、肾脏出现肿胀淤血,高剂量大鼠的肝脏表面有水泡样病灶。结果表明,蟾酥微丸的急性毒性较小,安全性较高;大剂量长期使用可导致肝脏、肾脏损伤,故临床应用要注意剂量和疗程。

复方肿节风颗粒及其单方对高尿酸血症小鼠的影响

通过腹腔注射化学诱导剂氧嗪酸钾建造小鼠急性高尿酸血症模型,研究复方肿节风颗粒及其单方对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响。结果表明,与空白对照组比较,阳性对照组小鼠血清尿酸值极显著升高(P<0.01),表明用氧嗪酸钾造模成功;与阳性对照组相比,复方肿节风颗粒组小鼠血清尿酸值极显著降低(P<0.01),单方肿节风颗粒组显著降低(P<0.05),单方射干颗粒和单方甘草颗粒降尿酸作用不明显;复方肿节风颗粒和单方肿节风颗粒肝脏匀浆中黄嘌呤氧化酶(XOD)活性与模型组相比差异极显著(P<0.01),而射干、甘草颗粒差异不显著。复方肿节风颗粒降尿酸作用主要来自方中肿节风,其降尿酸机理与抑制XOD有关。

广西部分地区黑山羊肠道寄生虫感染情况调查

【目的】了解广西部分地区黑山羊肠道寄生虫的感染情况。【方法】采用饱和食盐水漂浮、离心沉淀等方法对采自广西百色、贵港部分地区黑山羊养殖场的305份黑山羊粪便样品进行肠道寄生虫病原学检查。【结果】黑山羊肠道寄生虫总感染率为81.64%,其中球虫(Coccidioides)感染率为66.23%、毛圆科线虫(Trichostrongyle)感染率为43.93%,二者为优势虫种。此外还发现阿米巴原虫(Amoeba)、莫妮茨绦虫(Moniz Taenia)、吸虫(Trematode)等寄生虫。随着年龄的增长,黑山羊肠道寄生虫感染率逐步降低,散养方式的感染率明显高于圈养,但不同性别间的肠道寄生虫感染率差异不显著。【结论】黑山羊肠道寄生虫感染较为普遍,在日常疾病防控中应考虑球虫和毛圆科线虫的防治,注意不同年龄阶段、饲养方式等影响因素。

丁酸梭菌与富硒酵母对蛋鸡生产性能及粪便菌群结构的影响

【目的】探究混合饲喂丁酸梭菌(Clostridium butyricum)和富硒酵母对蛋鸡生产性能和粪便菌群结构的影响,为提升蛋鸡生产性能和经济价值提供参考依据。【方法】以海兰褐蛋鸡为试验动物,对照组(CK)饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加丁酸梭菌类和富硒酵母(T1,添加1.0 g/kg丁酸梭菌和0.2 mg/kg富硒酵母;T2,添加2.0 g/kg丁酸梭菌和0.2 mg/kg富硒酵母;T3,添加3.0 g/kg丁酸梭菌和0.2 mg/kg富硒酵母)。预试期7 d,正试期28 d,期间测定蛋鸡的产蛋率、平均日采食量、平均蛋重、料蛋比和死淘率,试验结束时测定蛋形指数、蛋壳厚度、蛋黄颜色、蛋白高度、哈氏单位和鸡蛋硒含量,并收集各组蛋鸡粪便,通过生物信息学方法分析其菌群结构。【结果】在生产性能方面,与CK相比,T1的产蛋率显著提高(P<0.05,下同),平均蛋重无显著差异(P>0.05,下同),平均日采食量和料蛋比显著降低,其他各组的平均日采食量和料蛋比略有下降;T1和T3的死淘率有所降低;各组的蛋白高度、哈氏单位和蛋形指数差异不显著;T1和T2的蛋壳厚度和鸡蛋硒含量均显著提高,且均以T1最高。在粪便菌群结构方面,与CK相比,T1和T2的ACE指数和Chao1指数升高,但差异不显著;T1的Shannon指数降低,Simpson指数升高,但差异均不显著。T1粪便的菌群丰富度和多样性均呈上升趋势;在门分类水平,CK的优势菌群为厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes),占比分别为74.02%、9.14%和7.03%,试验组的优势菌群均为厚壁菌门和变形菌门,其中,T1的变形菌门占比显著高于CK,厚壁菌门占比与CK差异不显著;在属分类水平,CK和试验组的优势菌群均为乳杆菌属(Lactobacillus),其占比间均无显著差异;T1和T2的梭形杆菌属(Lysinibacillus)占比均显著高于CK,其他属组成的菌属与CK均无显著差异。【结论】在基础日粮中添加丁酸梭菌和富硒酵母能提高蛋鸡的部分生产性能,且有利于促进蛋鸡肠道优良菌群结构形成,以添加1.0 g/kg丁酸梭菌和0.2 mg/kg富硒酵母的饲喂效果最佳。

复方肿节风溶液抗炎和平喘作用的研究

为考察复方肿节风溶液的抗炎平喘作用,进行了该药的体外抗炎和体内平喘作用研究。用脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞建立体外炎症模型,MTT法检测复方肿节风对RAW 264.7细胞活力的影响,ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-1和IL-6浓度,Griess法检测NO水平。体内试验通过卵清蛋白(OVA)致敏、激发Wistar大鼠建立哮喘模型,并灌服不同剂量(12、6、3g/kg)的复方肿节风溶液。ELISA检测大鼠血清中IL-4、IL-17、IFN-γ及IgE水平;瑞特-吉姆萨染色血涂片,用血细胞计数器计数血液白细胞总数和嗜酸性粒细胞数,肺组织HE染色,观察肺组织病理变化。体外抗炎试验结果表明,复方肿节风溶液在10μg/mL^40μg/mL的浓度范围内对RAW 264.7细胞活力无显著影响。10、20、40μg/mL的复方肿节风溶液能不同程度抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞产生TNF-α、IL-6、IL-1和NO的水平(P<0.05),并存在一定的剂量依赖关系。体内平喘试验结果表明,与哮喘模型组相比,复方肿节风溶液能明显下调血清中IL-4、IL-17和IgE的高分泌,上调血清中IFN-γ水平(P<0.05)。表明复方肿节风溶液抗炎平喘作可能通过抑制相关炎症因子的表达来实现的。

蟾酥水提取物体外抗炎作用的试验研究

为了评估蟾酥水提取物的体外抗炎作用,研究用LPS诱导RAW 264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞建立细胞炎症模型,采用Griess法测定蟾酥水提取物对细胞上清液中NO水平的影响,采用ELISA法测定TNF-α、IL-1β和IL-6含量,采用荧光法测定细胞内ROS水平。结果表明:蟾酥水提取物对LPS诱导的RAW 264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞所分泌的炎症因子NO、TNF-α、IL-1β和IL-6有明显的抑制作用,与模型组相比明显降低,同时蟾酥水提取物能够极显著降低LPS诱导的细胞内ROS水平(P<0.01)。说明蟾酥水提取物可能通过抑制炎症因子、降低细胞内活性氧水平减轻细胞的炎症反应,表现良好的抗炎作用。

肿节风三清颗粒抗炎和抗哮喘作用

本研究旨在考察肿节风三清颗粒的抗炎和平喘作用。MTT法检测200、400、800、1 600μg/mL肿节风三清颗粒对RAW264.7细胞活力的影响;用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞建立体外炎症模型,并采用400、800、1 600μg/mL肿节风三清颗粒处理,ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;用卵清蛋白(OVA)致敏、激发雌性BALB/c小鼠建立哮喘模型,并采用100、200、300mg/kg肿节风三清颗粒处理,末次激发24h后,测定哮喘小鼠气道高反应性(AHR),取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞分类计数,ELISA法检测BALF中IL-4、IL-5和IL-13浓度及血清中OVA-IgE水平。结果显示,200~16 00μg/mL肿节风三清颗粒对RAW 264.7细胞增殖有显著或极显著促进作用(P<0.05;P<0.01),与LPS组相比,800、1 600μg/mL肿节风三清颗粒能够极显著降低TNF-α和IL-6水平(P<0.01);与哮喘模型组相比,肿节风三清颗粒明显改善了气道高反应性,明显减少了BALF中的炎症细胞数目及IL-4、IL-5和IL-13浓度,极显著降低了血清中OVA-IgE水平(P<0.01)。综上所述,肿节风三清颗粒可通过抑制炎症因子的表达对炎症细胞模型和哮喘小鼠模型起到良好的保护作用。

蟾酥醇提取物的体外抗炎作用研究

为了考察蟾酥醇提取物的体外抗炎作用,用LPS诱导RAW 264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞建立细胞炎症模型,采用Griess法测定蟾酥醇提取物对细胞上清液中的NO水平,ELISA法测定TNF-α、ILlβ、IL-6含量,荧光法测定细胞内ROS水平。结果显示,蟾酥醇提取物对LPS诱导的RAW264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞所分泌的炎症因子(NO、TNF-α、IL-1β、IL-6)有明显的抑制作用,与空白对照组相比明显降低,同时蟾酥醇提取物极显著降低LPS诱导的细胞内ROS水平(P<0.01)。由此推测,蟾酥醇提取物通过抑制炎症因子、降低细胞内活性氧水平减轻细胞的炎症反应,具有良好的抗炎作用。

复方苦玄参颗粒质量标准初步研究

为建立复方苦玄参颗粒的质量标准,采用薄层色谱法(TCL)对复方苦玄参颗粒中的苦玄参、桃金娘根进行定性分析;采用高效液相色谱法(HPLC)对复方苦玄参颗粒中的苦玄参苷IA进行含量测定。TLC表明,复方苦玄参颗粒中的苦玄参、桃金娘根均与其对应的标准药材在相同的位置有一致的斑点;HPLC表明,苦玄参苷IA在21.08μg/mL^105.4μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.999 3),平均加样回收率为98.07%,RSD=0.01%(n=6)。表明建立的定性及定量分析方法操作简便,结果准确可靠,可作为复方苦玄参颗粒中苦玄参、桃金娘根的鉴别及苦玄参苷IA的含量测定。

肿节风三清颗粒的薄层色谱鉴别和含量测定

试验旨在建立肿节风三清颗粒的鉴别和含量测定分析方法,以期为制剂的质量标准提供方法学依据。采用薄层色谱法(TLC)对肿节风三清颗粒中的肿节风、射干、甘草进行定性分析;采用高效液相色谱法(HPLC)对制剂中的异嗪皮啶和迷迭香酸进行含量测定。薄层色谱结果表明,肿节风三清颗粒中的肿节风、射干、甘草在与其对应的标准药材或标准品的相同位置有一致的荧光斑点,而阴性样品无特征荧光斑点。HPLC结果表明,异嗪皮啶在3.795~18.975μg/mL范围内线性关系良好(R^2=0.9995),迷迭香酸在6.035~30.175μg/mL范围内线性关系良好(R^2=0.9997);异嗪皮啶和迷迭香酸的平均回收率分别为99.13%和100.30%,RSD分别为1.98%和0.02%(n=6)。结果表明,建立的定性及定量分析方法可操作性强,结果准确可靠,可用于肿节风三清颗粒中肿节风、射干、甘草的鉴别和指标性成分异嗪皮啶和迷迭香酸的含量测定,为肿节风三清颗粒的质量标准提供了方法学依据。

肿节风三清颗粒成型工艺与中试生产研究

为了优选肿节风三清颗粒的最佳成型工艺并考察中试生产的合理性,进行颗粒成型工艺和中试工艺放大研究,颗粒成型工艺试验以成型率、溶化率、吸湿率为考察指标,以浸膏粉与辅料的配比、蔗糖与糊精的配比、乙醇浓度为考察因素,采用正交试验优化成型工艺;中试生产以浸膏得率、成品率、有效成分含量为指标,考察中试工艺放大的可行性。结果显示,优选的肿节风三清颗粒最佳成型工艺为蔗糖∶糊精为3∶2、乙醇浓度为65%、浸膏粉∶辅料为1∶6;颗粒临界相对湿度为73.49%。三批肿节风三清浸膏(中间体)的浸膏得率分别为8.58%、8.58%和8.63%,三批肿节风三清颗粒(成品)的成品率分别为93.40%、92.13%和93.53%,中间体和成品中有效成分异嗪皮啶、迷迭香酸的含量均稳定可控。表明肿节风三清颗粒成型工艺合理,中试生产稳定可控,适合批量生产。

复方苦玄参颗粒急性毒性和亚慢性毒性试验

【目的】分析复方苦玄参颗粒对昆明小鼠的急性毒性作用和对Wistar大鼠的亚慢性毒性作用,评价其用药安全性,为复方苦玄参颗粒的兽医临床用药提供理论依据。【方法】急性毒性试验以SPF级昆明小鼠为研究对象,分3次灌胃,测定复方苦玄参颗粒对昆明小鼠的急性毒性作用。亚慢性毒性试验选取Wistar大鼠为研究对象,设高、中、低3个剂量组[13.40、6.70和3.35 g/kg(以复方颗粒计)],每天灌胃给药1次,连续给药35 d,分别于第1、7、14、21、28和35 d称重,给药结束后对各剂量组Wistar大鼠(雌、雄各半)进行眼球采血,用于血常规指标和血清生化指标检测;同时采集肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、肠道、睾丸(♂)或子宫(♀)等器官称重,计算各器官的脏器系数,以及固定后制作石蜡切片,用于组织病理学检测。【结果】急性毒性试验结果表明,昆明小鼠在最大给药量(80.40 g/kg)下未表现出任何毒性反应,解剖也未发现明显可见的病理变化。亚慢性毒性试验结果显示,各剂量组Wistar大鼠的体重、血常规指标、血清生化指标和脏器系数与对照组(生理盐水灌胃)Wistar大鼠相比均未发生显著变化(P>0.05);经剖检和组织病理学检查,发现高剂量组和对照组Wistar大鼠的脾脏、肺脏、肝脏、肾脏、胃、肠道、睾丸(♂)或子宫(♀)等器官组织均未出现异常病理变化。【结论】复方苦玄参颗粒无急性毒性作用,长期用药也不会产生亚慢性毒性作用,具有很高的用药安全性,可在兽医临床上推广应用。

氟尼辛葡甲胺掩味口腔崩解片的质量标准研究

为了建立氟尼辛葡甲胺掩味口腔崩解片的质量标准,采用薄层色谱法(TLC)鉴别氟尼辛葡甲胺掩味口腔崩解片中的氟尼辛葡甲胺,采用高效液相色谱法(HPLC)测定该制剂中氟尼辛葡甲胺的含量,并测定了其崩解时限、重量差异、脆碎度和溶出度。结果显示:氟尼辛葡甲胺掩味口腔崩解片能在30 s内崩解完全,重量差异和脆碎度均符合规定;制剂在人工唾液中60 s内溶出低于10%,在pH值4.5的醋酸缓冲液中10 min内溶出超过80%,表明具有掩味效果及速释特性;TLC背景清晰,分离效果好,无干扰;氟尼辛葡甲胺在24.5~245μg/mL范围内线性良好,相关系数为0.9998,平均回收率为99.55%,RSD(n=6)为0.58%。表明本试验建立的鉴别和含量测定方法简便、准确、可靠,为氟尼辛葡甲胺掩味口腔崩解片质量标准的建立提供了参考。

正交设计优化胆膏中胆汁酸的提取工艺

为了优化胆膏中胆汁酸的提取工艺,采用L9(34)正交试验设计,以总胆汁酸含量为考察指标,筛选酸碱纯化工艺提取胆膏中胆汁酸时的1∶1盐酸用量、NaOH用量和纯化时间,确定最佳工艺条件,并与传统的乙醇纯化工艺进行比较。结果表明,胆膏中胆汁酸的最佳提取工艺为1∶1盐酸用量4 mL、NaOH用量0.2 g、纯化时间12 h。优选的提取工艺具有生产成本低,纯化时间短,所需场地小,设备要求不高,操作简单,对环境无污染,且不使用易燃易爆有机溶剂,安全性好的特点,更符合工业生产的实际需要。

胆翘注射液中主要质量指标成分的定性和定量方法的建立

本试验旨在建立胆翘注射液中主要活性成分的定性和定量分析方法,为制订胆翘注射液的质量标准提供方法学依据。采用薄层色谱法(TLC)对胆翘注射液中胆膏、黄芩提取物、连翘提取物进行定性分析;采用高效液相色谱法(HPLC)对胆翘注射液中胆膏、黄芩提取物进行含量测定。结果显示:TLC斑点清晰,分离度好,阴性样品无干扰;猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、黄芩苷分别在0.125~0.625 mg/mL(R ^(2)=0.9999)、0.125~0.625 mg/mL(R ^(2)=0.9992)、0.075~0.375 mg/mL(R ^(2)=0.9999)范围时,与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为100.1%(RSD=0.77%)、100.6%(RSD=0.72%)、101.7%(RSD=1.00%)。本试验建立的定性及定量分析方法操作简便,结果准确可靠,可作为胆翘注射液中胆膏、黄芩提取物、连翘提取物的鉴别及胆膏、黄芩提取物的含量测定方法。

牛羊芽囊原虫病研究进展

芽囊原虫(Blastocystis)是一种厌氧单核细胞寄生虫,曾长期被认为是一种无害的酵母,但越来越多的研究表明芽囊原虫广泛存在于牛羊肠道内,对牛羊健康造成威胁,同时携带可感染人类的亚型基因,具有一定的公共卫生风险。本文通过对国内外牛羊感染芽囊原虫的相关研究报道进行分析,从牛羊感染芽囊原虫的病原学、基因型、流行病学、致病性、诊断与防治等方面进行综述,以期为其他动物甚至人类的芽囊原虫病的预防和控制提供参考。

浅议初中体育教学中怎样促进学生的个性发展

初中学生正处于成长阶段的重要时期,保持身心健康,实现学生的个性化发展,是学校进行教育过程中的重要问题。本文着重分析了初中体育对于学生的个性发展的意义,以及如何能够更好地促进学生个性化发展。对于这些问题的探讨和解决,促使初中体育能够更好地融入到学生的个性化发展之中去。