外周血白细胞ANAPC1表达水平与冠心病的相关性及其诊断价值

目的:探讨外周血白细胞(PBLs)细胞周期末期促复合体亚基1(ANAPC1)表达与冠心病(CHD)的相关性及其诊断价值。方法:从GEO数据库检索基因表达数据集和单细胞RNA测序数据集观察ANAPC1在CHD患者PBLs和其他细胞中的表达情况。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测和比较70例CHD患者与对照人群ANAPC1的表达水平。用受试者工作特征(ROC)曲线和总ROC(SROC)曲线评价ANAPC1对CHD的诊断价值。使用CDB数据库查找ANAPC1的潜在上游转录因子,ANAPC1差异共表达基因通过基因本体论(GO)、疾病本体论(DO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)进行富集分析。结果:GEO数据库分析显示,ANAPC1在CHD患者PBLs中的表达水平降低(总SMD=-0.74,95%CI:-1.36~-0.13),SROC曲线下面积为0.76,灵敏度为0.73,特异度为0.67。临床标本RT-qPCR显示,ANAPC1在CHD患者PBLs中的表达水平降低,ROC曲线下面积为0.71,灵敏度为0.80,特异度为0.61。GEO数据库查找单细胞RNA测序相关数据集发现,ANAPC1在不同时期、不同细胞中的表达量均无明显差异。上游潜在转录因子预测显示,ETS1(SMD=-0.53,95%CI:-0.99~-0.06)、GATA3(SMD=-0.46,95%CI:-0.87~-0.06)可能正向调控ANAPC1的表达,IRAK1(SMD=0.42,95%CI:0.07~0.77)、ERF(SMD=0.27,95%CI:-0.03~0.51)可能负向调控ANAPC1的表达。DO富集分析提示,ANAPC1差异负相关共表达基因与动脉粥样硬化及动脉粥样硬化性心脏病等疾病相关。结论:ANAPC1在CHD患者PBLs中的表达下调与CHD发生、发展呈正相关关系,且对CHD具有一定的诊断价值。

细胞周期蛋白A2在肝细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨细胞周期蛋白A2(CCNA2)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义。方法:从TCGA、GEO、GETx数据库获得测序数据,通过STATA 15.0进行meta分析评估HCC患者肿瘤组织中CCNA2 mRNA的表达水平;通过数据库GEPIA绘制CCNA2在HCC中的生存曲线,探究CCNA2对HCC预后的影响。在HCC细胞系(Huh7和SK-Hep1)沉默CCNA2(shCCNA2组),并设置空载体对照组(shNC组),通过细胞功能学实验检测沉默CCNA2对HCC细胞增殖、迁移与侵袭、细胞周期和细胞凋亡中的影响。通过在鸡胚绒毛尿囊膜构建HCC细胞移植瘤模型,观察并分离瘤体,检测CCNA2在体内对HCC生长的影响。结果:CCNA2在HCC患者肿瘤组织中m RNA水平显著高于非癌肝组织(SMD=1.65,95%CI:1.46~1.85,I2=89%)。CCNA2高表达与肝癌患者的不良预后呈负相关关系。与shNC组相比,shCCNA2组细胞增殖、迁移和侵袭能力降低(P<0.05)。shCCNA2组Huh7和SK-Hep1细胞的G0/G1期、S期、G2/M期占比发生改变(P<0.05)。鸡胚绒毛尿囊膜移植成瘤实验中,与shNC组比较,shCCNA2组肿瘤体积明显减小(P<0.05)。结论:CCNA2可能通过影响HCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制HCC的进展和转移,其有望成为HCC治疗靶点。

hsa-miR-423-5p激活IL1R1基因在冠心病中的作用机制

目的:通过人群表达水平及转录组测序分析hsa-miR-423-5p靶向目标基因在冠心病(CHD)中的作用机制。方法:选取广西医科大学第一附属医院收治的151例CHD患者(CHD组),同期选择健康体检者作为健康对照组。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测外周血白细胞中hsa-miR-423-5p表达水平,通过Spearman相关分析对hsa-miR-423-5p与各临床指标的相关关系进行分析。在EA.hy 926细胞中过表达hsa-miR-423-5p后进行hsa-miR-423-5p的亚细胞定位实验及转录组测序。针对测序结果预测hsa-miR-423-5p的潜在靶基因,对其进行RT-qPCR实验验证并分析目标基因与hsa-miR-423-5p表达水平及各临床指标之间的相关关系。结果:CHD组外周血白细胞中hsa-miR-423-5p的表达水平显著低于健康对照组(P<0.05)。hsamiR-423-5p的表达量与总胆固醇(TC)呈负相关关系,与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈正相关关系(P<0.05)。在EA.hy926细胞中过表达hsa-miR-423-5p,亚细胞定位实验显示hsa-miR-423-5p主要存在于细胞核内。转录组测序结果经过分析验证后,发现过表达hsa-miR-423-5p后可上调IL1R1表达。CHD组中IL1R1的表达水平低于健康对照组(P<0.01),IL1R1表达水平与hsa-miR-423-5p表达水平、HDL-C均呈正相关关系(P<0.01)。结论:hsa-miR-423-5p及IL1R1在CHD患者中呈低表达且与TC和HDL-C相关;hsa-miR-423-5p在内皮细胞上调IL1R1的表达进而影响血脂水平,提示hsa-miR-423-5p可能通过调控IL1R1基因影响脂质代谢及内皮细胞功能从而参与CHD的进展。

尖吻蝮蛇毒无出血活性纤溶酶的一般药理学作用研究

目的:研究从蝮亚科尖吻蝮蛇(Agkistrodon acutus)分离纯化出的无出血活性纤溶酶(NHFLE)的一般药理学作用。方法:观察NHFLE对小鼠神经系统的影响。检测大鼠的心率、平均动脉压、呼吸以及凝血时间等指标。结果:NHFLE对小鼠的一般行为、协调活动和阈下戊巴比妥钠的催眠作用无影响;不同剂量NHFLE对大鼠心率、血压以及呼吸也无影响。1.4mg/kg的NHFLE在10～30min内显著延长大鼠的凝血时间(P<0.05),在60min后恢复正常。结论:NHFLE对小鼠的神经系统、大鼠的心血管系统及呼吸系统均无影响。

尖吻蝮蛇毒无出血活性纤溶酶对大鼠的长期毒性试验

目的:研究无出血活性纤溶酶(Non-hemorrhagic fibrinolytic enzyme,NHFLE)对大鼠的长期毒性,评价其安全性。方法:健康Wistar大鼠随机分为低、中、高剂量(2.25,4.5,9.0 mg·kg^(-1)·d^(-1))组及生理氯化钠注射液对照组,每组24只。尾静脉注射给药,每周给药7 d,连续给药4周,给药容积为10 mL·kg^(-1)。停药后24 h每组处死12只动物,余下动物继续观察2周后活杀检查。观察动物一般性状、体重、饮食等,检测血液学、凝血、血液生化、脏器系数及组织病理学改变。结果:NHFLE高剂量组大鼠在4周给药期出现多动、烦躁不安、轻微腹泻以及体重增长缓慢,以上改变在停药后恢复正常,其余动物各项检查未见异常。结论:NHFLE毒性较低。

科研融入教学在病理生理学中的应用探究

本文探讨科研融入教学在病理生理学中的应用效果,以2017级五年制临床医学专业200名学生为授课对象,在病理生理学教学中融入科研,分析具体教学效果。研究发现,学生的平均成绩为80.23±2.21分,学习非常努力占47.48%,努力占41.41%,整体学习努力程度较高;认为教学效果很好的占65.15%,认为教学效果较好的占24.24%;对课程非常满意占78.79%,满意占17.17%,满意度为95.96%,学生对课程教学的总体满意度较高。因此,将科研融入教学法应用于病理生理学教学价值显著,利于激发学生主动学习的能力与热情,提高教学效果,值得应用并推广。

尖吻蝮蛇毒无出血活性纤溶酶的急性毒性实验

目的研究无出血活性纤溶酶(Non-hemorrhagic fibrinolytic enzyme,NHFLE)的急性毒性,评价其安全性。方法尾静脉注射给药,观察记录给予NHFLE后昆明种小鼠的急性毒性反应。结果NHFLE的半数致死量(LD50)为28.84 mg/kg。结论急性毒性实验证实该药毒性低,临床应用安全性好。

巴马地区壮族人群口腔黏膜细胞端粒的长度

目的探讨广西巴马地区壮族人群口腔黏膜细胞端粒的长度及其意义。方法应用实时荧光定量PCR方法测定广西巴马地区壮族长寿老人口腔黏膜细胞的相对端粒长度(RTL),并与子女组及对照组比较。结果 (1)子女组65～年龄段的RTL长于对照组(P=0.026),说明RTL在长寿群体中有特殊的维持机制。(2)RTL与年龄呈负相关,年龄越大,RTL越短。(3)长寿组、子女组各年龄段RTL无性别差异,对照组65～年龄段男性的RTL长于女性(P=0.006)。结论巴马地区壮族人群口腔细胞的RTL在长寿群体中有一定的遗传倾向,RTL随年龄的增大而缩短。

BDNF Val66Met多态性与长寿群体代谢综合征危险因素的相关性研究

目的 探讨广西地区长寿人群脑源性神经营养因子（BDNF）Val66Met的多态性与代谢综合征危险因素（BMI、血糖、血脂水平、血压水平等）的相关性。方法 用扩增受阻突变体系聚合酶链式反应技术（ARMS-PCR）对广西红水河流域壮族长寿老人487例（长寿组）、长寿老人的子女593例（子女组）及普通健康中老年人582例（对照组）进行BDNF Val66Met的基因分型,并分析各基因型与代谢综合征危险因素的相关性。结果 长寿组、子女组及对照组BDNF Val66Met位点最小等位基因（A）频率分别为44.3%、41.1%及41.9%,等位基因及基因型频率分布在三组间无明显差异（P均〉0.05）,且不受性别的影响;而组内比较显示对照组女性AA基因型的频率高于男性（20.9%vs 14.6%,P=0.004）。整体人群及对照组A基因型携带者（GA/AA）的HDL-C水平低于非A基因型携带者（GG）（F=6.904,P=0.009;F=7.616,P=0.006）;按性别、BMI、血糖、血脂水平分层后,此种趋势在对照组的女性、高血糖亚组、血脂正常亚组依然存在;而且对照组A基因型发生超重的风险是非A基因型的1.63倍（OR=1.63,95%CI：1.05~2.55）,其收缩压水平也高于非A基因型携带者;对照组血脂正常亚组的A基因型的BMI、TG水平高于非A携带者。多元线性回归分析发现长寿组的TC水平与BDNF Val66Met基因型存在负相关。结论 BDNF 66Met可降低广西地区普通中老年人群的HDL-C水平并有导致超重的风险,而对长寿老人及其子女影响不大。

广西巴马地区壮族长寿人群转化生长因子-β1基因的多态性

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因的多态性与人类长寿的相关性。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术,检测198例广西巴马地区健康壮族长寿老人和177例巴马地区健康壮族成年人TGF-β1基因的G-800A、C-509T、T+869C、G+915C多态位点,并比较两组人群TGF-β1基因的相应基因型频率和等位基因频率。结果研究对象中均未检测出G-800A、G+915C多态位点,G-800A位点的基因型均为-800GG,G+915C位点的基因型均为+915GG。C-509T和T+869C两位点均存在多态性。长寿组的等位基因-509C和+869T的频率均明显高于对照组(分别为27.78%和20.90%,P=0.029;35.10%和27.97%,P=0.036)。长寿组基因型为-509CT和+869TT的频率均明显高于对照组(分别为37.37%和24.29%,P=0.006;20.20%和10.17%,P=0.007),可能为长寿的有利因素(OR分别为1.86和2.24);而-509TT的频率明显低于对照组(分别为53.54%和67.23%,P=0.007),可能是长寿的不利因素(OR=0.56)。在G-800A、C-509T、T+869C、G+915C多态位点基因型组合中,长寿组和对照组出现频率最高的均为GG-TT-CC-GG,但无显著性差异(分别为45.45%和52.54%,P=0.170);长寿组GG-CT-TT-GG的频率明显高于对照组(分别为11.11%和1.13%,P=0.000),是长寿的有利因素(OR=10.94)。结论在巴马人群中,TGF-β1基因内带有-509CT和+869TT基因型的个体可能有利于长寿,而-509TT基因型可能是长寿的不利因子。

广西巴马地区壮族长寿家系血糖状况分析

目的:了解广西巴马地区壮族长寿家系血糖水平和血糖异常检出率情况。方法:随机抽取281个壮族长寿家系共1 973例进行空腹血糖测定,并将其结果与227个非长寿家系共1 575例的结果按年龄段和性别进行比较。结果:长寿家系的血糖总体水平,不管是男性或女性,均明显低于非长寿家系(P<0.05或P<0.01)。长寿家系和非长寿家系血糖水平均显示随年龄增大而呈升高的趋势(P<0.05或P<0.01);而长寿家系和非长寿家系之间的横向比较则显示,在30岁以后多数年龄段,非长寿家系的血糖水平比同年龄段的长寿家系高(P<0.05或P<0.01)。在血糖异常方面,长寿组和对照组总体之间的检出率虽无差异(P>0.05),但亦呈现随年龄增高而检出率升高的趋势,而且非长寿家系80岁以上高龄组的血糖异常检出率明显高于长寿家系(P<0.05或P<0.01)。结论:巴马壮族长寿家系对血糖水平的调控有明显优势,其深层的机制值得深究。

BDNF rs6265和COMT rs4680与广西壮族散发性帕金森病的相关性研究

目的:探讨脑源性神经营养因子(BDNF)rs6265和儿茶酚胺氧位甲基转移酶(COMT)rs4680的多态性与广西壮族散发性帕金森病(PD)的相关性。方法:使用PCR-RFLP法对112例壮族散发性PD患者的rs6265和rs4680位点进行基因分型,并与156例健康壮族老年人比较,分析这两个多态与PD的相关性。结果:除PD早发亚组rs6265基因型GG的频率高于同年龄段对照组(P<0.05),两组间的等位基因及基因型频率均无统计学差异(P>0.05)。两位点A等位基因罹患PD的风险与正常人群无异,OR分别为1.212(P=0.572)和0.985(P=0.427)。结论:rs6265和rs4680与广西壮族散发性PD的遗传易感缺乏关联性。

巴马地区壮族长寿家系血压水平及高血压患病率调查

目的:了解广西巴马地区壮族长寿家系血压水平和高血压患病率状况。方法:对巴马地区壮族长寿家系1 362位家庭成员进行血压水平、体重、身高、体重指数等测定,并统计高血压患病率,然后与当地非长寿家系597人、其它地区长寿家系282人及非长寿家系725人的结果分别按家系、年龄段和性别进行比较。结果:巴马地区长寿家系的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和高血压患病率与本地区非长寿家系无明显差异(P>0.05),但均高于对照地区的长寿家系和非长寿家系人群(均P<0.01),而且其男性和女性的SBP、DBP水平和高血压患病率均明显高于对照地区(均P<0.01);男性的DBP水平和患病率均明显高于同家系女性(均P<0.01),但SBP无明显区别(P>0.05)。年龄段比较显示,两地区长寿家系和非长寿家系的SBP水平、DBP水平和高血压患病率均随年龄增高而呈现升高的趋势;除80～岁等少数年龄段外,巴马地区长寿家系其它年龄段的SBP水平和高血压患病率均明显高于对照地区。结论:巴马地区壮族长寿家系的血压水平和高血压患病率较高,可能与饮食习惯和饮食结构的改变有关,其深层的机制有待进一步研究。

广西壮族家系口腔黏膜细胞端粒长度的遗传模式

目的探讨广西地区壮族家系口腔黏膜脱落上皮细胞染色体端粒长度的遗传模式。方法应用荧光定量PCR方法测定广西地区壮族家系口腔黏膜细胞相对端粒长度(TL),并进行家系内各代之间TL的相关性分析。结果 (1)口腔黏膜脱落上皮细胞染色体TL随年龄增大而缩短,即与年龄呈负相关(P<0.05);(2)男性TL明显长于女性TL(P<0.05);(3)TL的遗传度为70%,即家系中第一代TL对其子女TL的贡献为70%;(4)家系中第二代男性的TL同时呈现母系和父系遗传模式;女性的TL只显示母系遗传。结论广西地区壮族家系子代的口腔黏膜细胞TL明显受亲代TL的影响,呈现明显的父系及母系遗传模式。

长寿家系的白细胞端粒长度

目的探讨长寿家系血液白细胞的端粒长度与人类衰老/长寿的关系。方法采用real-time PCR方法对广西巴马地区长寿家系(BLF,n=1 301)群体外周血白细胞进行相对端粒长度(LTL)的测定,并与同地区非长寿家系(BNLF,n=283)及外地区(广西平果地区)长寿家系(PLF,n=308)、非长寿家系(PNLF,n=482)进行比较。结果 (1)在整体人群及各家系人群中,LTL均与年龄呈负相关;(2)在BLF中,LTL在各年龄段均无性别差异(P>0.05),其他对照家系除个别年龄段外,也呈现类似的趋势;(3)BLF 90~年龄段的LTL长于PLF(P=0.000);(4)BLF 65~年龄段(近似于长寿老人的第一胎子女)的LTL长于BNLF(P=0.000)、PLF(P=0.011)及PNLF(P=0.021)三个对照家系,BLF 90~高龄段的LTL与三个对照家系65~年龄段的水平相当。结论长寿家系LTL明显长于普通家系,存在一定的遗传倾向。

广西巴马地区壮族家系白细胞端粒长度遗传模式

目的探讨广西巴马地区壮族家系血液白细胞端粒长度的遗传模式。方法应用real-time PCR方法测定广西巴马地区壮族家系外周血白细胞相对端粒长度(LTL),并进行家系内子代LTL与其父代LTL的相关性分析。结果 (1)LTL随年龄增大而缩短,即与年龄呈负相关性;(2)子代群体中,女性LTL明显长于男性(P<0.05);(3)家系中第二代即子代LTL同时呈现母系和父系遗传模式。结论广西巴马地区壮族家系子代LTL明显受亲代LTL的影响,呈现明显的母系及父系遗传模式。