茯苓多糖对癫痫大鼠海马神经细胞凋亡及Nrf2ARE信号通路的影响

目的 探讨茯苓多糖(PPC)对癫痫大鼠海马神经细胞凋亡的影响及可能的作用机制。方法 将SD大鼠分为NC组、Model组、茯苓多糖、中、高低剂量组(PPC-L组,50 mg/kg;PPC-M组,100 mg/kg;PPC-H组,200 mg/kg),每组12只。除NC组外,其他组均需构建癫痫大鼠模型。建模成功后,给药处理,1次/d,连续14 d。比较5组大鼠癫痫发作潜伏期的差异;通过Morris水迷宫实验检测各组大鼠逃避潜伏期、穿越平台次数;超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒分别检测海马组织中CAT、SOD、GSH水平;TUNEL染色检测神经细胞凋亡;western blot检测大鼠海马组织中活化的Caspase-3(Cleaved-Caspase-3)、Bax、核因子E2相关因子2 (Nrf2)、血红素氧化酶(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO-1)蛋白表达。结果 与NC组比较,Model组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马组织中SOD、CAT、GSH水平及Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白表达水平显著降低,神经细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与Model组比较,PPC-L组、PPC-M组、PPC-H组大鼠癫痫发作潜伏期延长,逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,海马组织中SOD、CAT、GSH水平及Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白表达明显升高,神经细胞凋亡率、Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 PPC可抑制氧化应激,减少神经细胞凋亡,发挥抗癫痫作用,该机制可能与激活Nrf2/ARE信号通路有关。

lncRNA-BC200调控Aβ_(25-35)诱导的神经细胞PC12炎症因子表达和细胞凋亡

目的探讨lncRNA-BC200对Aβ_(25-35)诱导的神经细胞炎症和细胞凋亡的影响及可能机制。方法将神经细胞PC12分为正常对照组(细胞常规培养)和10、20、40μmol/L Aβ_(25-35)组(分别用10、20、40μmol/L Aβ_(25-35)干预细胞24 h),流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR法检测细胞中lncRNA-BC200表达。将PC12细胞分为正常对照组、Aβ_(25-35)组(用20μmol/L Aβ_(25-35)干预PC12细胞24 h)、si-NC+Aβ_(25-35)组(用20μmol/L Aβ_(25-35)干预转染si-NC的PC12细胞24 h)、si-lncRNA-BC200+Aβ_(25-35)组(用20μmol/L Aβ_(25-35)干预转染si-lncRNA-BC200的PC12细胞24 h)和TNF-α+si-lncRNA-BC200+Aβ_(25-35)组[用20μmol/L Aβ_(25-35)和20μg/L肿瘤坏死因子α(TNF-α)共同干预转染si-lncRNA-BC200的PC12细胞24 h],流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中TNF-α、白细胞介素6(IL-6)和γ干扰素(IFN-γ)表达,Western blot检测细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达。结果10、20、40μmol/L Aβ_(25-35)组PC12细胞凋亡率和lncRNA-BC200表达均高于正常对照组。Aβ_(25-35)组细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达,以及TNF-α、IL-6和IFN-γ水平均高于正常对照组。si-lncRNABC200+Aβ_(25-35)组PC12细胞凋亡率和细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达及TNF-α、IL-6和IFN-γ水平均低于Aβ_(25-35)组。TNF-α+si-lncRNA-BC200+Aβ_(25-35)组PC12细胞凋亡率和细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达及TNF-α、IL-6和IFN-γ水平均高于si-lncRNA-BC200+Aβ_(25-35)组。结论敲减lncRNA-BC200可能通过抑制NF-κB信号通路的激活减少Aβ_(25-35)诱导的神经细胞PC12分泌炎症因子及细胞凋亡。

帕金森病的研究进展

帕金森病是一种常见的神经退行性疾病,随时间的延长,疾病逐渐加重,临床表现具有较高的特异性。帕金森病的发生是由多病因多因素相互作用,导致多巴胺能神经元变性缺失形成,其病因及发病机制迄今尚未明确,也局限了对帕金森病的有效治疗。现就近年来国内外对帕金森病的流行病学、发病机制及治疗进展作一综述。

Ataxin-3(MJDtr-Q84)对PINK1(CG4523)突变帕金森转基因果蝇的保护作用

目的探讨突变型ataxin-3(MJDtr-Q84)对PINK1(CG4523)突变帕金森转基因果蝇表型的影响及其机制。方法选用MHC-GAL4肌肉启动子,运用遗传学方法,构建正常组(W1118/y; MHCGAL4/+)、PD疾病模型组(PINK1^(B9)/y; MHC-GAL4/+)、ataxin-3干预组(PINK1^(B9)/y; MJDtr-Q84/MHCGAL4),记录各组果蝇表型特征。通过电镜观察线粒体形态结构,ATP试剂盒检测各组ATP含量,应用实时荧光定量PCR技术检测ND42转录水平,蛋白免疫印迹western blot检测NDUFS3蛋白表达量。结果与正常野生型果蝇比较,PD疾病模型组果蝇翅膀发育异常,飞行能力差,线粒体形态结构改变,ATP产量降低,ND42 mRNA和NDUFS3蛋白表达量均下调。利用ataxin-3(MJDtr-Q84)干预PD组果蝇后,明显保护其翅膀形态及飞行能力,并恢复线粒体线粒体形态及功能。结论 Ataxin-3(MJDtr-Q84)对PINK1(CG4523)突变PD转基因果蝇模型具有保护作用,该保护作用与线粒体功能有关,为帕金森病的治疗提供实验基础和新的研究方向。

线粒体功能障碍与帕金森病的研究进展

帕金森病是一种常见的神经退行性疾病,其病理特征为黑质纹状体多巴胺能神经元变性缺失和路易小体形成,目前PD的病因和发病机制仍未明确。已知在神经毒素诱导的PD模型中,发现线粒体形态结构紊乱、功能受损,线粒体氧化呼吸链复合物I活性降低,因此,线粒体功能障碍可能是导致多巴胺能神经元变性缺失的一个重要诱因。笔者就线粒体功能障碍与帕金森病的相互关系作一综述。