EV71感染横纹肌肉瘤细胞与MAPK信号通路分子基因差异表达的相关性

目的探讨肠道病毒71型(EV71)感染横纹肌肉瘤(RD)细胞后丝裂原活化蛋白激酶(MARK)信号通路分子的变化及作用机制。方法按感染复数(MOI)=5的病毒量感染RD细胞,用台盼蓝染色观察不同时间的细胞存活率,annexin V-FITC/PI染色法检测凋亡细胞形态学变化,ELISA法检测感染后不同时间细胞因子(IL-4、IL-10和TNF-α)水平变化,PCR芯片技术检测感染后8 h和12 h MAPK信号通路相关基因的差异表达情况。结果台盼蓝染色结果显示,RD细胞存活率随EV71感染时间延长明显下降,感染组IL-4、IL-10和TNF-α浓度随感染时间延长明显增加,与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。EV71感染RD细胞8 h时,88种MAPK相关基因中,FOS、JUN分别上调3.34和3.19倍,而IL-1A、IL-1B、MAP2K3、IRAK1、NGF、IL-4、MAP3K1、MAP3K10、MAP3K11、MAP3K14、MAPK3下调2～5倍。EV71感染RD细胞20 h时,ELK1、FGF1、FOS、JUN、IRAK1、NGF、IL4、MAP3K1、MAP3K10、MAP3K11、MAP3K14、MAPK3、PIK3CG、STAT1和TNF明显上调。结论 EV71感染激活RD细胞MAPK信号通路,产生炎症细胞因子,与细胞凋亡有关。

血栓弹力图在肺癌术后致深静脉血栓的应用

目的：探讨血栓弹力图（Thromboelasto Gram，TEG）在肺癌患者术后致深静脉血栓（Deep Vein Thrombosis，DVT）中的应用价值。方法：选择肺癌手术患者28例，分为深静脉血栓组11例和非静脉血栓（UDVT）组17例，分别于术前（T0）、术中3h（T1）、术后第1天（T2）、术后第3天（T3）采集中心静脉血液标本，检测凝血四项指标和血栓弹力描记图（TEG）。另选20例健康人为对照组。结果：在凝血常规检测中发现，肺癌组和对照组除PT值外其他差异均无统计学意义。TEG结果显示，与正常对照组相比，DVT及UDVT患者术前R值均明显缩短（P〈0.05）；与T0比较，UDVT患者T1时间点R值和K值均延长（P〈0.05），MA值减小（P〈0.05）；UDVT患者与DVT患者相比在T1时间点R、K延长，MA值减小，差异有统计学意义（P〈0.05），T2及T3时间点MA值减小，两组之间差异有统计学意义（P〈0.05）；纤溶指数LY30在T1、T2及T3时间点与T0比较以及同时间点与DVT组比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：肺癌患者术前体内存在病理性高凝状态，根据TEG参数数值高低可判断术后发生DVT的风险。

肠道病毒71型体外感染人树突状细胞后启动免疫应答反应的研究

目的研究肠道病毒71型（EV71）体外感染人树突状细胞（DCs）后启动免疫应答反应的机制，为探讨EV71感染及宿主免疫应答提供理论依据。方法健康成人外周血单核细胞诱导衍生获得DCs，流式细胞术检测病毒感染前后DCs表面分子，PCR芯片分析DCs感染EV712h和8h后CD分子及细胞因子类基因差异表达，Luminex液相芯片技术检测感染组细胞上清液中细胞因子含量，混合淋巴细胞反应（MLR）检测病毒感染后的DCs对初始T细胞的刺激活性。结果EV71感染刺激后DCs的CD80和CD83表达率分别提高了8．2％和35．4％。PCR芯片显示EV71感染2h和8h后CD80、CD83、IL-1α、IL-6和ICAM-1基因表达显著上调2．08～5．49倍，而IL-18则下调5．12倍。与对照组相比，EV71感染Des组细胞上清液中IL-6和IL-12的含量明显升高（P〈0．05）。而MLR未观察到EV71感染的DCs刺激初始T细胞增殖现象。结论EV71感染能增加DCs活力，延长其存活时间，促使其活化、成熟并分泌细胞因子，启动宿主细胞相应的免疫应答。

浆细胞样树突状细胞在抗病毒感染中作用研究进展

树突状细胞（dendritic cells，DCs）是最先在小鼠淋巴器官中发现的一种独立的细胞类型。作为目前所知的体内功能最强的抗原提呈细胞（antigen pres-entingcell，APC），DCs是连接固有免疫和适应性免疫的桥梁，其主要功能是摄取、加工处理和提呈抗原，启动适应性免疫应答。

肠道病毒71型感染人横纹肌肉瘤细胞不同时期凋亡相关基因差异表达研究

目的研究肠道病毒71型（EV71）感染人横纹肌肉瘤（RD）细胞后不同时期凋亡相关基因差异表达及信号通路转导机制。方法锥虫蓝染色观察EV71感染RD细胞的存活率，AnnexinV．FITC／PI双染色法检测病毒感染后凋亡细胞形态学及凋亡发生率，PCR芯片分析病毒感染RD细胞8h和20h后88个凋亡相关基因的表达情况。结果EV71（MOI=5）感染RD细胞8h后存活率显著下降。流式细胞仪检测显示病毒感染20h后早期凋亡及晚期凋亡细胞分别上升至18．0％和19．1％。PCR芯片检测88个凋亡相关基因，EV71感染8h后，除IFN-B1上调5．22倍外，ACIN1、Akt、Apaf1、caspase、CIDEB等47个基因发生明显下调。病毒感染20h后，FasL、CIMOL、TNF、caspase-10、caspase-3等28个基因发生2倍以上上调。结论EV71感染早期RD细胞凋亡相关基因表达下调与病毒凋亡抑制效应相关，而感染晚期病毒可激活Fas／FasL、TNF／TNFR死亡受体信号通路诱导细胞凋亡。同时宿主细胞也通过调节CIM0／CIMOL、NF—KB／RelA、P13K／Akt等信号通路途径抑制凋亡作用。