视网膜Müller细胞原代培养的技术研究

目的介绍一种新的视网膜Ｍüｌｅｒ细胞条件化原代培养的方法。方法使用ＣｏｎＡ活化脾细胞培养上清液作为条件化培养基，分别培养人、大鼠、小鼠的视网膜Ｍüｌｅｒ细胞，并进行形态学观察及免疫组织化学染色。结果用该方法原代培养不同种类的视网膜Ｍüｌｅｒ细胞，免疫组织化学染色显示９０％以上的视网膜Ｍüｌｅｒ细胞的神经胶质纤维酸性蛋白（ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＡＰ）和Ｓ－１００蛋白染色阳性。结论视网膜Ｍüｌｅｒ细胞的条件化原代培养是一种可靠的、快速获得不同种类视网膜Ｍüｌｅｒ细胞的理想方法。

接种于眼内腔可溶性抗原的释放和存留模式

目的 确立前房和玻璃体腔接种可溶性抗原后,其抗原释放和局部存留的模式。方法 分别将99mTc和125I标记的人血清白蛋白接种于兔眼前房和玻璃体腔。使用SPECT和放射免疫测定技术检测标记抗原在眼内腔短期和长期的存留和释放模式。结果 接种于眼内腔的99mTc标记抗原,在短时间内部分进入血流,大部分存留于眼内腔。接种于前房的125I标记抗原在7～11天后外周血达到高峰,34～36天消失。接种于玻璃体腔的125I标记抗原在17～24天后达到高峰,60～65天消失。结论 眼内腔对抗原的储集及其缓慢的释放模式,为眼免疫偏离的诱导提供了必要的条件。

儿童细菌性眼内炎的治疗

采用玻璃体切除和玻璃体内注射抗生素，治疗３０例儿童细菌性眼内炎。结果：治疗的效果与治疗时机、细菌毒力的大小、眼外伤的程度等因素有直接关系，细菌培养结果：７０％为球菌感染，３０％为杆菌感染，且８０％的细菌用庆大霉素治疗有效。提出玻璃体切除联合玻璃体内注射抗生素是治疗儿童细菌性眼内炎的首选方法。

破坏视网膜Muller细胞对眼免疫赦免的影响

目的探讨视网膜Muller细胞在眼免疫赦免诱导和维持中的作用。方法在Wistar大鼠和新西兰白兔的右眼玻璃体腔接种Muller细胞的特异性破坏剂L－α－氨基已二酸（L－α－AAA）和10g·L1牛血清白蛋白。不同时间分别摘除接种眼，进行透射电镜检查。动物模型建立1wk后，进行DTH的诱导和测量。结果玻璃体腔接种L－α－AAA4h，视网膜Muller细胞肿胀、电子密度降低；12h以上病变加重；48h以上病变减轻；72h恢复正常。玻璃体腔接种L－α－AAA和抗原组的动物DTH反应均呈阴性。非玻璃体腔抗原接种组动物均呈阳性反应。结论在短时间内、单一的破坏视网膜Muller细胞，并不能造成眼免疫赦免状态的削弱或破坏。眼免疫赦免是一多因素、多机制的免疫调节过程，各因素之间具有相互叠加和相互补偿的作用。

外伤性眼内炎对眼免疫赦免状态的影响

目的研究外伤后眼内炎症对眼免疫赦免状态的影响。方法在Ｗｉｓｔａｒ大鼠和新西兰白兔建立外伤性眼内炎模型。将牛血清白蛋白分别接种于受伤眼和正常眼玻璃体腔。接受附加佐剂的牛血清白蛋白免疫方案１周后，评价其诱导玻璃体腔相关免疫偏离的能力，并观察受伤眼组织病理学改变。结果眼外伤后５～７天发生中度到重度炎症反应。常规免疫组动物均出现抗原特异性迟发型超敏反应（ＤＴＨ）阳性；单纯玻璃体腔抗原接种组动物均显示ＤＴＨ阴性；受伤眼玻璃体腔抗原接种组和受伤眼玻璃体抗原接种后对侧正常眼玻璃体抗原接种组均显示ＤＴＨ阳性。结论外伤性眼内炎导致受伤眼和正常眼免疫偏离诱导的失败。眼相关免疫偏离的消失可能参与了交感性眼炎的发病过程。

中药有效成分作为新型粘膜疫苗佐剂的应用前景

中药有效成分对机体存在着普遍的免疫调节作用,可通过对非特异性免疫及特异性细胞免疫、体液免疫及细胞因子等的广泛影响而作用于粘膜免疫系统;结合新型人用粘膜疫苗发展的要求与中药自身的优势,指出其作为新型粘膜佐剂,具有十分良好的研发和应用前景。

后葡萄膜炎的临床鉴别诊断

后葡萄膜炎的类型繁多，脉络膜和视网膜的炎症相互影响，许多免疫性、感染性炎症和恶性肿瘤均可导致脉络膜和视网膜的病理性损伤，从而使后葡萄膜炎的临床诊断变得更加复杂。综合相关文献资料，对病因、病史、眼前后段体征以及全身性疾病相关体征的描述和讨论。

从Toll样受体探讨中药抗感染免疫作用机制

许多中药从整体水平发挥了显著的抗感染效应,然而,对于其提高机体抗感染免疫力的进一步作用机制,目前知之甚少。在中药既往研究成果的基础上,结合Toll样受体(Toll-like Receptor,TLR)理论,对二者的关系进行了初步探讨,指出中药提高机体抗感染免疫能力与TLR密切相关。这不仅对进一步深化中药抗感染药理认识具有重要理论价值,而且对提高感染性疾病的疗效和中药新药开发,更具有重要的现实意义。

CRISPR/Cas9系统在视网膜发育与遗传性视网膜疾病研究中的应用

CRISPR/Cas9系统作为第三代基因编辑工具的代表,操作简便、效率高、成本低,应用前景极其广阔。该系统能够对基因组中特定的核苷酸序列切割,尤其可用于纠正机体的异常基因突变。利用该系统不仅可阐述视网膜发育过程关键基因的调控功能,以及视网膜变性过程中相关信号通路改变的分子机制,更为重要的是运用该系统可修复异常的基因突变。本文主要论述CRISPR/Cas9系统在人类视网膜发育及遗传性视网膜变性疾病发病机制研究中的应用,以及在视网膜变性疾病患者个体化基因治疗方面的应用前景。

先天性眼球震颤眼外肌超微结构与脑血流动力学的研究

先天性眼球震颤眼外肌超微结构与脑血流动力学的研究彭广华，杨景存，杨波，牛广君，曹木荣，苏伟，吴怡丹（河南医科大学第一附属医院眼科郑州４５００５２河南医科大学第一附属医院神经外科郑州４５００５２河南医科大学第一附属医院核医学科郑州４５００５２河南省医学...

先天性眼球震颤脑血流SPECT断层显像

目的探索先天性眼球震颤（ＣＮ）的发病机理，了解其脑血流动力学的改变。方法应用单光子发射型计算机断层显像技术（ＳＰＥＣＴ），对２７例ＣＮ患者进行脑血流灌注显像及半定量分析。结果（１）跳动型ＣＮ：快相侧额叶皮质脑血流灌注量均减弱，慢相侧额叶脑血流灌注增强（占６６．６７％），其枕叶灌注量降低。（２）钟摆型ＣＮ：两侧额叶皮质脑血流灌注量均减少，皮质层变薄。结论提示ＣＮ患者大脑额叶、枕叶部分区域脑血流灌注异常，这可能造成该区神经功能不平衡，导致眼球运动中枢功能失调。

眼免疫赦免的两面性及其临床意义

眼的免疫赦免起因于眼自身对全身免疫反应诱导和表达的修饰。将抗原接种于眼前房可以诱导一种偏离形式的全身性免疫反应 ,称为前房相关免疫偏离 (ACAID)。ACAID的主要特征是 :( 1)抗原特异性迟发型超敏反应 (DTH)和补体结合性抗体反应的缺陷 ;( 2 )产生独特的调节性T细胞亚群。这种偏离式反应一方面保护了视力的完整性 ,免受诸如外伤、感染和炎症反应的持续性威胁 ;另一方面 ,也赋予了眼易发诸如肿瘤持续性生长和疱疹病毒感染后急性视网膜坏死的危险性。

中药生液散和蝉花五味散配合西药治疗外伤性低眼压

中药生液散和蝉花五味散配合西药治疗外伤性低眼压河南医科大学第一附属医院眼科彭广华河南省新华一厂医务所张黎外伤性低眼压是眼外伤的一种常见并发症严重影响视功能，治疗困难，日久易造成眼球萎缩，目前是眼科治疗中一个棘手问题。关于外伤性低眼压的治疗效果的评价，...

先天性眼球震颤脑血流速度的测定

目的：探讨先天性眼球震颤的发病机理，了解其脑血流速度的变化。 方法应用彩色经颅多普勒超声诊断技术，对５０例先天性眼球震颤患者进行脑血流速度的检测。 结果患者的大脑中动脉、大脑前动脉血流速度呈单侧性增高，双侧大脑后动脉血流速度较正常人低（Ｐ＜０．０５）。 结论先天性眼球震颤患者大脑两侧血流速度不均衡，可能是造成该区神经功能不平衡、导致眼球运动功能失调的主要原因之一。

视网膜下腔接种视网膜S抗原诱导的免疫偏离(英文)

目的 确立视网膜下腔是否具有支持针对视网膜可溶性抗原（Ｓ 抗原） 刺激诱导偏离式免疫反应的能力，并观察白细胞介素１（ＩＬ１） 对视网膜下腔免疫特性的影响。方法 将视网膜Ｓ 抗原接种于Ｗｉｓｔａｒ 大鼠的眼前房和视网膜下腔。抗原接种后７ 天，使用Ｓ 抗原和完全福氏佐剂免疫受主动物。然后，通过足部刺激评估迟发型超敏反应（ ＤＴＨ） 。通过腹腔注射ＩＬ１ 改变全身的免疫状态。结果 前房和视网膜下腔注射Ｓ 抗原的动物没有发生抗原特异性ＤＴＨ。与此相反，当全身给予ＩＬ１ 时，前房和视网膜下腔接种Ｓ 抗原的动物则激发了剧烈的ＤＴＨ。结论 视网膜下腔具有通过抑制抗原特异性ＤＴＨ 支持针对可溶性抗原的免疫偏离的诱导能力。全身使用外源性ＩＬ１

眼免疫赦免的细胞和分子基础

眼的免疫赦免是一极其复杂和动态的免疫调节过程。这一机制是眼生物进化过程的一种生理适应，对于维持视觉器官的完整性、免受免疫性炎症反应的破坏，以及为眼组织移植提供适宜的微环境起着重要的作用。就眼免疫赦免和前房相关免疫偏离（ＡＣＡＩＤ）中的眼局部因素、维持眼免疫赦免的细胞和分子基础等问题进行了讨论。

视网膜下腔相关的免疫偏离

目的 确立视网膜下腔是否具有支持针对视网膜可溶性抗原 (S抗原 )刺激诱导偏离式免疫反应的能力。方法 将视网膜 S抗原接种于 Wistar大鼠的眼前房和视网膜下腔。抗原接种后 7d,使用 S抗原和完全福氏佐剂免疫受主动物。然后 ,通过足部刺激评估迟发型超敏反应 (DTH)。结果 前房和视网膜下腔注射 S抗原的动物没有发生抗原特异性 DTH。与此相反 ,而未预先进行前房和视网膜下腔抗原接种组动物和结膜下 S抗原接种组动物则诱发了剧烈的 DTH。结论 视网膜下腔针对可溶性抗原具有诱导免疫偏离的能力。

2 430例儿童眼病临床特征分析

目的：探讨解放军总医院住院儿童眼病的病种、好发年龄段、性别比例等问题,为儿童眼病的预防和治疗提供临床依据。方法：选择1993-2014年收治的0~14岁儿童眼病患者2 430例,对相关因素进行分析。结果：共统计患儿2 430例,男女比例2.14∶1。眼外伤患者中男性明显多于女性,男女比例为3.7∶1,8~11岁为发病高峰期。0~7岁儿童先天性眼病发病率较高,以先天性白内障、先天性上睑下垂多见。斜视、弱视、屈光不正及眼底病主要集中在7~14岁年龄段,并以间歇性外斜视及孔源性视网膜脱离为主。眼部肿瘤中以角膜皮样瘤和视网膜母细胞瘤为主,好发年龄为1~6岁。结论：重视儿童眼病,定期行儿童眼科检查,及早治疗原发病,根据不同年龄段,预防儿童眼病的发生,保护儿童视功能的发育。

402例儿童眼外伤临床因素分析

目的探讨儿童眼外伤发生的时间、年龄、致伤原因及预后视力,为预防儿童眼外伤及伤后救治提供依据。方法选择我院2004—2014年收治的0～18岁眼外伤患者402例,对相关因素进行分析。结果 402例中男女比例为4.43∶1,各年龄段男性人数均高于女性;开放性眼外伤发生率较大(40.05%);主要的致伤原因为异物伤,其中常见物品致伤占61.41%;收治高峰出现在12月～3月;入院后患者视力无改善者占49.0%(265人次)。结论儿童眼外伤伤情较重,预后不佳。

干眼患者眼表宏基因组研究

目的通过比较干眼患者和健康受试者眼表宏基因组的异同探讨眼表微生物组的改变在干眼发病机制中的作用。方法在解放军总医院眼科和中山大学中山眼科中心收集干眼患者20例及健康受试者90名。对所有受试者双眼进行结膜印迹细胞样本采集,提取核酸后进行宏基因组测序。通过计算Shannon指数比较两者微生物群落α多样性的差异;对两者微生物种群的相对丰度及代谢途径进行生物信息学分析。并对微生物中的抗生素抗性基因进行比对。结果干眼患者眼表微生物的α多样性与健康受试者相比差异无统计学意义(P=0.13)。干眼患者眼表15种微生物的相对丰度较高,健康受试者10种微生物的相对丰度较高,且在代谢途径上存在着差异。干眼患者眼表微生物中的抗生素抗性基因明显多于健康受试者。结论虽然干眼患者眼表微生物的多样性与健康受试者相似,但某些特定微生物种群的相对丰度及代谢途径存在特征性的改变,表明这些特定的微生物种群可能与干眼的发病机制有关。