糖尿病合并慢性肾脏病诊疗的现状和进展

目前全球糖尿病患病人数不断攀升,糖尿病相关的并发症如糖尿病肾脏病的患病率也随之增加,给个人、家庭、社会以及国家带来了沉重的经济负担。糖尿病合并慢性肾脏病(CKD)包括糖尿病肾脏病和其他原因引起的CKD,人们对CKD的认识率较低,对糖尿病合并CKD也缺乏合理的评估。糖尿病合并CKD的治疗主要是干预各种危险因素。临床诊断的糖尿病肾脏病可能并非由糖尿病所导致,一部分非糖尿病肾脏病也可能被误诊为糖尿病肾脏病,而没有得到正确的治疗。本综述旨在讨论糖尿病合并CKD患者在评估、诊断及治疗方面的现状和进展,并对未来研究的方向进行展望。

卡托普利对博莱霉素致小鼠肺纤维化的防治作用及其机制探讨

目的研究血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利对博莱霉素致小鼠肺纤维化的防治作用。方法7～10周龄雄性ICR小鼠45只分3组,分别为模型组、卡托普利组与正常对照组。模型组与卡托普利组经尾静脉注射博莱霉素10mg/(kg·d)14d建立稳定的肺间质纤维化模型,卡托普利治疗组于注射博莱霉素前24h予卡托普利(12.5mg/kg·d)灌胃,并与正常ICR小鼠进行对照。第28天收获肺组织,左肺行HE和Masson染色,右肺组织应用Real-time PCR检测CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGFβ1及结缔组织生长因子CTGF mRNA表达,行Western-blot检测CTGF蛋白表达。结果卡托普利治疗组与模型组比较,小鼠肺泡炎、纤维化程度有所改善,但无统计学意义。卡托普利能显著下调模型组肺组织中升高的CollagenⅠ、TGFβ1的mRNA水平及CTGF的mRNA与蛋白水平,但Collagen Ⅲ的mRNA水平并无明显改变。结论卡托普利有减轻BLM诱导的肺泡炎及肺纤维化程度的趋势,提示卡托普利有一定的抗肺间质纤维化作用;抑制TGF-β1及CTGF在肺组织中的表达,可能是其作用机制之一。

从OSCE考试成绩看临床医学五、八年制医学生临床技能

目的:通过OSCE成绩评价临床医学五、八年制医学生临床能力。方法:选取中南大学湘雅医学院2008级五年制临床医学生,2006级八年制临床医学生为研究对象,分析两组学生OSCE成绩资料。结果:五、八年制学生在临床技能考核方面均较为合格,八年制学生在体格检查和文献检索方面表现突出。结论:五年制须更注重临床实践、文献检索能力培养;八年制则需寻求更多突破。

动态观察依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1,CTGF,Smad7和α-SMA的影响

目的:动态观察血管紧张素转换酶抑制剂依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、Smad7和平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达的影响,探讨依那普利对肾小管上皮细胞转分化的影响。方法:雄性SD大鼠64只,采用单侧输尿管梗阻模型,将实验大鼠分为假手术组(16只)、模型组(24只)和治疗组(24只),治疗组从造模前24h开始以依那普利10mg/(kg.d)灌胃。分别于造模后3,7,14,21d取梗阻侧肾组织进行HE染色,观察肾脏组织病理结构变化,并进行肾间质损伤指数评分;应用real-timePCR法检测肾组织TGF-β1和CTGFmRNA的表达,应用Western免疫印迹检测肾组织α-SMA,Smad7和CTGF蛋白的表达。结果:随着梗阻时间的延长,单侧输尿管梗阻模型鼠肾间质损伤指数评分逐渐增加。TGF-β1和CTGFmRNA以及α-SMA和CTGF蛋白表达逐渐增加,Smad7蛋白表达逐渐减少。依那普利治疗后,肾间质损伤指数下降,TGF-β1和CTGFmRNA以及α-SMA和CTGF蛋白表达较模型组降低,Smad7蛋白表达较模型组增加,依那普利对各时间点TGF-β1mRNA的表达均有明显的下调作用,对CTGFmRNA,α-SMA,CTGF和Smad7蛋白对以单侧输尿管梗阻术后3,7,14d作用最明显。结论:依那普利可减轻梗阻肾间质纤维化,以单侧输尿管梗阻后14d内效果最好,这一作用可能与抑制肾组织TGF-β1,CTGF和α-SMA的表达,增加肾组织Smad7的表达有关。

中南大学湘雅医院血液透析患者血管通路现状

目的:了解血液透析患者的血管通路现状。方法:回顾性分析中南大学湘雅医院血液透析中心2015年4月1日至2016年4月1日新导入及维持性血液透析患者的基本资料、血管通路选择和并发症。结果:维持性血液透析患者258例,采用自体动静脉内瘘(artetiovenous fistula,AVF)的患者占87.60%、带涤纶套带隧道导管占12.40%。新导入患者61例,首次透析采用无隧道无涤纶套导管的患者占80.33%,AVF占8.19%,带涤纶套带隧道导管占9.84%,动静脉穿刺占1.64%。AVF选择吻合血管依次为腕桡动脉-头静脉(76.55%)、肱动脉-头静脉(11.06%)、前臂中段桡动脉-头静脉(7.08%)、肱动脉-肘正中静脉和肱动脉-贵要静脉(5.31%)。AVF发生并发症占总AVF透析人数的34.07%,其中动脉瘤占24.34%。结论:维持性血液透析患者绝大多数采用AVF,而新导入透析患者中使用无隧道无涤纶套导管者比例较大。

不同剂量博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的差异及动态变化

目的探讨博来霉素诱导小鼠肺纤维化最佳剂量和方法。方法 126只8周龄雄性ICR小鼠,随机分成一次性大剂量模型和多次小剂量模型。一次性大剂量模型分为200 mg/(kg.bw)BLM组、150 mg/(kg.bw)BLM组、100 mg/(kg.bw)BLM组及阴性对照组(DN组),每组18只,分别经尾静脉一次性注射BLM 200、150、100mg/(kg.bw)及生理盐水10 mL/(kg.bw),各组分别于第7、14、21天各处死6只。多次小剂量模型分为每日10 mg/(kg.bw)BLM组及阴性对照组(N组),分别经尾静脉注射BLM 10 mg/(kg.bw)及生理盐水10 mL/(kg.bw),每天1次,连续注射14 d,两组分别于第14、21、28天各处死6只。留取肺组织,观察肺组织病理改变,检测Ⅲ型胶原的含量,观察小鼠体重及生存率。结果①在一次性大剂量模型中,BLM各剂量组肺泡炎症评分及肺纤维化评分与正常组相比,除100 mg/(kg.bw)BLM组和150 mg/(kg.bw)BLM组在第7天的模型差异无显著性外(P>0.05),其余各组差异均有显著性(P<0.05);各个剂量组Ⅲ型胶原的表达面积与正常组相比,除100 mg/(kg.bw)BLM组在第7天的模型差异无显著性外(P>0.05),其余各组均较正常组高(P<0.05),各个剂量组分别在第21天达到高峰,以200 mg/(kg.bw)BLM组第21天组Ⅲ型胶原的表达面积最高;该模型小鼠各剂量组死亡率为0。②在多次小剂量模型中,各组的肺泡炎症与肺纤维化程度与正常组相比差异均有显著性(P<0.05);各组Ⅲ型胶原的表达也均高于正常组(P<0.05),且随着时间的延长呈进行性增加,在第28天达到高峰;该模型小鼠共死亡11只,死亡率为30.56%。结论在本实验中,以尾静脉一次性注射BLM 200 mg/(kg.bw)后第21天诱导建立的ICR小鼠肺纤维化模型成模最好,其小鼠死亡率低,操作简单,有效安全方便的特点使之有希望成为一种复制肺纤维化的理想模型。

氯沙坦通过ERK1/2 MAPK途径抑制高糖诱导小鼠系膜细胞CTGF表达

目的:研究高糖环境下,氯沙坦对CTGF的影响以及其作用机制。方法:体外培养小鼠系膜细胞株(MMCs),用高糖(25mmol/L葡萄糖)刺激细胞分别作用24h、48h、72h,用Western blot方法检测磷酸化ERK1/2的表达。再将细胞分为低糖组(5.6mmol/L葡萄糖),山梨醇组(5.6mmol/L葡萄糖+19.4mmol/L山梨醇),高糖组(25mmol/L葡萄糖),氯沙坦组(25mmol/L葡萄糖+10-5mol/L氯沙坦)以及ERK抑制剂组(25mmol/L葡萄糖+25μmol/LPD98059),48h后采用Western blot方法检测磷酸化ERK1/2的表达,72h后采用Real-timePCR方法及Westernblot分别检测CTGFmRNA表达量以及蛋白的表达。结果:高糖刺激小鼠系膜细胞后,ERK1/2磷酸化的蛋白表达逐渐增高,呈现一定时间依赖性。与低糖组相比,高糖组磷酸化ERK1/2、CTGF的蛋白表达明显增加(P<0.01),而与高糖组相比,氯沙坦组以及ERK抑制剂组磷酸化ERK1/2的蛋白表达以及CTGF的蛋白均明显下降有统计学意义(P<0.05)。与低糖组相比,高糖组CTGF mRNA表达量明显增加(P<0.01),而与高糖组相比,氯沙坦组以及ERK抑制剂组CTGF mRNA表达量明显下降,且有统计学意义(P<0.01)。结论:氯沙坦可抑制高糖对CTGF的诱导作用,其机制可能与抑制ERK1/2MAPK途径有关。

小剂量多次尾静脉注射与气管内滴注博来霉素致小鼠肺纤维化模型的比较研究

目的:与单剂量气管内滴药模型比较,研究小剂量多次尾静脉注射博莱霉素(bleomycin,BLM)致小鼠肺纤维化的特点与差异。方法:40只雄性ICR(Institute for Cancer Research)小鼠随机分为模型组I、模型组II和两个对照组,每组10只。模型组I尾静脉注射10 mg/kg BLM均持续14 d;模型组II于实验第一天气管内注入5 mg/kg BLM,两对照组分别给与等量生理盐水,28 d后处死并收集肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)。检测BALF细胞总数及蛋白含量、肺系数、羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP),观察肺组织病理改变。结果:1)两种给药方法均能使肺组织发生明显的炎性和纤维化反应,两模型组BALF细胞总数及蛋白含量、肺系数、HYP含量、肺间质损伤指数较两对照组均显著增加(P﹤0.01);2)模型组I病灶主要分布在胸膜下及血管周围,模型组II则主要分布在支气管和细支气管周围;3)模型组II病死率高于模型组I;4)模型组II BALF蛋白含量高于模型组I(P<0.05);BALF细胞总数、肺系数、HYP含量、肺间质损伤指数两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:小剂量多次尾静脉注射与气管内滴入BLM都能成功制备肺间质纤维化动物模型,但两者纤维化形成的部位存在着一定的差异,小剂量多次尾静脉给药肺间质纤维化模型更接近特发性肺间质纤维化。

氟非尼酮抗器官纤维化的作用及机制

器官纤维化可发生于不同的组织器官,其发病率高、危害性大,尚缺乏有效的治疗药物。近年发现的新型抗纤维化小分子化合物——氟非尼酮,为纤维化疾病的治疗带来了希望。氟非尼酮可以通过抗炎症反应、抗氧化应激、抗细胞凋亡、抑制肌成纤维细胞的活化与增殖、促进细胞外基质降解及调节信号转导等多种途径,起到抗器官纤维化的作用,明显减轻肾、肝及肺的纤维化程度。

二甲双胍对顺铂诱导急性肾损伤大鼠的治疗作用

目的:二甲双胍对急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的治疗作用尚不明确,本研究采用顺铂诱导的AKI大鼠作为实验模型,给予二甲双胍药物干预,探索二甲双胍对AKI大鼠的治疗作用,并初步探索其作用机制。方法:18只雄性SD大鼠适应性喂养1周后,将其随机分为正常对照组、模型组及二甲双胍治疗组,每组6只。模型组和二甲双胍治疗组大鼠采用腹腔注射顺铂(8 mg/kg)的方法建立AKI模型。二甲双胍治疗组大鼠在造模前48 h开始给予200 mg/(kg·d)的二甲双胍灌胃,正常对照组及模型组大鼠用等体积的羧甲基纤维素钠灌胃,连续给药9 d。最后一次灌胃给药后,留取大鼠24 h尿液,检测中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)水平;取大鼠血液以检测肾功能;行肾组织切片HE染色后评估肾小管损伤程度;采用TUNEL法评估肾小管上皮细胞凋亡情况。结果:与正常对照组相比,模型组血尿素、血肌酐、尿NGAL水平明显升高(均P<0.05),肾小管损伤程度评分和肾小管上皮细胞凋亡数量明显增加(均P<0.05);与模型组相比,二甲双胍治疗组血尿素、血肌酐、尿NGAL水平明显降低(均P<0.05),肾小管损伤程度评分和肾小管上皮细胞凋亡数量明显减少(均P<0.05)。结论:二甲双胍对顺铂诱导AKI大鼠有治疗作用,可能减少肾小管上皮细胞的凋亡有关。

八年制医学生专科精准实习模式的探索

目的探索肾内科专科精准实习带教模式在八年制医学生临床实习中的应用。方法选取在中南大学湘雅医院实习的2013级临床医学八年制学生30名进行专科实习摸底问卷调查,综合问卷调查结果,对在肾内科实习的20名八年制学生采用精准实习带教模式教学。实习前教师录制专科问诊视频和专科手术操作视频、制定肾内科常见疾病讲座课件供学生预习,实习时采用多样化教学模式及组织学生小讲课等方式充分调动学生的主观能动性,发挥学生的主体作用。实习结束后,学生对教学改革模式进行反馈和评价。结果学生对肾内科精准实习模式的整体满意度为93.1%,其中学生对肾内科常见疾病病史采集及体格检查熟练程度、专科操作了解程度、教学内容及教学方式、带教老师及自身实习预期效果这6个方面较为满意。结论肾内科精准实习带教模式可提高八年制医学生专科实习效率,可进一步在各专科推广和应用。

依那普利对大鼠早期肾间质纤维化的影响

目的:观察依那普利对早期肾间质纤维化形成大鼠的疗效,并探讨其作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻模型组和依那普利治疗组(每组20只),治疗组于手术后第4天开始以依那普利灌胃,术后第14天取各组大鼠肾组织分别行HE染色和Masson染色,免疫组织化学检测Ⅰ型胶原、III型胶原在肾组织的蛋白表达。应用Real-time PCR方法检测肾组织中Ⅰ型胶原、III型胶原、血小板源生长因子(platelet drived growth factor,PDGF)-B、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1、结缔组织生长因子(cen-nective tissue growth factor,CTGF)mRNA的水平。应用Western免疫印迹方法检测PDGF-B蛋白的表达。结果:依那普利治疗组大鼠肾脏的肾间质损伤指数、肾间质胶原评分、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原,以及细胞因子PDGF-B,TGF-β1,CTGF的表达均比模型组明显下降(均P<0.05)。结论:依那普利可通过下调细胞因子PDGF-B,TGF-β1,CTGF的表达而起到治疗单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用。

提高诊断学体格检查见习线上教学质量可行方式的探讨

目的:探讨提高诊断学体格检查见习线上教学质量的可行方式,为诊断学线上教学提供有价值的参考。方法:选取中南大学湘雅医学院2017级医学本科大三学生(n=46)为研究对象,对体格检查见习线上课程内容进行设计,在全部体格检查线上直播教学完成后,安排学生抽取操作考核并录制视频,然后直播给予点评反馈,并再次抽取考核上交视频,对医学生视频考核反馈前后的成绩进行评估和比较。结果:通过视频考核反馈,学生们的考核总分较反馈前明显提高;在“人文关怀”“操作流畅度”“结果判断”3个方面进步比较明显,而在“检查手法”方面进步有限;大部分成绩中等的学生提高成为了优秀,而不及格的占比变化不明显。结论:学生视频考核反馈在线上授课环境下,通过加强互动可以部分提高诊断学体格检查见习的教学质量,但对于传统诊断学见习手把手纠正的“检查手法”教学部分改善并不明显,需要在今后的线上教学工作中进一步探讨新的方法。

氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应的作用

目的探讨血管紧张素Ⅰ型受体阻断剂氯沙坦对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应及转化生长因子B1（TGF-β1）产生的影响。方法以大鼠肾小管上皮细胞株（NRK-52E）为研究对象，分别给予氯沙坦（10^-5mol／L）和（或）NADPH氧化酶抑制剂联二亚苯碘锚（DPI，10^-5mol／L）预处理1h后再加入AngⅡ（10^-7mol／L）刺激24h，同时设立空白培养基作为对照组。实时定量PCR和Western印迹法分别检测4组细胞NADPH氧化酶p22phox、p47phox、Nox-4 mRNA和蛋白水平及TGF-β mRNA水平。用2，7-二氯荧光素双乙酸盐（H2DCF-DA）作为荧光探针，采用荧光分光光度仪检测细胞内活性氧（ROS）的水平。应用比色法测定细胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）水平。结果AngⅡ（10^-7mol／L）刺激细胞15min后开始产生大量的ROS，至60min达平台期。单纯AngⅡ刺激1h后，NRK-52E细胞上清液中SOD水平显著低于对照组（27．31μU／L比48．29μU／L，P〈0．01）；经氯沙坦预处理。1h后再加入AngⅡ刺激1h细胞上清液中SOD水平升高至36．37μU／L，与AngⅡ组差异有统计学意义（P〈0．01）。单纯AngⅡ刺激NRK-52E细胞24h可显著上调NADPH氧化酶p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA和蛋白水平，其mRNA水平分别为对照组的5．57倍、5．55倍和9．41倍（均P〈0．01），蛋白水平分别为对照组的4．53倍、4．17倍和6．50倍（均P〈0．01）。经氯沙坦干预后，p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA水平分别为对照组的2．71倍、2．18倍和5．23倍（均P〈0．01），蛋白水平分别为对照组的3．20倍、2．30倍和4．30倍（均P〈0．01）。AngⅡ刺激细胞24h后TGF-β1 mRNA表达也显著增多，为对照组的4．36倍（P〈0．01），氯沙坦处理细胞后TGF-β1 mRNA水平为对照组的1．57倍。结论氯沙坦通过抑制NADPH氧化酶的表达和增加SOD的表达减少ROS的产生，并能通过减少ROS产生，抑制AngⅡ诱导的TGF-β1 mRNA水平增高。

氯沙坦通过ERK1／2丝裂原活化蛋白激酶途径抑制高糖诱导的小鼠系膜细胞结缔组织生长因子表达

糖尿病肾病（DN）是糖尿病严重的慢性并发症之一，其主要病理特征是由细胞外基质（ECM）增多引起的肾小球硬化。血管紧张素（Ang）受体拮抗剂氯沙坦可有效地延缓肾小球硬化，被用于DN的治疗。高糖可诱导肾脏系膜细胞结缔组织生长因子fCTGF）的表达，从而促进ECM积聚和组织器官的纤维化。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）作为真核细胞胞质内的信号转导终末通路，与DN的发病密切相关。本研究观察高糖是否通过ERK1／2MAPK途径调节小鼠系膜细胞CTGF的表达，以及氯沙坦对CTGF的作用是否也与ERK1／2MAPK通路相关。

依那普利在大鼠单侧输尿管梗阻再通模型中的抗纤维化作用

目的:探讨依那普利对大鼠单侧输尿管梗阻再通模型肾脏纤维化的影响。方法:18只SD大鼠随机分为两组:假手术组(6只)以及单侧输尿管梗阻模型组(12只)。输尿管梗阻3天后,实施梗阻再通手术,再将大鼠随机分为模型组(6只)以及依那普利组(6只),术后,依那普利组给予依那普利灌胃10mg/kg/d,假手术组以及模型组给予等量0.5%CM-CNa溶液灌胃。用药2周后,取术侧肾组织做HE染色,并采用Raford评分系统对肾间质损伤程度进行评分;用Real-timePCR方法检测I、III型胶原以及CT-GFmRNA的表达;用Westernblot方法检测CTGF蛋白水平的表达。结果:模型组大鼠肾脏损伤程度,I、III型胶原mRNA表达水平,以及CTGFmRNA和蛋白表达水平均比假手术组明显上升(P<0.01)。经依那普利治疗后,与模型组相比,以上指标均显著下降(P<0.01)。结论:依那普利能有效阻止大鼠单侧输尿管梗阻再通后肾脏纤维化的进展。依那普利抗纤维化的作用机制可能与抑制CTGF的表达有关。

维持透析时间对腹膜透析患者CKD-MBD的影响

目的 对维持腹膜透析患者的骨代谢指标进行横断面调查,并探讨腹膜透析时间对腹膜透析患者慢性肾脏疾病矿物质骨代谢异常（Chronic kidney disease-mineral and bone disorder,CKD-MBD）的影响.方法 以60例腹膜透析患者和30例健康体检者（对照组）作为研究对象,腹膜透析患者分为A组（腹膜透析时间＜24个月）和B组（腹膜透析时间≥24个月）,比较各组间骨代谢指标,如血钙,血磷,25-羟维生素D3[25-hydroxyl vitamin D3,25 （OH） D3]、血清全段甲状旁腺素（intact parathyroid hormone,iPTH）和骨碱性磷酸酶（bone alkaline phosphatase,BALP）的变化.结果 与对照组相比,腹膜透析组的血磷升高,血钙降低且差异具有统计学意义（P1.40±0.29mmol/L vs 1.75±0.57mmol/L;Ca 2.33±0.19mmol/L 2.02±0.2mmol/L,P＜0.叭）,iPTH,25 （OH） D3,BALP具有显著性差异[iPTH 436.41±368.28pg/mL vs 53.31±23.71pg/mL;25（OH）D3199.28±139.52ng/mL vs 36.04±14.17ng/mL;BALP80.24±39.41ng/mL vs 173.76±52.38ng/mL,P＜0.01].腹膜透析患者一项或多项骨代谢指标异常的发生率为100％.与对照组相比,A组、B组的血钙降低,血磷升高,且具有统计学意义;但A组与B组的血钙、血磷水平差异无统计学意义（P＞0.05）.与对照组相比,A组、B组的iPTH显著升高（53.31±23.71pg/mL vs 596.57±449.91 pg/mL ＆ 276.25±148.23pg/mL,P＜0.05）;25（OH）D3显著减低[173.76±52.38ng/mL vs 58.99±25.79ng/mL ＆ 101.48±39.67ng/mL,P＜0.05],A组BALP明显减低（36.04±14.18ng/mL vs 264.58±114.24ng/mL）;与A组相比,B组的iPTH升高,25（OH）D3降低,BALP降低,且差异均具有统计学意义（BALP：133.97±133.90ng/mL vs 264.58±114.24ng/mL,P＜0.05）.结论 腹膜透析患者存在明显的矿物质骨代谢异常.随着腹膜透析时间的增加,骨转化类型可能会发生变化,由于常规行骨活检较困难,需动态的检测患者的骨代谢血清学指标来辅助判断骨转化类型.腹膜透析患者矿物质骨代谢异常的治疗方案需根据骨转化类型进行调整.

吡非尼酮在治疗糖尿病肾病小鼠肾纤维化中的作用及机制

目的观察吡非尼酮对db／db小鼠糖尿病肾病模型的疗效，并探讨其作用的分子机制。方法（1）以野生型小鼠为正常对照组，db／db小鼠分为模型组和吡非尼酮组，每组各6只。吡非尼酮组给予250mg·kg^-1·d^-1吡非尼酮连续灌胃18周，其他两组以0．5％羧甲基纤维素钠灌胃。测定血糖、24h尿白蛋白量；PAS染色、PASM染色、Masson染色、天狼星红染色评估肾组织病理改变；免疫组化检测肾组织Ⅳ型胶原表达。（2）以小鼠肾小球系膜细胞（SV40MES-13细胞）为体外研究对象。细胞分为对照组、高渗组、高糖组，及50、100、200、400、800、1600mg／L吡非尼酮＋高糖组，BrdU细胞增殖检测评估细胞增殖率。细胞分为对照组、高渗组、高糖组和吡非尼酮＋高糖组，实时荧光定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、转化生长因子β1（TGF—β1）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6及单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）mRNA的表达。结果（1）与正常对照组比较，模型组小鼠体重增加，血糖升高，伴有大量蛋白尿，并出现肾小球肥大、系膜区扩张、小管间质纤维化等病理改变，肾组织Ⅳ型胶原合成增加（均P〈0．05）。与模型组比较，吡非尼酮组db／db小鼠24h尿蛋白量降低，肾小球肥大、系膜区扩张及小管间质纤维化减轻，肾组织Ⅳ型胶原的表达减少（均P〈0．05）。（2）与高糖组比较，100、200、400、800、1600mg／L吡非尼酮＋高糖组MES-13细胞增殖率均降低（均P〈0．05），400mg／L吡非尼酮＋高糖组α—SMA、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、TGF—β1、IL-β、IL-6、MCP-1mRNA表达均减少（均P〈0．05）。结论吡非尼酮可抑酮鼠肾小球系膜细胞增殖及活化，下调TGF-β1及促炎因子的表达，减少胶原的合成，从而改善db／db小鼠肾纤维化。

氟非尼酮减缓糖尿病肾病模型小鼠肾纤维化

目的观察氟非尼酮（AKF-PD）对糖尿病肾病模型db／db小鼠的疗效，并初步探讨其可能的作用机制。方法（1）14只野生型8周龄小鼠为正常对照组。42只8周龄db／db小鼠采用完全随机的方法分为模型组、AKF．PD（250mg·kg^-1·d^-1）治疗组及氯沙坦（20mg·kg^-1·d^-1）治疗组，每组14只，雌雄各半。从10周龄起治疗组分别给予相应剂量的药物连续灌胃18周，正常组及模型组给予等量药物溶媒（0．5％羧甲基纤维素钠）灌胃。尾静脉采血测血糖，ELISA测定24h尿白蛋白量，PAS染色观察各组小鼠肾脏组织病理改变，免疫组织化学检测Ⅳ型胶原及纤连蛋白（FN）在肾组织的表达。（2）体外培养小鼠。肾小球系膜细胞（MES-13），分为正常糖组（5．5mmol／L葡萄糖）、高渗组（5．5mmol／L葡萄糖＋19．5mmol／L甘露醇）、高糖组（25．0mmol／L葡萄糖）、AKF．PD组（25．0mmol／L葡萄糖＋400mg／LAKF．PD）及氯沙坦组（25．0mmol／L葡萄糖＋2μmol／L氯沙坦）。药物作用72h后，实时定量PCR检测细胞I型胶原、Ⅳ型胶原、转化生长因子B1（TGF-β1）mRNA的表达，ELISA检测细胞培养液上清中的TGF-β1蛋白含量。结果（1）与野生型小鼠比较，db／db小鼠体型肥胖，血糖明显升高，伴有大量白蛋白尿，发生肾小球肥大、系膜区扩张等病理改变，肾小球硬化指数升高（P〈0．01），肾组织Ⅳ型胶原和FN表达均增加（均P〈0.01）；与db／db小鼠比较，AKF—PD及氯沙坦治疗组小鼠24h尿白蛋白量降低（均P〈0．01），肾小球肥大及系膜区扩张减轻，肾小球硬化指数降低（均P〈0．01），肾组织中Ⅳ型胶原及FN的表达减少（均P〈0．01）。（2）与正常糖组比较，高糖组小鼠肾小球系膜细胞Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原mRNA表达及TGF-β1 mRNA和蛋白表达均升高（均P〈0．01）。与高糖组比较，AKF—PD组、氯沙坦组小鼠肾小球系膜细胞I型胶原、Ⅳ型胶原mRNA表达，及TGF．131mRNA和蛋白表达均降低（均P〈0．05）。结论AKF-PD可能通过作用于肾小球系膜细胞，减少TGF-β1的表达，减少胶原合成，从而抑制db／db小鼠。肾纤维化。

抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎伴脑出血两例

抗中性粒细胞胞质抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)相关性血管炎(ANCA-associated vasculitis,AAV)是一组以中-小血管的微免疫性坏死性炎症为病理特点,血清中伴有ANCA存在的系统性血管炎.该病可累及多个系统,其中肾、肺为其最常累及的器官,而累及中枢神经系统者较为少见,特别是脑出血者罕见.本文通过报道两例ANCA相关性血管炎、肾炎伴脑出血患者的临床资料,结合文献进行分析和总结,旨在提高对ANCA相关性血管炎少见临床表现的认识,提高临床医生诊断水平,并有利于患者早诊断、早治疗及改善预后.