TVT-AbbrevoTM系统在经闭孔无张力尿道中段无张力悬吊带术中的应用疗效研究

目的探讨使用TVT-Abbrevo^TM系统改良TVT-O手术治疗女性压力性尿失禁（SUI）的疗效及安全性；方法2014年9～11月随机分配入组38例SUI患者，分为TVT-O及TVTA组各19例，分别使用传统TVT—O吊带及TVT—Abbrevo^TM系统行手术．术前评估年龄、病程、分娩、体质指数（BMI）、valsalva漏尿点压力（VLPP）、尿流率Qmax，各项两组差异无统计学意义。记录术中手术时间、出血量、术后1月内治愈率、并发症等并比较两组区别；结果38例手术均获得治愈或改善，手术时间及手术中出血量TVT—O组较TVTA组差异无统计学意义，术后TVT-O组有2例术后尿频，TVTA组3例，经药物治疗1～2W后缓解。术后TVT—O组有单侧或双侧大腿根部疼痛4例，TVTA组有1例。两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）.两组均无急迫性尿失禁及尿储留表现。结论TVT-Abbrevo^TM系统改良TVT—O手术，可以减少并发症的发生，长期疗效需要观察。

3D腹腔镜下前列腺癌根治术34例分析

目的探讨经腹膜外3I）腹腔镜下前列腺癌根治术的优缺点。方法收集分析2014年1月至2O15年／1月于我科行经腹膜外Storz及Viking3I）腔镜下前列腺癌根治术的3／1例患者的相关临床资料。结果3／1例手术均成功。手术时间78～195min，平均115min。出血量7O～75Om1，平均约2O9m1，2例输血。术中未出现直肠、双侧输尿管和其他脏器损伤。术中、术后未出现心肺并发症。13例患者拔出导尿管后轻度尿失禁，经治疗后12例痊愈，1例生物反馈治疗中。3例术后病理提示尿道切缘阳性。10例保留性功能手术中5例勃起功能3个月内恢复。结论3D腔镜技术在前列腺癌根治术中具有优势，尤其是在缝合及精细操作方面。

“3+1”膀胱功能恢复法联合剜除术治疗良性前列腺增生合并逼尿肌无力的初步探索

目的:探讨"3+1"膀胱功能恢复法联合剜除术治疗良性前列腺增生(BPH)伴逼尿肌无力(ACD)患者的临床疗效。方法:对我院收治的35例BPH伴ACD的患者行前列腺钬激光剜除术,术后行"3+1"膀胱功能恢复法,即3阶段膀胱功能恢复训练,同时用1种药物辅助治疗。记录并分析患者就诊时、术后3、6个月的膀胱内压、残余尿、最大尿流率、IPSS、Qo L、能否自行排尿、能否有规律的排尿、膀胱功能满意等级、肾积水、输尿管扩张、肾功能、泌尿道系感染等指标。结果:患者术前与术后6个月膀胱内压[(35.1±2.7)cm H_2O vs(50.2±2.3)cm H_2O,P<0.05]、最大尿流率[(4.2±2.7)ml/s vs(21.1±4.1)ml/s,P<0.05]较术前明显增高,残余尿[(173.0±31.6)ml vs(30.5±12.9)ml,P<0.05]、IPSS[(27.3±3.2)分vs(5.1±1.4)分,P<0.05]、Qo L[(4.1±0.8)分vs(0.8±0.1)分,P<0.05]较术前明显降低,均具有统计学意义(P<0.05)。术前与术后6个月对比,患者均可自行排尿(0/35,0%vs 35/35,100%,P<0.05),大部分患者有了规律(排尿间隔3~4 h)的排尿(0/35,0%vs 30/35,85.71%,P<0.05),膀胱满意度为I级患者显著增加(0/35,0%vs 30/35,85.71%,P<0.05),充盈性尿失禁患者显著减少(10/35,28.57%vs 2/35,5.71%,P<0.05),肾功能正常患者增加(12/35,34.29%vs 30/35,85.71%,P<0.05),无明显泌尿系感染者显著增加(6/35,17.14%vs 33/35,94.29%,P<0.05)。患者症状得到明显改善,经过"3+1"膀胱功能恢复法后除2例仍排尿困难,其余33例排尿得到明显改善。结论:通过"3+1"膀胱功能恢复法联合剜除术,对BPH伴逼尿肌无力的患者取得了良好的治疗作用,其长期疗效有待进一步观察。

ATF3和CTGF基因在尿道下裂患者包皮中的表达及雌激素调控研究

目的:雌激素与尿道下裂的发生关系密切,本研究旨在比较尿道下裂患儿包皮和同龄正常儿童包皮中转录激活因子3(ATF3)和结缔组织生长因子(CTGF)的表达,明确二者与尿道下裂的关系,探寻雌激素引起尿道下裂的分子机制。方法:从包皮中分离成纤维细胞并原代培养,用不同浓度(1.0μmol/L、0.1μmol/L、10.0nmol/L、1.0nmol/L、0.1nmol/L)的17-β乙炔雌二醇(17-EE)处理2h,或选择0.1μmol/L的17-EE处理不同时间(0.5、1、2、4、8、16、24h),观察17-EE对ATF3和CTGF表达的影响。MTT法检测17-EE对细胞增殖的影响,RT-PCR法观察成纤维细胞ATF3和CTGF表达情况。结果:尿道下裂患者包皮中ATF3和CTGF的表达显著高于正常人包皮组织(P<0.05);高浓度的17-EE干预对包皮成纤维细胞有抑制作用;在17-EE干预早期(1～2h)ATF3的表达呈现一过性增加;CTGF的表达在24h内17-EE干预未见明显变化。结论:ATF3和CTGF是与尿道下裂密切相关基因,雌激素可能通过上调ATF3和CTGF的表达参与调节生殖结节的异常发育,导致尿道下裂。

乳腺钙化组织中骨桥蛋白的表达及其临床意义

目的检测骨桥蛋白(osteopontin protein,OPN)mRNA在含钙化灶乳腺组织中的表达,及其在乳腺癌转移发生发展中的意义。方法采用RT-PCR法检测1 2 8例乳腺病变组织及相应癌旁乳腺组织和9例乳癌转移淋巴结中骨桥蛋白mRNA的表达。结果骨桥蛋白mRNA表达在含钙化灶乳腺癌组织及转移淋巴结组织中表达最高,良性钙化灶乳腺组织次之,而在癌旁乳腺组织及良性无钙化病变组织中表达最低,差异有显著意义(P<0.0 5)。结论骨桥蛋白的表达与乳腺癌组织钙化有关,并可能与乳腺癌的发生有关,检测其表达水平,可望能指导临床治疗,评判患者预后。

Keap1-Nrf2-ARE信号通路在多器官疾病中的研究进展

N rf2作为细胞抗氧化应激反应的核心转录因子，能够激活内源性抗氧化应答。在生理状态下， Nrf2分子与胞浆中的Keap1蛋白分子结合而处于非活性状态，通过泛素化‐蛋白酶体途径进行降解，无法进入细胞核发挥转录活性。当机体受到亲电试剂刺激或处于氧化应激状态时，Nrf2与Keap1解偶联，N rf2磷酸化后转移入核并与抗氧化反应原件（antioxidant response element ，ARE）上的相应位点结合，由此启动 A RE调控的下游Ⅱ相解毒酶以及抗氧化蛋白基因的表达，从而提高细胞抗氧化应激的能力。在N rf2介导的抗氧化应激反应不足以抵抗外源性的氧化应激的情况下，细胞内的氧化还原稳态被破坏，组织细胞出现肥大、凋亡以及纤维化，继而组织的形态结构发生改变，导致疾病的发生。N rf2在中枢神经系统、心血管系统、消化系统以及肾脏、肺脏等疾病的发生及防治中起着关键的作用，是治疗机体多器官疾病的潜在靶点。现就Keap1‐Nrf2‐ARE信号通路及其在相关疾病中的作用作一综述。

基质细胞在DU145前列腺癌细胞种植小鼠肿瘤模型中的作用

目的探讨前列腺基质细胞对肿瘤发生的作用。方法将BALB／c裸鼠分为两组，每组10只，对照组（D组）裸鼠皮下单纯注射前列腺癌细胞株DU145细胞，实验组（D＋P组）混合注射DU145细胞和前列腺外周带分离的基质细胞（PrSC），注射后第9周收集肿瘤组织，记录肿瘤重量。采用TUNEL法检测凋亡细胞的数量，采用免疫组织化学法标记α-SMA、Ki67和P53阳性细胞，分别检测肿瘤组织中基质细胞和血管数目，增殖细胞的数目和P53蛋白的表达。结果D＋P组瘤重、血管数量和增殖细胞多于D组，但凋亡细胞和P53的表达两组之间差异并无统计学意义。结论基质细胞在肿瘤产生中发挥了重要作用，PrSC的作用可能是促进肿瘤细胞增殖和血管生成，对细胞的凋亡影响较小。

正常前列腺间质细胞对前列腺癌细胞糖代谢水平的影响

目的:探讨正常前列腺组织不同区带来源的前列腺间质细胞对前列腺癌细胞生长的影响及其作用机制。方法:以激素非依懒性前列腺癌细胞系DU145细胞为研究对象,取新鲜的正常前列腺外周带(PZ)和移行带(TZ)组织,提取间质细胞并体外培养。收集不同区带来源的间质细胞培养上清作为条件培养液培养DU145细胞,CCK8法测定肿瘤细胞的生长曲线,台盼蓝染色测定细胞数量及活力,细胞划痕实验测定细胞侵袭性,Western印迹法测定间质细胞对肿瘤细胞糖代谢关键酶的影响。结果:1PZ间质细胞的条件培养液能促进肿瘤细胞的生长,而TZ间质细胞的条件培养液抑制肿瘤细胞的生长;2PZ间质细胞的条件培养液明显增加肿瘤细胞糖代谢关键酶己糖激酶2(HK-2)、丙酮酸激酶2(PKM-2)、乳酸脱氢酶(LDHA)、丙酮酸脱氢酶(PDH)的表达,而TZ则抑制上述酶的表达。结论:前列腺不同来源的间质细胞对肿瘤细胞的生长影响不同,其机制可能与不同来源的间质细胞对糖酵解代谢的影响不同有关。

经尿道前列腺等离子切除术与钬激光剜除术治疗良性前列腺增生的疗效和安全性比较

目的 比较经尿道前列腺等离子切除术（plasma kinetic resection of the prostate,PKRP）与经尿道前列腺钬激光剜除术（holmium laser enucleation of the prostate,HoLEP）治疗BPH的疗效和安全性. 方法 回顾性分析2008年8月至2012年6月收治的812例BPH患者的临床资料.PKRP组410例,HoLEP组402例,两组患者的年龄[（71.9±8.2）岁与（72.8±8.6）岁]、前列腺体积[（61.2±23.3） ml与（58.8±29.5）ml]、IPSS评分（23.8±3.6与23.5±3.7）、QOL评分（4.5±0.7与4.4±0.7）、Qmax[（7.1±3.3） ml/s与（7.1±3.4） ml/s]、IIEF-5评分（18.4±3.5与18.2±3.4）比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.比较两种手术方式的安全性和疗效. 结果 术后随访6个月,PKRP组和HoLEP组的IPSS（6.3±1.7与6.2±1.9）、QOL评分（1.8±0.7与1.0±0.6）及Qmax[（23.9±4.5） ml/s与（23.9±4.2） ml/s]差异均无统计学意义（P＞0.05）,但两组较术前均有所改善,差异有统计学意义（P＜0.05）.HoLEP组与PKRP组的手术时间[（87.1±41.9） min与（60.5±±19.6）min]、切除组织质量[（55.2±16.5）g与（43.9±15.8）g]、术后血红蛋白下降值[（1.2±0.6）g/L与（1.8±0.7） g/L]、膀胱冲洗时间[（22.8±11.8）h与（30.4±14.4）h]、导尿管留置时间[（74.2±24.5）h与（89.1±32.3） h]和住院时间[（4.1±1.9）d与（5.4±3.0）d]比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.两组术后均未发生经尿道电切综合征,PKRP组10例和HoLEP组5例术后拔除导尿管后发生尿潴留,再次留置导尿管3～5d拔管,均能自行排尿.PKRP组中4例因术后出血给予输血治疗,HoLEP组无输血病例.PKRP组30例和HoLEP组35例出现不同程度的压力性尿失禁,术后1～6个月内排尿恢复正常.PKRP组4例和HoLEP组2例因尿道狭窄或膀胱颈硬化需要再次手术切开治疗.在仍有性生活的患者中,PKRP组45例和HoLEP组49例出现逆行射精.两组的尿潴留、输血、再次手术、压力性尿失禁及逆行射精等发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）.PKRP组99例和HoLEP组102例进行了IIEF-5评分随访,两组术后未出现明显的勃起功能障碍,两组间IIEF-5评分比较差异无统计学意义（P＞0.05）. 结论 PKRP及HoLEP治疗BPH均具有良好的疗效及安全性.对于有TURP手术禁忌证的部分患者,可以考虑采用HoLEP手术,出血风险更小,膀胱冲洗、留置导尿及住院时间更短.

高危及局部晚期前列腺癌新辅助治疗后行腹腔镜下前列腺癌根治术的临床体会

目的：探讨高危及局部晚期前列腺癌在3个月内分泌新辅助治疗后，行腹腔镜下前列腺癌根治术的临床经验和短期疗效。方法患者年龄55～81岁，所有患者术前行超声引导下的前列腺12点系统穿刺，发现79例前列腺癌患者。根据患者术前血前列腺特异性抗原（PSA）、Gleason评分和磁共振检查，发现其中36例为局限性前列腺癌（A组），43例为高危和局部晚期前列腺癌（B组）。A组穿刺后4～6周行腹腔镜下前列腺根治术，B组先行3个月左右的新辅助内分泌治疗（全雄激素阻断），再行腹腔镜下前列腺癌根治术。结果 A组患者穿刺前PSA 3.6～15.8 ng/ml，平均9.3 ng/ml。B组患者前列腺穿刺前PSA 12.6～45.2 n g/ml，平均23.6 n g/ml。经3个月新辅助内分泌治疗后PSA下降至0.02～3.6 ng/ml，平均1.2 n g/ml。手术时间A组65～180 min，平均136 min；B组70～210 min，平均152 min。术中出血A组30～400 ml，无术中输血；B组50～600 ml，其中2例患者输血红细胞400 ml。两组患者皆无直肠和周围脏器损伤等严重并发症出现。术后病理标本A组发现前列腺切缘阳性2例，无膀胱颈部、精囊和局部淋巴阳性；B组发现前列腺切缘、膀胱颈部和精囊阳性6例，局部淋巴阳性4例。术后1个月复查PSA，A组0.001～0.03 ng/ml，B组0.01～0.45 ng/ml。术后对于其中病理切缘、膀胱颈部、精囊和局部淋巴结阳性以及术后生化复发，皆给予辅助内分泌治疗。患者随访6～20个月，其中A组3例生化复发，1例局部复发，无骨转移和远处转移；B组12例出现生化复发，4例局部复发，2例出现骨转移和远处转移。结论新辅助内分泌治疗后能够明显缩小前列腺肿瘤体积，通过临床降期使高危及局部晚期患者获得手术机会。与局限性前列腺癌相比，并未明显增加手术难度和并发症。新辅助内分泌治疗配合腹腔镜下前列腺癌根治术，为高危及局部晚期前列腺癌患者提供了新的治疗手段。但该方法仍有较高的肿瘤复发和转移发生，与传统的单纯内分泌治疗相比，是否能够改善前列腺癌患者的长期预后，尚有待长期随访结果的观察。

人脂肪干细胞与猪尿路上皮细胞隔离共培养后向尿路上皮样细胞分化

目的研究人脂肪干细胞与猪尿路上皮细胞体外隔离共培养后向尿路上皮样细胞转化的可行性。方法从人抽脂术后脂肪组织中提取脂肪干细胞,同时从猪膀胱中获取尿路上皮细胞,两种细胞体外培养扩增后,通过"Trans-well"体系进行体外隔离共培养3周。倒置显微镜下观察脂肪干细胞形态变化。RT-RCP鉴定诱导后人脂肪干细胞中尿路上皮特异性标记Uroplakin-Ⅱ在基因水平的表达,免疫荧光鉴定AE1/AE3和Uroplakin-Ⅱ在蛋白水平的表达情况。结果人脂肪干细胞与猪尿路上皮细胞体外隔离共培养3周后,倒置显微镜可见细胞折光性变强,细胞触角缩短,依然保持良好的增殖状态,但未见典型的尿路上皮细胞"铺路石样"改变。免疫荧光发现AE1/AE3和Uroplakin-Ⅱ均有表达,RT-PCR检测发现Uroplakin-Ⅱ基因表达阳性。结论人脂肪干细胞与猪尿路上皮细胞隔离共培养后,可以表达成熟尿路上皮特异性标记,说明脂肪干细胞可以向尿路上皮样细胞分化。

正常人前列腺外周带和移行带成纤维细胞差异性基因表达与蛋白分泌的研究

目的:寻找正常人前列腺外周带和移行带细胞在基因表达水平及相关信号通路蛋白表达水平的差异。试图从机理上探求两者在不同前列腺疾病中所占比例不同的原因。方法:用Trizol一步法从外周带(PZ)和移行带(TZ)成纤维细胞中抽提总RNA。通过定量RT-PCR技术测定CXCL1、CXCL2、CXCL3、IGFBP2、IGFBP3、IL-8、TAGLN、MEST的基因表达水平。此外,从PZ、TZ成纤维细胞条件培养基中收集、浓缩分泌的蛋白,通过Western blotting技术比较分析分泌蛋白的水平。结果:一些分泌蛋白的基因表达水平在PZ与TZ成纤维细胞存在显著差别,其中CXCL1、CXCL2、CXCL3与IL-8的mRNA在TZ成纤维细胞中的表达水平明显高于其在PZ成纤维细胞中的表达水平。而IGFBP2、IGFBP3与TAGLN的mRNA在PZ成纤维细胞中的表达水平明显高于其在TZ成纤维细胞中的表达水平。IGFBP3与TAGLN在PZ成纤维细胞中的蛋白分泌水平明显高于其在TZ成纤维细胞中的蛋白分泌水平。结论:PZ与TZ成纤维细胞中基因表达及蛋白分泌水平的差异可能参与导致前列腺癌与前列腺增生(BPH)发病率在前列腺不同区带的显著区别。

MEST基因在正常人前列腺移行带和外周带基质成纤维细胞中的mRNA表达差异及其与DNA甲基化水平的关系

目的:探讨正常人的前列腺移行带(PZ)和外周带(TZ)基质成纤维细胞中MEST(mesoderm specific transcript)基因的甲基化水平变化和表达差异,及DNA甲基化抑制剂(5-Aza-CdR)对其表达水平的影响。方法:用硫化测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)和实时荧光定量PCR方法分别检测5-Aza-CdR处理前、后在前列腺PZ和TZ原代成纤维细胞中MEST基因的甲基化水平和相应的mRNA表达。结果:MEST基因在PZ成纤维细胞中为低甲基化高表达,在TZ成纤维细胞中为高甲基化低表达。加入5-Aza-CdR后,MEST在PZ和TZ成纤维细胞中都为去甲基化,而表达水平上升,但是TZ成纤维细胞表达水平的改变比PZ成纤维细胞大。结论:MEST基因的DNA甲基化差异可能是前列腺外周带和移行带成纤维细胞生物学行为差异的分子基础。

门静脉动脉化及部分肝切除术对肝硬化的影响

目的研究行部分肝切除术后PVA对肝硬化的影响，证实PVA能促进部分肝切除术后肝细胞再生，改善肝硬化。方法肝硬化模型犬随机分三组，A组肝脏42％切除＋门静脉动脉化；B组肝脏42％切除；C组对照组。实验中按计划行多普勒超声检查，血化验研究肝功能变化，检测血管内皮细胞标记抗原CD。结果A组肝重显著高于B组（P〈0．01）；A组肝功能的改善亦加快；血流动力学改变在术后A组高于其余二组；免疫组化检测血管内皮细胞标记抗原CD34计数A组高于其余二组。结论①门静脉动脉化有助于部分肝切除术后肝功能的改善；②门静脉动脉化增加肝细胞再生及改善肝硬化。