小檗碱对高糖培养的背根神经节中疼痛相关因子的影响

目的探讨小檗碱对痛性糖尿病神经病变疼痛相关蛋白P2X3、TRPV4、神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响及意义。方法新生大鼠离体培养背根神经节神经元,免疫组织化学法、蛋白质印迹法检测细胞表达阳性率及蛋白表达。结果 P2X3、TRPV4、nNOS正常条件下在背根神经节中均有表达。免疫组织化学法检测高糖培养条件下P2X3、TRPV4、nNOS可看到阳性表达神经元增多,受体表达升高。小檗碱处理后,P2X3、TRPV4、nNOS表达均下降。蛋白质印迹法检测结果显示高糖条件下P2X3、nNOS表达高于对照组(P<0.01),小檗碱处理后,P2X3、TRPV4、nNOS均较高糖组降低(P<0.01,P<0.05,P<0.01)。结论小檗碱可降低背根神经节神经元高糖环境下P2X3、TRPV4、nNOS的高表达,对糖尿病受损神经元有保护作用,可能为改善痛性糖尿病神经病变提供新途径。

食品中微生物危害分析及控制措施探讨

近些年食品问题事件频频发生,不仅给消费者带来健康问题,而且还影响到我国食品企业的健康发展,造成国民经济损失,严重制约我国经济的健康发展。据调查在食物安全问题中微生物危害的出现是影响食物安全的重要因素。微生物危害控制以及控制措施分析是改变这一现状的重要方式。现代食物工业投资不断增加。

HET0016对延迟性亚低温保护氧糖剥夺-复氧复糖大鼠神经元的改良作用：离体实验

目的 评价HET0016对延迟性亚低温保护氧糖剥夺-复氧复糖大鼠神经元的改良作用。方法 健康新生SD大鼠海马神经元分离培养后，以（2～3）×105个/ml的密度接种于6孔板内，采用随机数字表法将其分为4组（n＝12）：对照组（C组）、氧糖剥夺组（OGD组）、氧糖剥夺-复氧复糖-亚低温组（OGD/R-MH组）、氧糖剥夺-复氧复糖-亚低温-HET0016组（OGD/R-MH-HET组）。C组正常培养；OGD组进行氧糖剥夺2 h；OGD/R-MH组在氧糖剥夺2 h，复氧复糖4 h后亚低温处理24 h；OGD/R-MH-HET组于氧糖剥夺后复氧复糖前加入HET0016，终浓度为1 μmol/L，其余处理同OGD/R-MH组。继续培养24 h后，采用MTT比色法检测神经元活力；采用PI/FDA染色法确定神经元的存活率。结果 与C组比较，OGD组神经元活力减弱、存活率下降（P〈0.05）；与OGD组比较，OGD/R-MH组和OGD/R-MH-HET组神经元活力增强、存活率升高，且OGD/R-MH-HET组变化程度更明显（P〈0.05）。结论 HET0016对延迟性亚低温保护氧糖剥夺-复氧复糖离体大鼠神经元具有一定的改良作用。

小檗碱对DRG中PDN相关因子影响

目的探讨小檗碱对糖尿病并发症痛性糖尿病神经病变(PDN)发生过程中背根神经节(DRG)中PPARβ、PAR-2、TRPV4、P2X3、n NOS表达的影响。方法采用高糖及加入小檗碱处理原代培养的DRG神经元,Western blot及Real-time PCR法检测DRG中PPARβ、PAR-2、TRPV4、P2X3、n NOS的mRNA及蛋白表达水平。结果高糖培养组中PPARβ、TRPV4的蛋白和mRNA表达高于对照组(P<0.05),加入小檗碱后,mRNA水平下降;PAR-2、P2X3、n NOS mRNA表达低于对照组(P<0.05),加入小檗碱后,mRNA水平上升;PPARβ、PAR-2、PAR-2、P2X3、n NOS蛋白表达水平升高(P<0.05),加入小檗碱后,蛋白表达水平降低。结论小檗碱能使高糖引起的DRG的PPARβ、PAR-2、TRPV4、P2X3、n NOS的蛋白和mRNA水平的改变趋向恢复至正常,有助于维持神经元正常功能。

HET0016对延迟性亚低温保护氧糖剥夺-复氧复糖离体神经元的强化效应

目的探讨HET0016对延迟性亚低温保护氧糖剥夺-复氧复糖(oxygen-glucose deprivation and restoration,OGD/R)离体神经元的强化效应。方法新生24~48h的SD大鼠12只,随机分为对照组、氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)组、OGD/R-亚低温(OGD/R-mild hypothermia,OGD/R-HM)组、OGD/R-HM-HET0016(OGD/R-HM-HET)组各3只,均分离海马神经元细胞培养7d,制备海马神经元OGD/R模型。对照组应用3mL含葡萄糖earle's平衡盐溶液正常条件下培养2h后更换正常培养液继续培养28h;OGD组应用3 mL无葡萄糖平衡盐,37℃、体积分数1%氧气培养箱中培养2h后更换正常培养液继续培养28h;OGD/R-HM组应用3mL无葡萄糖培养液、体积分数1%氧气培养箱培养2h后更换正常培养液,37℃、体积分数5%CO2培养箱中复氧4h后亚低温处理24h;OGD/R-HM-HET组于复氧前加入HET0016,调整终浓度1μmol/L,余处理同OGD/R-HM组。应用流式细胞仪检测4组细胞凋亡率。结果流式细胞仪检测结果显示,神经元细胞凋亡率在OGD组[(29.59±0.60)%]、OGD/R-HM组[(19.89±0.39)%]、OGD/R-HM-HET组[(14.17±0.25)%]均高于对照组[(1.63±0.42)%](P<0.05),且OGD组高于OGD/R-HM组和OGD/R-HM-HET组(P<0.05),OGD/R-HM组高于OGD/R-HM-HET组(P<0.05)。结论 HET0016对缺血缺氧4h后实施的亚低温保护离体OGD/R神经元具有一定的强化效应。