采用组合策略提高灰色链霉菌胰蛋白酶在毕赤酵母中的表达

胰蛋白酶是一种重要的工业酶,广泛应用于皮革加工、食品加工和医药等领域。该研究从菌株改造及发酵条件优化两方面提高了灰色链霉菌胰蛋白酶(Streptomyces griseus trypsin,SGT)在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的发酵产量。首先,分析了4种分子伴侣(Cne1、Bmh2、Ssa4和Vhb)和2种转录因子(Yap1、Aft1)对SGT在P.pastoris GS115中表达的影响。摇瓶发酵结果显示,与转录因子Aft1共表达时SGT酶活力较对照菌提高了19.71%,达到217.30 U/mL;其他转录因子或分子伴侣的共表达降低了SGT产量。其次,确定了菌株PP-SGTm/Aft1的最适生长pH和最适诱导pH分别为5.5和6.5。最后,优化了PP-SGTm/Aft1在5 L罐中诱导产酶过程中流加混合碳源(甲醇-山梨醇)的比例。结果显示,当补加的m(甲醇)∶m(山梨醇)=20∶0.5时,5 L罐SGT酶活力达到了2667.24 U/mL(144 h),较仅流加甲醇酶活力提高了20.1%。研究结果将为SGT工业化发酵生产提供重要基础数据。

浅议2008年《建设工程工程量清单计价规范》的变化对财政投资评审工作的影响

1引言财政投资评审工作是财政职能的重要组成部分,财政部门对财政投资项目的概算、预算、结算、竣工财务决算进行评审,是财政职能的体现。财政投资评审机构对财政性资金投资项目,依据法律法规。

谈政府投资项目在设计阶段的造价控制

近年来，随着我省经济的发展，政府在基本建设投资方面逐年加大，因此做好财政投资项目的投资控制，进一步规范政府投资管理，有效提高政府投资效益。政府投资控制包括项目决策、设计、采购、施工、竣工投产的全过程监督管理，要控制项目投资。必须从源头开始，即从项目决策和项目设计开始，是项目投资控制的关键。笔者结合从事财政投资评审工作的实际，谈谈政府投资项目在设计阶段的造价控制。