济生乌梅汤保留灌肠联合nCRT治疗局部进展期直肠癌的疗效观察

目的探讨济生乌梅汤保留灌肠联合直肠癌新辅助放化疗(nCRT)治疗局部进展期直肠癌的疗效,以及对放射性肠炎的防治效果,以期为临床治疗提供参考。方法选取2020年1月—2023年12月重庆市中医院普外科收治的直肠癌患者47例为研究对象,采用随机数字表法将患者分为观察组(n=24)和对照组(n=23)。观察组患者治疗方案:卡培他滨+奥沙利铂方案化疗联合放疗(CapeOX-CRT)+济生乌梅汤保留灌肠。对照组患者治疗方案:CapeOX-CRT+安慰剂保留灌肠。比较2组患者放疗前后血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。比较2组患者新辅助治疗后病灶病理缓解情况,指标包括cTNM、ypTNM分期、美国国家综合癌症网络(NCCN)肿瘤消退分级(TRG)。比较2组患者同步放化疗完成后不同级别急性放射性直肠炎的发生情况。结果放疗前,2组患者IL-6、IL-8、TNF-α及SOD水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。放疗后,2组患者IL-6、IL-8、TNF-α水平均高于放疗前,但观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。放疗后,观察组患者SOD水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者放射性肠炎发生率、重度放射性肠炎发生率均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组患者cTNM、ypTNM、TRG分级比较,差异无统计学意义(P>0.05)。通过对比2组患者大体标本,可以观察到对照组患者肠壁黏膜及其系膜充血水肿较观察组明显,同时HE染色可以看到对照组患者标本肿瘤组织间隙大量炎症细胞浸润,观察组患者标本组织疏松,炎症细胞散在分布。结论济生乌梅汤保留灌肠可以显著降低nCRT治疗过程中患者放射性肠炎的发生率,减少患者治疗过程中的不适感,进而提高患者的依从性,值得临床推广应用。

肝细胞癌合并门静脉癌栓细胞的分离、培养及其特征的研究

目的分别选取肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)合并门静脉癌栓(portal vein tumor thrombus,PVTT)和HCC无PVTT的原发灶组织进行原代细胞分离、培养,并将培养稳定的细胞继续体外培养并行体外实验,初步对同一患者的HCC有无PVTT的特征进行研究。方法取人HCC合并PVTT和HCC无PVTT的新鲜手术组织标本,利用酶消化法进行肿瘤细胞原代短暂培养并稳定传代。将得到稳定培养的细胞分为HCC无PVTT细胞组、HCC合并PVTT细胞组和PVTT细胞组,分别简称为HCC-PVTT(-)细胞组、HCC-PVTT(+)细胞组和PVTT细胞组。以流式细胞术检测仪检测CD90+细胞含量,采用q RT-PCR、Western blot法检测细胞培养后的HCC干细胞相关基因及其蛋白的表达。用Transwell小室检测细胞的侵袭性。结果成功培养出原代的HCC细胞和原代PVTT细胞,并可稳定地传代。细胞表面标志物的干细胞含量、干细胞相关基因及其蛋白表达量及侵袭性均表现为PVTT细胞组>HCC-PVTT(+)细胞组,HCC-PVTT(+)细胞组>HCCPVTT(-)细胞组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 HCC及PVTT组织中均存在CD90+肝癌干细胞,干细胞干性越强的原发灶具有更强的侵袭和转移能力。

P13K／AKT信号通路对肝癌细胞MHCC-97H中CD90＋干样细胞的影响

目的探讨P13K／AKT信号通路对肝癌细胞MHCC-97H中CD90＋干细胞比例及干细胞特性的影响。方法流式细胞术检测MHCC-97H细胞中流式抗体标记的CD90＋细胞含量。P13K／AKT通路抑制剂LY294002处理MHCC-97H细胞后，用流式细胞术分析MHCC-97H细胞中的CD90＋干样细胞含量的变化，Westernblot检测其相关蛋白的表达。平板克隆形成实验检测LY294002对MHCC-97H细胞中CD90＋亚群和CD90-亚群克隆能力的影响。比较不同浓度梯度的CD90＋亚群和CD90亚群在裸鼠皮下成瘤的能力，以及加入LY294002后成瘤能力的变化。免疫组织化学检测CD90＋亚群和CD90-亚群形成的瘤体中干细胞相关抗体CD90、SHP2及AKT和磷酸化-AKT（p-AKT）蛋白在加入抑制剂前后分别的变化情况。对数据进行t检验。结果MHCC-97H细胞中存在CD90＋肝癌干样细胞，经过LY294002处理后，肝癌干样细胞比例由2．98％±0．08％下降为0．78％±0．08％（t=33．680，P〈0．01）。LY294002可以显著降低CD90＋亚群的克隆能力，用药前后分别为95．13％±3．78％和61．82％±7．23％（t=7．617，P〈0．01）；对CD90亚群的克隆能力影响不明显。LY294002能降低CD90＋亚群的成瘤能力和相关肝癌干细胞CD90、SHP2和p-AKT蛋白的表达水平，但对AKT蛋白表达水平影响不大；对CD90-亚群影响不明显。结论MHCC-97H细胞中的CD90＋细胞具有干细胞特性，且依赖P13K／AKT信号通路。