乙醇降解乳酸菌的筛选、鉴定及解酒防醉功效评价

该研究采用传统培养分离法从传统发酵食品奶疙瘩样品中分离乳酸菌,通过体外降解乙醇试验筛选高效降解乙醇功能的菌株,通过形态学观察、生理生化实验及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,并对其进行安全性评价、耐逆性试验,以及体内小鼠防醉解酒功效试验。结果表明,筛选鉴定出一株乙醇降解率高(13.38%)、乙醇耐受能力强(耐受体积分数12%乙醇)的乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)RH2712,其对氨苄西林、青霉素、亚胺培南、氯霉素敏感,溶血性安全;对酸和胆盐耐受力强,在pH 3.0的条件下活菌对数值几乎不变,延迟时间为2 h,在1.5%胆盐含量下培养4 h后活菌对数值达到8.72,延迟时间仅为0.5 h,在人工模拟胃液条件下处理3 h后活菌对数值仍能达到7.14。乳酸片球菌RH2712在小鼠试验中表现出明显的防醉解酒的功效,且活菌数为1×10^(8)~1×10^(9)CFU/m L时解酒功能强于美他多辛。

一株具有降血糖功能的鼠李糖乳酪杆菌RH0121筛选及其益生特性研究

以商业菌株鼠李糖乳酪杆菌LGG作为阳性对照,从婴儿粪便中筛选出具有良好抑制α-葡萄糖苷酶和较好耐逆性能力的菌株。结果显示,14株菌种中HCS0053、RH0121、RE2153、RH44844株菌对α-葡萄糖苷酶具有较高的抑制作用,其抑制率分别为29.46%、31.49%、30.10%、29.43%,其中菌株RH0121可同时抑制α-淀粉酶的活性。经过对菌株RH0121的形态特征、生理生化特性研究及16S rDNA检测,鉴定该菌株为鼠李糖乳酪杆菌(Lacticaseibacillus rhamnosus)。测定鼠李糖乳酪杆菌RH0121的耐逆性,其耐酸、耐胆盐及在胃液条件下有较高的存活率。鼠李糖乳酪杆菌RH0121为具有良好的胃肠液耐受能力的潜在降血糖功能菌株。

罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001培养方法优化及改善睡眠功能研究

为了优化罗伊氏粘液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCS02-001的培养方法,并探究其助睡眠功能,以γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的产量为考察指标,通过单因素实验、响应面实验和小鼠实验进行条件筛选和功能评价。在培养温度37℃,培养时间24 h,初始pH 6.5时,罗伊氏粘液乳杆菌的GABA产量为5.58 g·L^(-1)。直接睡眠实验中小鼠均未出现直接睡眠现象,延长戊巴比妥钠催眠小鼠的睡眠时间实验中,高剂量组的小鼠睡眠时间有效延长,戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验结果显示高剂量组的小鼠入睡率高达40%,巴比妥那睡眠潜伏期实验显示高剂量组的小鼠减少了睡眠潜伏期,可与巴比妥钠协同发挥作用。结果表明罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001具备助睡眠的作用。

决明子菊花本草酵素的制备及降血压作用研究

优化决明子菊花本草酵素发酵工艺,并探究其降血压功能。以ACE抑制率为响应值,以发酵时间、发酵温度、接种量为探究指标,通过单因素试验和Box-Behnken试验优化发酵工艺。利用大鼠灌胃试验、测定大鼠的体重、动脉的收缩压和舒张压变化,根据灌胃不同周期探究大鼠血压变化。结果表明:发酵工艺优化为发酵时间72h、发酵温度37℃、接种量7.5%,以此制备的酵素ACE抑制率可达49.34%。大鼠灌胃试验结果显示,决明子菊花本草酵素对大鼠体重不产生影响,未对正常大鼠有降血压作用,对自发性高血压大鼠的血压具有辅助下调作用。表明决明子菊花本草酵素具有辅助降血压作用,其开发和应用具有广阔的市场。

具有分解嘌呤核苷能力的益生菌菌株筛选

目的 在不同的肠道菌群及奶制品样品中筛选益生菌菌株,对其耐酸和耐胆盐能力、分解嘌呤核苷能力进行评价,为后续研发治疗高尿酸血症益生菌制剂提供依据。方法 采集内蒙古地区及巴马长寿村的健康婴儿肠道菌群或奶豆腐、奶疙瘩制品,通过选择性培养基划线培养、镜检及16S rDNA测序的方式筛选益生菌菌株。通过耐酸、耐胆盐试验,模拟胃液和模拟肠液筛选出对胃肠道环境耐受能力强的菌株并通过电镜观察其形态。再进一步通过分解嘌呤核苷能力检测确定分解能力最优的菌株。结果 在8个样本中筛选出23株益生菌,对其胃肠耐受能力进行检测后发现筛选出了8株耐受能力较强的益生菌菌株,分别为鼠李糖乳酪杆菌RH01103,罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001,植物乳植杆菌RH03010,动物双歧杆菌乳亚种RH04020,发酵粘液乳杆菌RH08050,副干酪乳酪杆菌HCS17-040,乳酸片球菌RH27102和戊糖片球菌RH34011。通过对分解嘌呤核苷能力检测,发现与未接种益生菌的空白对照组相比,罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001和副干酪乳酪杆菌HCS17-040对肌苷和鸟苷的分解能力最显著(P=0.000 2, P<0.000 1)。结论 8个样本筛选出的23株益生菌中罗伊氏乳杆菌HCS02-001和副干酪乳杆菌HCS17-040的胃肠耐受能力最强,分解嘌呤核苷效率最高。

具有抗幽门螺杆菌能力的乳酸菌菌株筛选

目的在8株乳酸菌中筛选能够抗幽门螺杆菌感染的乳酸菌菌株,为后续研发治疗幽门螺杆菌感染的益生菌制剂提供依据。方法在8株乳酸菌菌株中,通过对幽门螺杆菌抑菌率的检测及构建人胃腺癌细胞感染模型检测8株乳酸菌对幽门螺杆菌的抑制作用,以及对尿素酶活性的检测判断8株菌的抗幽门螺杆菌的能力。结果在抑菌试验中,植物乳植杆菌HCS03-001(t=2.938,P=0.008)和副干酪乳酪杆菌HCS17-040(t=3.864,P=0.006)上清液的抑菌作用较强;植物乳植杆菌HCS03-001、罗伊氏粘液乳杆菌RH02100、副干酪乳酪杆菌HCS17-040能够降低幽门螺杆菌对AGS细胞的黏附能力;通过幽门螺杆菌菌悬液与乳酸菌菌悬液共培养,发现植物乳植杆菌HCS03-001(t=6.257,P<0.001)、副干酪乳酪杆菌HCS17-040(t=5.873,P=0.005)抑制尿素酶活性的作用更强。结论植物乳植杆菌HCS03-001和副干酪乳酪杆菌HCS17-040具有抗幽门螺杆菌感染的能力。

一种后生元工艺优化及抑菌特性的研究

目的 优化后生元的制备工艺,分析后生元发酵液中有机酸成分,探究其抑菌特性。方法 通过单因素和响应面试验法对后生元的制备进行优化,应用高效液相色谱仪分析后生元的有机酸成分,利用牛津杯琼脂扩散法探究后生元抑菌特性。结果 后生元制备工艺选择发酵时间20 h、发酵温度37℃和初始pH值6.2为最优条件,发酵上清液pH值为3.4。后生元发酵上清液中的有机酸中总量为4 974.68 mg/L,苹果酸含量(2 783.55 mg/L)占比最高。后生元经过稀释溶解处理后,对阴道加德纳菌、白色念珠菌、大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌均呈现抑制作用。结论 后生元具有明显的抑菌作用,有望用于抑菌作用产品的开发,为致病菌引起的疾病防治药物的筛选提供了新方向。