包封姜黄素的RAW264.7细胞外泌体的分离制备及鉴定

利用姜黄素(Curcumin, Cur)和小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(mouse leukemia cells of monocyte macrophage, RAW264.7)外泌体(Exosome, Exo),制备装载Cur的Exo(Exo-Cur),并进行生物学鉴定。方法 采用RAW264.7细胞与Cur共培养技术获得细胞上清液,利用梯度超速离心法从细胞培养上清液中分离出Exo,通过纳米粒径、表面电荷、负染透射电镜和蛋白质印迹(Western blotting, WB)实验进行综合鉴定。结果 分离得到的Exo-Cur直经为120nm,带电荷为-11.8mV。在透射电子显微镜下可见其呈圆形、卵圆形和杯盘状囊泡。Exo表达特异性标志蛋白CD63和Alix,不表达Calnexin。结论 通过Cur与RAW264.7共孵育可以成功获得Exo-Cur,为载药Exo的作用机制及其在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)方面的转化应用研究奠定坚实的基础。