利用CRISPR/Cas9系统构建SIRT1基因敲除的K562细胞株

目的构建去乙酰化酶SIRT1基因敲除的K562单克隆细胞株,研究SIRT1基因对细胞增殖的影响。方法设计靶向SIRT1酶活性中的sgRNA编码序列,构建CRISPR/Cas9载体并转染K562细胞,嘌呤霉素筛选后单克隆化并扩增;采用基因组测序、PCR和免疫印迹的方法进行基因敲除效果鉴定;对选定的SIRT1基因敲除的单克隆做生长曲线检测。结果目标质粒测序符合,质粒转染细胞后检测到基因组靶序列位置杂合峰,获得SIRT1基因敲除的单克隆3个,SIRT1基因敲除导致细胞增殖明显减缓。结论成功构建了SIRT1基因敲除的细胞株,该细胞可作为血液系统疾病研究的有力工具。

依托高等医学院校平台,推进提升新建直属附属医院医学教育教学研究的对策探讨

高等医学院校是医学教育改革研究的前沿阵地,而医院则是医学教育改革的实践基地。目前国家在三级公立医院绩效考核指标(以下简称“指标”)和直属附属医院评审标准中均对医学教育研究此项有一定占比的要求。故医学院校的直属附属医院开展医学教学改革和研究,对提高医院教学水平和专业服务水平有着重要的推动作用。此文章讲述了新建直属附属医院目前开展医学教育教学研究的现状及存在的问题,并针对性地提出了如何借助医学院校的各种平台、资源,为医院提高医学教育教学研究的质量提供了新思路与对策。

西地那非与硫酸镁联合对新生儿持续性肺动脉高压的有效性评价

目的:观察研究西地那非与硫酸镁合用在治疗新生儿持续性肺动脉高压(PPHN)方面的临床疗效。方法:选取就诊的PPHN患者100例作为临床研究对象,并随机分为A组、B组,A组采取西地那非疗法,B组采取西地那非联合硫酸镁疗法,对比两组患者治疗前后各项指标的变化以及总体治疗效果。结果:两组患者在治疗后各项指标均有所好转,B组治疗方法较A组能够更快改善动脉二氧化碳分压(Pa CO2)、动脉血氧分压(Pa O2)和下降肺动脉压力(SPAP),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:西地那非与硫酸镁合用在治疗PPHN方面的临床效果显著,安全可靠方便,值得大力推广。

阿奇霉素联合热毒宁注射液治疗小儿支原体肺炎的疗效研究

目的:探讨阿奇霉素联合热毒宁注射液治疗小儿支原体肺炎的临床疗效及安全性。方法:选择218例小儿支原体肺炎患者作为研究对象,采用随机数字表法将所有患者分为治疗组与对照组,每组109例。治疗组患者给予阿奇霉素联合热毒宁注射液治疗,对照组给予阿奇霉素治疗,以临床治疗有效率、发热消失时间、咳嗽消失时间、肺部啰音消失时间以及不良反应发生率作为观察指标对比两组患者的临床疗效。结果:治疗组的临床治疗有效率明显高于对照组,发热消失时间、咳嗽消失时间、肺部啰音消失时间明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组的不良反应发生率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。说明治疗组治疗小儿支原体肺炎的疗效明显好于对照组。结论:阿奇霉素联合热毒宁注射液治疗小儿支原体肺炎的疗效确切,不良反应少,安全性高,值得在临床上大力推广使用。

血清氨基末端B型利钠肽前体和血电解质对小儿热性惊厥的诊断价值

目的观察血清氨基末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)和血电解质(钠、钾、钙、氯)对小儿热性惊厥的诊断价值。方法选取2017年3月-2018年3月广东医科大学顺德妇女儿童医院/佛山市顺德区妇幼保健院收治的热性惊厥患儿50例作为惊厥组,另选取同期高热不伴惊厥患儿50例作为高热组,健康儿童50例作为对照组,比较3组血清NT-proBNP、钾、钠、钙、氯水平。结果惊厥组血清NT-proBNP水平高于高热组和对照组(P <0.05),高热组与对照组血清NT-proBNP水平比较无明显差异(P> 0.05)。惊厥组血清钠浓度低于高热组和对照组(P <0.05),高热组与对照组血清钠浓度比较无明显差异(P> 0.05)。3组血清钾、钙、氯浓度比较差异均无明显差异(P> 0.05)。结论小儿热性惊厥患儿血清NT-proBNP水平升高,血清钠浓度降低,监测NT-proBNP水平及电解质的变化对病情的判断及治疗均有重要临床意义。

思密达联合思连康治疗小儿腹泻的临床效果研究

目的探讨思密达联合思连康治疗小儿腹泻的临床效果及注意事项。方法选取佛山市顺德区妇幼保健院2011年2月-2013年4月间收诊的小儿腹泻268例为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和治疗组,对照组134例患者给予思密达治疗,治疗组134例患者给予思密达联合思连康治疗,以治疗有效率、大便好转时间、止泻时间、退热时间、住院时间,以及不良反应发生率为观察指标,对比两组患者的治疗效果。结果治疗组的治疗有效率高于对照组,大便好转时间、止泻时间、退热时间、住院时间均短于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);治疗组不良反应发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论与对照组比较,思密达联合思连康治疗小儿腹泻的效果确切。

新生儿肺炎克雷伯菌对β内酰胺类抗生素的药敏分析

目的测定肺炎克雷伯菌对β内酰胺类抗生素的药物敏感性,为临床用药提供参考。方法对552例住院的肺炎新生儿,经气管插管吸取下呼吸道分泌物作细菌培养,用VITEK32全自动微生物鉴定仪进行药物敏感试验。结果共检出革兰阴性菌192株,其中肺炎克雷伯菌84株,占43.7%,该菌对氨苄西林及阿莫西林耐药性最高,为95.2%,其次为替卡西林、头孢塞吩、头孢呋辛、头孢他定、头孢吡肟、头孢西丁、对它们的耐药性均超过50%,对哌来西林-他唑巴坦的耐药率为21.6%,对亚胺培南、美罗培南的耐药率为0。超广谱β内酰胺酶(ES-BLs)的检出率为21.6%,阳性菌株对头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢西丁、替卡西林的耐药性明显高于ES-BLs阴性菌株,差异有显著性(P<0.05)。结论新生儿肺炎克雷伯菌对碳烯类抗生素哌来西林-他唑巴坦的敏感性高,产生ESBLs是革兰阴性杆菌对β内酰胺类抗生素耐药的原因之一。

支气管肺发育不良早产儿血清血管内皮生长因子及人基质金属蛋白酶-9的变化

目的探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)及人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的动态变化对支气管肺发育不良(BPD)早产儿判断的意义。方法 62例早产儿,根据患儿生后28 d是否需要氧疗以及胸片结果分为BPD组(28例)及对照组(34例,非BPD患儿),用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定血清VEGF及MMP-9。BPD患儿根据分期分为轻症BPD组和重症BPD组,观察血清VEGF及MMP-9变化。结果生后第7、14天,BPD组血清VEGF(12.64±3.12)、(10.25±1.12)pg/ml低于对照组、血清MMP-9(24.60±6.32)、(31.60±7.28)ng/ml高于对照组(P<0.05),重症BPD组血清VEGF(10.64±1.13)、(8.25±1.02)pg/ml低于轻症BPD组、血清MMP-9(27.60±7.32)、(35.60±6.28)ng/ml高于轻症BPD组(P<0.05)。结论动态测定早产儿血清VEGF、MMP-9对BPD的判断有一定的参考意义,且利于区分BPD的严重程度。

早产儿脑损伤的相关因素分析

目的分析早产儿脑损伤的影响因素。方法对2006年1月至2007年10月我院收治的出生时胎龄小于36周的268例早产儿在生后7d内行头部B超检查，并分析相关临床资料。结果130例早产儿存在脑损伤，脑损伤的发生率为48．5％，其中脑室出血116例，发生率为43．3％，脑室周围自质软化38例，占14．2％。轻度和重度脑损伤发生率分别为23．5％、13．6％。脑损伤发生与下列因素有关：胎龄小、低出生体质量、窒息、肺透明膜病、呼吸暂停、呼吸衰竭、肺出血、低血糖、感染、低血压、凝血异常、胎膜早破以及宫内感染。结论脑室出血以及脑室周围自质软化在早产儿中比较常见，其发生与多种因素有关。临床上应避免或治疗引起脑损伤的因素，头部B超可对早产儿脑损伤做出早期诊断。

脑白质损伤早产儿血清髓鞘碱性蛋白和S100B蛋白的变化及与预后的关系

目的探讨脑白质损伤（periventricular leukomalacia,PVL）患儿血清髓鞘碱性蛋白（ myelin basic protein, MBP）及S100B蛋白（S100B protein，S100B）的动态变化及其与患儿预后的关系。方法对2007年11月至2008年7月我院住院的78例PVL早产儿（PVL组）和43例正常早产儿（正常对照组），分别在其生后第1、3、7、14天测定血清中MBP及S100B含量。30例正常早产儿及69例PVL患儿出院后每3个月随访1次，直至纠正胎龄至1岁，用Gesell发育量表测定其智力以及运动发育情况。结果（1）PVL组患儿血清MBP于生后第1天升高[（7．61±1．78）μg／L]、第3天达峰值[（14．53±3．12）μg／L]，后随病情好转，逐渐降低；与正常对照组比较，PVL组患儿在生后第1、3、7、14天血清MBP水平均明显高于正常对照组（P〈0．05）。（2）PVL组患儿血清S100B水平在生后第1、3、7天明显升高[（3．82±0．68），（4．41±0．91），（5．78±1．54）μg/L]，第7天达峰值，与正常对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；至生后第14天时，S100B明显降低，两组比较已无明显差异（P〉0．05）。（3）PVL组患儿生后第7天血清S100B、MBP持续升高者，随访至1岁时其发育商比生后第7天血清S100B及MBP明显下降者落后；也明显落后于正常早产儿（P〈0．05）。结论PVL患儿生后血清MBP及S100B水平与病情严重程度相关。如患儿血清MBP及S100B持续升高超过7d，则发育商明显落后，预后不良。

固尔苏及鼻塞间歇正压通气治疗新生儿严重呼吸窘迫综合症

【目的】评价鼻塞间歇正压通气(intermittent positive-pressure ventilation,IPPV)及肺表面活性物质(固尔苏)对新生儿严重呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome,NRDS)的治疗作用,并与常规IPPV比较。【方法】18例患RDS的新生儿(III级和IV级)经气管内给予固尔苏[(100 mg/(kg.dose)]后,改鼻塞IPPV进行治疗,另25例RDS患儿给予同样剂量固尔苏后,予常规IPPV治疗,比较两组患儿血气变化,肺部感染,肺出血,气胸及慢性肺病的发生率,吸氧及住院时间和治愈率。【结果】治疗后6,12,24 h,两组患儿的血气均明显改善,两组比较,差异无显著性。而鼻塞IPPV组患儿的肺部感染及慢性肺病的发生率明显低于常规IPPV组,吸氧时间也少于常规IPPV组。两组的住院时间、肺出血及气胸的发生率无明显差异。【结论】鼻塞IPPV及固尔苏能有效地治疗严重地NRDS,与常规IPPV比较,具有肺部感染及慢性肺病发生率低,氧疗时间少等优点。