Frankia基因组DNA提取及其PCR带型

本文采用溶菌酶法、CTAB法、微波（MW）法及CTAB＋MW法等4种方法提取Frankia菌CpIl基因组DNA。结果表明四种方式均可满足试验要求，其中以CTAB法及微波法最为有效。在比较提取方法与PCR带型间的关系中，发现提取上的差异不影响PCR带型的变化。

Frankia菌的遗传多样性的RAPD研究

选用20个随机引物，对分自2个分类接种群的8株Frandia纯培养的总DNA进行随机扩增，其中引物OPW15和OPW16能扩增得到较为稳定的RAPD图谱．扩增产物分子量大都分布在0．5～4Kb之间．从稳定的RAPD扩增图谱看，Frankia菌间存在有丰富的遗传多样性；在选定适当引物情况下，能依据共同带将Frankia菌化归为同一分类接种群．

用REP-PCR DNA指纹鉴别Frankia菌

用4种方法提取CPI1菌基因组DNA，并进行了REP-PCR扩增，结果表明，提取方法不影响REP-PCR带型。对14株Frankia菌株作REP-PCRDNA指纹分析，并对之进行比较鉴别，证明REP-PCR指纹法能有效地实现菌株间的差异鉴别，其结果与DNA同源相关性所得结果具有良好的相关性。

Frankia共生固氮基因的分离与克隆

利用ＤＮＡ－ＤＮＡ杂交方法，分离细枝木麻黄的Ｆｒａｎｋｉａ菌株Ｃｏ０１的ｎｉｆ克隆ｐＣｃ１ＧＸ，赤杨内生菌株Ａｔ４的ｎｉｆ克隆ｐＡｔ１ＧＸ及沙棘的ＦｒａｎｋｉａＨｒ１８的ｎｉｆ克隆ｐＨｒ１８ＧＸ、ｐＨｒ１１－③ＧＸ。用基因功能互补法，从Ｆｒａｎｋｉａ菌株Ａｔ４的基因文库中分离到二个可能可互补豌豆根瘤菌ｎｏｄ基因功能的克隆ｐＡｔ２ＧＸ、ｐＡｔ３ＧＸ，并制作了ｐＡｔ２ＧＸ、ｐＡｔ３ＧＸ的亚克隆，予进一步实验，获得充分的证据证明ｐＡｔ２ＧＸ、ｐＡｔ３ＧＸ是否带有Ｆｒａｎｋｉａ菌株Ａｔ４的ｎｏｄ基因．

我真想长大

“哎哟,哎哟——”我给爸爸揉腰的手劲儿已经很轻了,但他还是疼得哼出声,这让我心里很不是滋味。我真想快快长大,帮爸爸多干点儿活,他就不会如此受罪了。