喹乙醇在鲫鱼体内的药物代谢动力学研究

采用高效液相色谱串联质谱法测定鲫鱼血浆中喹乙醇的浓度。选用健康鲫鱼,随机分成2组,每组20尾,以30mg/kg体重的剂量经口灌服给药,血浆用30g/L的三氯乙酸沉淀蛋白后测定其浓度,统计软件3P97处理血药浓度-时间数据。鲫鱼经口灌服喹乙醇后的数据符合一级吸收一室模型,主要药动学参数:T1/2kα为1.09h±0.14h;T1/2Ke为5.97h±1.06h;Tmax为3.25h±0.41h;Cmax为25.73mg/L±2.53mg/L;AUC为325.35mg/(L·h)-1±69.01。鲫鱼口服喹乙醇吸收迅速完全,消除较慢。

固相萃取/UPLC-MS/MS法检测饲料中18种喹诺酮类药物的研究

为了建立超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中18种喹诺酮类药物的分析方法，以0．1％乙酸乙腈提取饲料样品中的待测物，HLB柱净化，超高效液相色谱-串联质谱法测定，氘代同位素内标法定量。18种喹诺酮类药物在线性范围为0-1．0mg／L，线性关系良好，相关系数分别在0．9989-0．9999之间，方法的检测限为0．005-0．2mg／kg。在不同饲料中添加浓度范围为0．1-5．0mg／kg，平均回收率为43．0％-101％，相对标准偏差小于11．2％。结果表明，该方法灵敏、高效、抗干扰力强，适用于饲料中的18种喹诺酮类药物的测定。

风险分析在进口猪肠黏膜水解蛋白检验检疫监管中的应用

应用风险分析原理,识别进口猪肠黏膜水解蛋白潜在的生物性、化学性和物理性危害,对危害因素进行风险评估,针对性地提出风险管理措施,为制定我国进口猪肠黏膜水解蛋白检验检疫监管措施提供依据。

以读促写优化高中英语写作教学的探究

随着我国教育改革的快速进行,英语学科的教学思想与方法已经有了明显的创新。阅读与写作,是英语教学的重要内容。阅读,是学生获取语言信息的重要途径,写作,则是学生运用语言表达个人看法的重要方法。学生的英语写作能力,在一定程度上反映了其英语语言综合能力。将阅读与写作教学进行结合,以读促写,有利于高中英语写作教学的优化。

超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定饲料中残留的三聚氰胺

饲料样品经1%三氯乙酸-二甲基亚砜提取,Waters OasisMCX柱净化,超高效液相色谱分离,最终采用电喷雾串联四极杆质谱进行检测。结果表明,三聚氰胺在饲料中的含量范围为10～5000μg/kg时,线性关系良好（r〉0.99）。在10～100μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为83%～94%,相对标准偏差为4.2%～6.5%。该方法的检出限为10μg/kg。

高效液相色谱-电喷雾串联技术测定奶及奶制品中三聚氰胺和环丙氨嗪

试样经1%三氯乙酸-二甲基亚砜提取,Waters Oasis MCX柱净化,电喷雾串联四级杆质谱进行检测。本方法检测三聚氰胺、环丙氨嗪的线性范围为10～5000μg/kg,线性相关系良好(r>0.99);在10～100μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为86%～98%;相对标准偏差为3.8%～7.5%;方法检出限为10μg/kg。

超高效液相色谱-串联质谱法快速检测水产品中喹乙醇及其代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羟酸的残留

建立了水产品中喹乙醇（OQX）及其代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羟酸（MQCA）的超高效液相色谱串联质谱快速测定方法。试样经乙酸乙酯＋乙腈（1＋1，V／V）液液萃取提取和净化后，BEHC18UPLC进行分离，多反应选择离子检测。方法的回收率和变异系数分别在62．5％91．4％和2．6％-11．8％之间。本方法对水产品中喹乙醇和3-甲基-喹噁啉-2-羟酸的检测限均为1．0~g／kg。

液相色谱-串联质谱结合谱库检索法同时测定猪组织中12种类固醇激素

建立了猪组织中12种类固醇类激素(炔诺酮、雄诺龙、醛固酮、去氢睾酮、达那唑、去氢甲睾酮、甲基睾丸酮、诺龙、孕酮、康力龙、睾酮和丙酸睾酮)多残留的液相色谱-四极杆/线性离子阱串联质谱(QTrap LC-MS/MS)的检测方法。组织样品经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解提取,混合型强阳离子交换固相萃取小柱(MCX柱)净化后,以含0.1%(体积分数)甲酸的乙腈和水为流动相,经Venusil MP C18色谱柱(100mm×2.1mm,3μm)分离,按照多级反应监测(MRM)、信息相关采集(IDA)、增强子离子扫描(EPI),结合建立的12种类固醇类激素的标准谱图库检索的多步模式进行分析。结果表明,12种类固醇激素的线性范围为0.5～100.0μg/L,线性相关性良好(r>0.99);样品在5.0μg/kg添加水平下的平均回收率为72.0%～98.1%,相对标准偏差为3.1%～12.5%;方法检出限(S/N=3)为0.2～0.5μg/kg。实际样品检测结果表明,应用本方法可以实现对猪组织样本中类固醇类激素残留的定性定量分析,且具有灵敏、准确的特点。

液相色谱-串联质谱结合谱库检索测定猪组织中的9种β-兴奋剂残留量

建立了猪组织中9种β-兴奋剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、利托君、特布他林、班布特罗、妥布特罗、西马特罗和异舒普林)多残留的液相色谱-四极杆/线性离子阱串联质谱(QTrap LC-MS/MS)检测方法。样品经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解提取,液液萃取净化,以乙腈-甲酸水溶液为流动相,经C18柱分离后用QTrap LC-MS/MS进行多反应监测(MRM)、信息相关采集(IDA)、增强子离子扫描(EPI)和谱库检索分析。9种β-兴奋剂的线性范围为0.1～50.0μg/L,线性关系良好(r>0.99);样品中9种目标物在0.5、1.0和5.0μg/kg添加水平下的回收率为72.0%～95.1%,相对标准偏差为3.1%～12.1%;方法检出限为0.1～0.2μg/kg。实际样品检测结果表明,本方法可实现猪组织样本中β-兴奋剂残留量的灵敏、准确的定性和定量分析。

甲磺酸达氟沙星在鲫体内药物动力学及残留研究

【目的】研究甲磺酸达氟沙星(Danofloxacinmesylate,DFM)在鲫体内的药物动力学和残留消除规律。【方法】在试验水温20℃时,鲫以10mg·kg-1b.w的剂量单次经口灌服甲磺酸达氟沙星后,用液-液提取、反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定血浆和组织中DFM的浓度。盐酸氧氟沙星做为内标。房室模型分析表明,其药物时间数据符合有吸收二室模型,吸收、分布迅速,但消除缓慢,半衰期(T1/2Ka、T1/2α、T1/2β)分别为0.63、4.96、47.79h,最大血药浓度(Cmax)为3.23μg·ml-1,达峰时间(TP)为2.73h,药时曲线下面积(AUC)为154μg·h·ml-1。非房室模型分析表明,平均滞留时间(MeanResidenceTime,MRT)为58.56h。【结果】组织中药物浓度在测定时间里均显著高于血浆(P<s0.05),消除快慢依次为肾脏、肝胰脏、血浆、肌肉和皮肤,其消除半衰期分别为33、44、48、51、177h。与其它组织相比皮肤消除最慢,建议其作为DFM在鲫体内的残留靶组织。在20℃时,皮肤以100μg·kg-1为最高残留限量(maximumresiduelimit,MRL)建议休药期不低于23d。

超高效液相色谱-电喷雾串联技术测定猪组织中7种β-兴奋剂

2g猪组织样品经β-葡萄糖苷酸酶酶解,0.2mol/L高氯酸沉淀蛋白,用乙酸乙酯-异丙醇(6+4,V/V)和叔丁基甲醚提取,旋转蒸发器减压蒸干,正己烷脱脂后,样液用UPLC分离,电喷雾串联四级杆质谱进行检测,本方法研究的7种β-兴奋剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、利托君、特布他林、班布特罗和异舒普林)的线性范围为0.25～500μg/kg,线性相关系数r>0.99;0.5～10μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为75.2%～96.7%;相对标准偏差为5.6%～13.1%;方法检出限(LOD)为0.1～0.25μg/kg。

QuEChERS-GPC-GC/MS同时测定鱼肉中9种羟基类兽药残留

采用QuEChERS前处理方法和在线凝胶渗透色谱-气相色谱-质谱联用法(gel permeation chromatography-gas chromatography-mass spectrometry,GPC-GC/MS)快速测定鱼肉中9种羟基类兽药残留。采用在线凝胶色谱进行在线净化,除去鱼肉中大部分油脂,有效缩短了样品前处理时间,结合选择离子监测采集方式,可减少基质干扰,提高方法的选择性。样品经乙腈提取,分散基质固相萃取方式净化后,使用选择离子监测(SIM)模式检测,外标法定量。经方法学验证,9种羟基类兽药在0.5~20.0μg/L浓度范围内的线性关系良好,相关系数r大于0.99;样品的平均回收率为63.5%~90.2%,相对标准偏差为3.6%~15.4%,方法检出限为0.3~1.0μg/kg。将该方法应用于10批实际样品的检测,其中1批样品的氯霉素检测结果呈阳性,含量为6.1μg/kg。该方法灵敏度高、准确可靠,可用于鱼肉中9种羟基类兽药的定性定量分析。

洛美沙星在鲤鱼体内的药物动力学及残留

用高效液相色谱 (HPLC)测定方法研究洛美沙星在鲤鱼 (Cyprinuscarpio)体内的药物动力学和残留。洛美沙星以 2 0mg/kg体重单剂量口灌鲤鱼后 ,测定其血浆药物浓度 ,最低检测限为 0 0 5 μg/mL ,动力学模型符合开放性有吸收二室模型 ,药物动力学参数 :表观分布容积 (Vd/F)、吸收半衰期 (tl/ 2kα)、分布半衰期 (t1/ 2α)以及消除半衰期 (t1/ 2 β)分别为 5 2 1L/kg、 0 31h、 1 0 2h、 2 0 0 3h ,其药时曲线下面积(AUC)为 110 92 μg·h/mL。以相同剂量单次口灌鲤鱼后 ,在不同的天数测定了鲤鱼皮肤、肌肉和肝胰脏中洛美沙星的残留 ,在给药 12天后 ,洛美沙星在各组织中均能检测到且残留均低于 0 0 8μg/g ,结果表明洛美沙星在鲤鱼体内消除缓慢、残留期较长 ,休药期不低于 12天。

液相色谱-串联质谱结合谱库检索测定猪组织中13种氟喹诺酮类药物

采用MRM→IDA→EPI→谱库检索模式建立了猪组织中13种氟喹诺酮类药物的液相色谱-电喷雾串联质谱多残留检测方法,结合谱库检索功能同时实现了定性定量分析。组织样品经N,N-二甲基甲酰胺-乙腈混合溶液提取,Waters HLB柱净化,本方法13种氟喹诺酮类药物的线性范围为1.0～5000.0μg/kg,线性相关系良好(r>0.99);在2.0～20.0μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为81.6～114%;相对标准偏差为1.1～11.2%;方法检出限为0.1～0.5μg/kg。

LC-MS/MS法结合谱库检索测定猪组织中三聚氰胺及其同系物

采用MRM→IDA→EPI→谱库检索模式建立了猪组织中三聚氰胺及其同系物的液相色谱-电喷雾串联质谱多残留检测方法,结合谱库检索功能同时实现了定性定量分析。组织样品经2%三氯乙酸、10%乙酸铅和乙腈混合溶液提取,Sepucol ENVI-CARB柱净化,三聚氰胺及其同系物的线性范围为10~5 000μg.kg-1,线性关系良好（r〉0.99）;在10~100μg.kg-1添加水平范围内,平均回收率为94.2%~99.9%、相对标准偏差为3.8%~7.5%、方法检出限为2μg.kg-1。

一株炭疽杆菌无毒株的建立

目的 建立无毒炭疽菌株 ,为炭疽疫苗研究和免疫检测打基础。方法 用传统的高温减毒法 ,将当前用于生产炭疽疫苗的减毒菌株进一步减毒。结果 对筛选的一株炭疽杆菌AAT12 1株进行全面检定 ,证实它已失去其亲代株A16R所具有的 pXO1质粒 ,并因此失去了产生毒素的能力 ,成为炭疽杆菌“无毒株” ;同时也几乎完全失去了生成芽胞的能力 ;其它的生物和生化学性质未发现变化。结论 炭疽减毒株也可用高温减毒法进一步减毒为无毒株 ,以便有关研究中应用。

三聚氰胺在奥尼罗非鱼体内的药动学研究

采用高效液相色谱串联质谱内标定量法,研究内服给药途径下,三聚氰胺在奥尼罗非鱼Oreochrom is aureus×O.niloticus体内的药动学特征.按奥尼罗非鱼体质量2.0 mg/kg的剂量内服三聚氰胺后,其血浆中药物浓度-时间曲线关系符合一级吸收一室模型.三聚氰胺在奥尼罗非鱼体内的主要药动学参数:吸收半衰期(t1/2ka)为(0.24±0.14)h;消除半衰期(t1/2ke)为14.33 h;达峰时间(tm ax)为1.42 h,峰浓度(Cm ax)为0.26 mg.L-1,平均滞留时间(MRT)为18.01 h.三聚氰胺在奥尼罗非鱼体内的主要药动学特征为:吸收迅速,达峰时间短,消除比较缓慢.

Taqman探针荧光PCR法检测熊源性成分

为了对熊源性成分进行有效鉴定,本研究根据熊科动物线粒体DNA(mtDNA)序列,使用分子生物学软件Primer Express 3.0设计了一套特异性引物、探针,用以建立Taqman探针荧光PCR检测熊源性成分的方法。结果显示,所建立方法特异性强,15份熊属动物组织样品均出现特异性扩增曲线,20份阴性对照动物样品均未出现扩增曲线;方法灵敏度高,最低可以检测到10个拷贝数量级的重组质粒DNA,对熊胆粉稀释106倍后,仍可扩增出熊DNA;方法稳定性好,对相同的样品在不同时间进行2次重复检测,批内变异系数分别为0.88%、1.13%,批间变异系数为1.38%。结果表明,本研究建立的方法可应用于熊属动物组织及其加工品中的熊源性成分的检测。

XTT四唑鎓盐试验快速检测卡介苗活性

卡介苗生产中最重要的质检指标—活菌含量测定 ,传统固体培养计数方法时间需 2 1天以上 ,且结果有时不稳定、操作复杂。使用XTT[2 ,3 bis (2 methoxy 4 nitro 5 sulphenyl) (2H) tetrazolium 5 carboxanilide]做底物的四唑钅翁盐试验在活卡介菌的还原下快速显色 ,很好地反映出卡介苗活菌的浓度差异。实验观察在微孔培养板中反应经酶标仪测定的XTT试验非常简便易行 ,不受死亡细菌的影响 ,不受培养基的影响 ,实验重复性非常好 ,检测活性单位时间惊人地缩短为 2 4小时左右 ,检测活性范围大。此方法有潜力代替传统活菌计数法用于卡介苗生产中的活性单位测定。