枸杞多糖对2,4-二氯苯氧乙酸染毒大鼠海马神经元凋亡的保护作用

目的探讨枸杞多糖(LBP)对2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)染毒初断乳大鼠神经行为和海马神经元细胞凋亡的保护作用。方法SPF级初断乳SD大鼠48只,雌雄各半,随机分为Control组、2,4-D组、LBP组和2,4-D+LBP组各12只,旷场实验、高架十字迷宫观察实验大鼠行为学变化,试剂盒测定大鼠血清抗氧化酶活性,HE染色观察大鼠海马CA3区锥体细胞的形态,TUNEL荧光染色法观察海马CA3区神经元凋亡,免疫组织化学方法检测海马组织凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果(1)2,4-D组大鼠脑重和脑脏器系数降低,大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性降低,丙二醛(MDA)含量升高(P均<0.01);海马CA3区锥体细胞数减少,光镜下观察细胞间隙增宽,排列不整齐,细胞与周围组织联系疏松,部分胞核固缩呈三角形或不规则形;大鼠中央格停留时间延长,穿行格数、直立次数和修饰时间减少,进入开放臂次数减少,开放臂停留时间缩短,开放臂停留时间百分比降低(P均<0.05);(2)与2,4-D组比较,2,4-D+LBP组大鼠脑重和脑脏器系数增加,血清SOD和GSH-Px活性升高,MDA含量降低(P均<0.01);海马CA3区锥体细胞数量较2,4-D组增多,部分细胞恢复正常形态(P均<0.01);中央格停留时间缩短,穿行格数、直立次数和修饰时间均延长,进入开放臂次数增多,开放臂停留时间延长,开放臂停留时间百分比升高(P均<0.05);(3)TUNEL染色结果显示,2,4-D组大鼠海马神经元阳性细胞数增多,细胞凋亡率升高(P均<0.01),2,4-D+LBP组凋亡细胞数少于2,4-D组,呈现绿色或淡绿色荧光;(4)免疫组织化学方法发现2,4-D组大鼠海马组织Bcl-2表达降低,Bax表达升高,Bcl-2/Bax比值降低(P均<0.05),2,4-D+LBP组大鼠海马CA3区Bcl-2表达升高,Bax表达降低,Bcl-2/Bax比值升高(P均<0.05),神经元染色以胞浆有棕黄色物质沉积为主,也有胞膜或核膜染色。结论2,4-D染毒大鼠表现出抑郁和焦虑状态,大鼠血清抗氧化酶活性降低,大鼠海马CA3区锥体细胞受损,引起海马神经元细胞凋亡,LBP具有抗氧化和抑制海马神经元细胞凋亡的作用。

2018-2021年山东省平度市蚊虫监测及生态学特征分析

目的了解山东省平度市蚊虫种类、分布、密度和季节消长特征,为蚊虫及蚊媒传染病防控提供科学依据。方法2018-2021年每年1-12月,随机选取山东省平度市居民区、公园、医院、农户和牲畜棚等生境,采用诱蚊灯法监测蚊密度;每年5-10月份,随机选取居民区、公园/竹林、旧轮胎堆放地/废品站/工地等生境,通过双层叠帐法监测蚊密度。结果诱蚊灯法监测显示,2018-2021年共捕获雌蚊6549只,平均蚊密度为1.32只/(台·夜),以淡色库蚊为优势种群(占92.44%),其他依次为中华按蚊(占2.26%)、白纹伊蚊(占0.83%)和三带喙库蚊(占0.29%);居民区、公园、医院、民房和牲畜棚成蚊密度依次为1.50、1.00、1.44、0.50、2.63只/(台·夜),不同生境蚊密度间的差异无统计学意义(H=0.498,P=0.974),不同生境蚊种构成间的差异有统计学意义(χ^(2)=142.092,P=0.000)。双层叠帐法监测显示,2018-2021年共捕获雌蚊319只,均为白纹伊蚊,平均蚊密度为1.33[只/(顶·h)];居民区、公园/竹林、旧轮胎堆放地/废品站/工地平均蚊密度依次为1.38、1.50、2.00[只/(顶·h)],不同生境蚊密度之间的差异无统计学意义(H=0.081,P=0.960)。成蚊密度高峰集中在7-9月,季节性特征明显。结论2018-2021年平度市优势蚊种为淡色库蚊,蚊密度呈现明显的季节消长趋势,成蚊活动主要集中在7-9月份,存在登革热等蚊媒传染病暴发流行的风险。

基于PacBio SMRT测序技术分析食管癌特征性肠道菌群及其生物标志物

[背景]食管癌是常见的消化道肿瘤,中国是食管癌高发地区。有研究提示,肠道菌群与肿瘤等多种疾病的发生发展相关。受测序读长所限,传统的16S rDNA测序技术只能鉴定到属。[目的]本研究基于PacBio单分子实时(SMRT)测序技术在种水平筛选与食管癌相关的特征性微生物标志。[方法]招募首次诊断为食管癌的新发病例120例,和性别、年龄匹配的健康对照60例。采集所有研究对象的新鲜粪便样本。利用第三代测序PacBio SMRT技术对4例食管癌患者及1:1匹配的健康对照者样本进行16S rDNA全长测序,基于测序结果分析其肠道菌群结构差异。采用PICRUSt软件进行功能预测。通过线性判别分析和群落差异分析筛选差异肠道微生物进行大样本人群验证,识别食管癌相关肠道微生物。[结果]基于测序样本,α多样性分析中食管癌组的Ace、Chao1、Simpson Diversity、Shannon Wiener指数均高于健康对照组(P<0.05),β多样性分析显示食管癌组和健康对照组散点簇分离,二者肠道菌群结构存在差异。在门水平上,食管癌组肠道菌群中变形菌门、拟杆菌门、厚壁菌门丰度升高。在属水平上,食管癌组毛螺旋菌属、巴氏杆菌属、罗斯氏菌属和拟杆菌属相对丰度增加。在种水平上,食管癌组相对丰度增加的微生物是肠杆菌E.20、卵形拟杆菌V975、普氏栖粪杆菌等11种,丰度降低的微生物是皮氏罗尔斯通氏菌、肠杆菌未分类、唾液链球菌JIM87773种。PICRUSt功能注释后发现食管癌组与健康组在丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢(map00250)、肽聚糖生物合成(map00550)、叶酸一碳单位库(map00670)、硫胺素代谢(map00730)、氨基酸的生物合成(map01230)通路上存在差异。对验证人群的分析结果显示,与健康对照人群相比,食管癌人群的肠杆菌E.20、马赛拟杆菌的丰度升高,唾液链球菌JIM8777的丰度降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。建立受试者工作特征分析发现,肠杆菌E.20、唾液链球菌JIM8777、马赛拟杆菌联合诊断的曲线下面积(AUC)为0.779,高于单一诊断结果(AUC分别为0.610、0.608、0.659)。[结论]食管癌组的肠道菌群与健康对照组存在差异。肠杆菌E.20、唾液链球菌JIM8777、马赛拟杆菌的联合应用对食管癌的诊断具有潜在应用价值。