巢式聚合酶链反应快速检测血液标本中伤寒沙门菌的实验研究

目的建立一种检测血液中伤寒沙门菌的方法。方法根据伤寒沙门菌特异鞭毛基因设计两对引物 ,通过巢式聚合酶链反应 (PCR)扩增伤寒沙门菌DNA片断 ,扩增产物通过凝胶电泳进行分析。结果用伤寒沙门菌DNA系列稀释液进行试验 ,巢式PCR能够检出 10个伤寒沙门菌。 36份培养阳性标本 ,33份PCR阳性 ;6份培养阴性但临床高度可疑的伤寒病人标本PCR阳性 ;10份其它原因引起发热的临床标本均为阴性。结论巢式PCR能够快速、特异、准确地检出血液中的伤寒沙门菌。

淋球菌感染的培养诊断

诊断淋球菌感染最可靠的指征是分泌物培养阳性.该菌较难培养,要求分离培养基含有较丰富的营养物质,且需在空气湿度大、含3～10%CO2气体、温度为35～37℃的环境中孵育.我们对疑有淋球菌感染的病人,取生殖道分泌物进行培养,现将结果报告如下.

PCR-SSCP直接检测临床标本中的结核杆菌rpoB基因突变——附50例报告

目的:探讨聚合酶链反应单链构象多态性(PCRSSCP)直接检测痰标本中的结核杆菌核糖核酸聚合酶亚单位基因(ropB基因,该基因突变便形成结核杆菌利福平耐药株)突变在评价结核杆菌对利福平的耐药性方面的应用价值。方法:以结核杆菌H37RV株(标准菌株)为对照,应用PCRSSCP技术直接检测50例痰标本中结核杆菌及培养分离的结核杆菌的rpoB基因突变,并将PCRSSCP和细菌培养的结果进行比较分析。结果:以细菌培养作为参考方法,PCRSSCP直接检测50例痰标本中的结核杆菌ropB基因突变的敏感性和特异性分别是92%(23/25)和100%(10/10)。用于检测培养分离得到的35株结核杆菌,PCRSSCP的敏感性和特异性分别为96%(24/25)和100%(10/10)。结论:PCRSSCP操作简单、快速、准确,可望用于直接检测临床标本中的结核杆菌ropB基因突变,以评价结核杆菌是否对利福平产生耐药性。

细胞培养三种染色法检测沙眼衣原体

用细胞培养法对１６０ 例有淫乱史病人标本进行沙眼衣原体培养，后经免疫荧光法，Ｇｉｅｍ ｓａ 染色法和碘染法鉴定，结果表明， 免疫荧光法的敏感度最高 （４８／１６０， ３００％ ）， Ｇｉｅｍ ｓａ法次之 （４３／１６０， ２６９％ ）， 碘染色法较低 （３９／１６０， ２４４％ ），但后两者简便快速， 可以节省昂贵的试剂购置费用， 仍是有待发展的检测技术； 沙眼衣原体标本贮存以液氮最佳，在７ 天内，－ ７０°Ｃ是一个临界分离温度。

PCR-SSCP技术直接快速检测痰标本中结核分支杆菌rpoB,katG,ahpC基因突变的研究

目的应用PCR -SSCP技术直接快速检测痰标本中结核分支杆菌rpoB ,katG及ahpC基因突变 ,评价此方法用于结核分支杆菌利福平 (RFP)及异烟肼 (INH)耐药性试验的意义。方法以结核分支杆菌H3 7Rv为对照 ,30例耐RFP(单耐或多耐 )、2 1例耐INH(单耐和多耐 )的结核分支杆菌临床分离株及 10例敏感菌株 ;39例菌阳肺结核患者及 30例非结核性肺部疾病患者痰标本 ,采用PCR SS CP技术检测痰标本和菌株中的结核杆菌rpoB ,katG ,ahpC基因突变 ,并与药敏试验对照。结果PCR -SSCP检测痰标本中结核分支杆菌rpoB ,katG及ahpC基因突变的阳性率分别为 79% (31/ 39)、46 % (18/39)及 5 % (2 / 39)。结论PCR -SSCP可望成为直接检测临床痰标本中结核分支杆菌耐利福平及耐异烟肼的快速方法。

人类乳头状瘤病毒与肺癌病因关系的研究(二)

目的继续研究人类乳头状瘤病毒 (HPV)与肺癌发生病因的关系。简要讨论HPV的致癌机理。方法采用聚合酶链反应 (PCR)技术检测石蜡包埋的肺腺癌、支气管肺泡细胞癌、大细胞未分化癌、小细胞癌标本各 30份中的HPVDNA。结果 12 0份标本中 ,HPVDNA阳性率为 5 8% (7例 ) ,与肺鳞癌中的HPVDNA阳性率比较 ,差异有非常显著意义 (P <0 0 1)。结论HPV在肺癌发生中起了重要的作用。

人类乳头状瘤病毒与肺癌的病因关系研究(续)

为研究人类乳头状瘤病毒（HPV）与肺癌发生的病因关系，采用聚合酶链（PCR）技术对石蜡包埋肺鳞癌、肺腺癌、肺鳞癌组织旁鳞状化生上皮、正常支气管粘膜进行HPV6／11、8、16、18、31／33及35型检测。结果表明：4种组织中，HPVDNA的总检出率分别为58％、33％、80％和13％，其中以HPV16型及HPV18型所占比例最高，HPV感染与肺鳞癌和腺癌的发生有一定的联系，鳞状上皮化生似可视为癌前病变。

首次从非AIDS患者中分离出尿素酶阴性新生隐球菌

最近，作者等从一非ＡＩＤＳ又无免疫缺陷的新生隐球菌脑膜炎患者脑脊液中首次分离出一株尿素酶阴性新生隐球菌，经与尿素酶阳性的新生隐球菌和尿素酶阳性的白念珠菌反复对照，并经动物实验证明，经南京医科大学附属第一医院情报室联机检索，国际上未见类似报告。

应用聚合酶链反应快速检测支气管肺泡灌洗液中的结核菌

目的：本研究评价聚合酶链反应（PCR）技术检测支气管肺泡准洗液中结核杆菌DNA的作用。方法：应用PCR技术对161例（肺结核81例，非肺结核80例作为对照）支气管肺泡灌洗液（BALF）进行结核菌DNA检测。结果：结核组BALF的阳性率：PCR为69．l％、徐片抗酸染色为86％、培养为98％，PCR的阳性率与涂片和培养比较，差异有显著性（P＜0．01）。非结核对照组BALF的阳性率为：PCR2.5％，涂片0％，培养0％。结论：PCR技术测定BALF中的结核菌是诊断肺结核的一种快速、敏感、特异的方法，尤其适用于无痰的患者。

PCR反向膜杂交技术检测临床标本中结核分枝杆菌

目的 探讨结核分枝杆菌 (TB)PCR反向膜杂交技术的临床应用价值。方法 采用该技术对本院 30 0例确诊结核的或高度怀疑为结核分枝杆菌感染的病人标本、6 0例非结核住院病人标本进行检测 ,同时用培养镜检法、常规PCR法作对照试验。结果 PCR反向膜杂交法检出TB菌 176例、阳性率 (5 8.7% ) ,比培养镜检法 47例 (15 .7% )、常规PCR法 15 6例 (5 2 .0 % )检出率高 ,而对 6 0例证实无结核分枝杆菌的标本、几种方法检测均为阴性。结论 该技术能快速。

臭鼻克雷伯菌的生物学性状观察

采集慢性鼻炎患者鼻分泌物、痰、肺泡灌洗液、腹膜透析液、脓汁及尿液等标本分离培养出臭鼻克霍伯苗，经形态检查为G-杆菌，具有荚膜，在血平板及麦康凯琼脂平板上多数呈融合生长，生化试验MR、ONPG，阿拉伯糖，侧金盏花醇和肌醇试验等均为阳性;药敏试验表明对多种抗生素耐药，部分菌株对丁胺卡那、氯霉素敏感。

人类乳头状瘤病毒与肺癌的病因关系研究(三)

目的继续研究人乳头瘤病毒与肺癌的病因关系。方法采用多重聚合酶链反应 (PCR)技术 ,对 7种肺组织进行HPV8、HPV18及HPV35型检测。结果在鳞癌及其邻近鳞状化生上皮中 ,HPV18和HPV35的检出率无明显差异 ,肺鳞癌和腺癌中 ,两者亦无明显差异 ,在肺鳞癌和正常支气管粘膜中HPV18的检出率却有显著差异 (P <0 0 1)。结论HPV18和HPV35型感染与肺鳞癌和腺癌的发生有关 。

40株臭鼻克雷伯氏菌的分离鉴定及药敏分析

我院1987年8月至1991年5月从临床各科送检的标本中分离出40株臭鼻克雷伯氏菌(同一患者二次或以上仅统计为一株),现分析报告如下.1 材料与方法1.1 菌株来源本院耳鼻喉科诊断为急、慢性鼻炎患者的142份鼻分泌物中检出18株,检出率为11.8%,痰中检出13株、肺泡灌洗液、腹膜透析液。

聚合酶链反应反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌的临床意义

目的探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）反向膜杂交技术捡测临床标本中结核分支杆酋（ＴＢ）ＤＮＡ的价值。方法用ＰＣＲ反向膜杂交技术检测 ５２２例结核及６０例非结核患者临床标本中的ＴＢ－ＤＮＡ，同时用培养、抗酸染色涂片及常规ＰＣＲ法作对照。结果ＰＣＲ反向膜杂交法阳性率为８０．６％（４１１／６９０），培养为１８．１（１２５／６９０），镜检为１３．９％（９６／６９０），常规ＰＣＲ为５９．６％（４１１／６９０），ＰＣＲ反向膜杂交法与常规法比较（Ｐ＜０．０００１），差异有显著意义。ＰＣＲ反向膜杂交法阳性检出率高于常规ＰＣＲ（Ｐ＞０．０５），但差异无显著意义；该技术假阳性为零。结论ＰＣＲ反向膜杂交技术检测临床标本中ＴＢ－ＤＮＡ具有快速、高度特异性和敏感性，可为结核病的临床早期诊断提供一种新的病原学诊断手段。

细胞培养法检测沙眼衣原体的探讨

对细胞培养沙眼衣原体的三种检测方法进行了评价。结果显示单抗免疫荧光法的敏感度最高，Giemsa次之，碘染色法较低但简便快速；沙眼衣原体标本贮存以液氮最佳，－70℃7天内亦可较好地保持沙眼衣原体的活性。

人类乳头状瘤病毒与肺癌的病因关系研究

目的：研究人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）与肺鳞癌发生的病因关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测石蜡包埋肺鳞癌组织标本５０份，肿瘤组织旁鳞状化生上皮标本３０份，正常支气管粘膜３０份中的ＨＰＶＤＮＡ。结果：上述三种标本中，ＨＰＶＤＮＡ的检出率分别为２６％、３７％和１０％，其中以ＨＰＶ１６型所占比例最高。结论：结果表明ＨＰＶ感染与肺鳞癌的发生有一定的联系，鳞状上皮化生似可视为癌前病变。

应用聚合酶链反应检测泌尿生殖道淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体

应用聚合酶链反应（PCR）对300例性传播疾病患者进行淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体3种病原体的检测。共检出上述病原体211例，检出率70％；其中142例（67％）仅检出1种病原体，56例（26.5％）检出2种病原体，4例（1.9％）检出3种病原体；淋球菌、沙眼衣原体、解脲脲原体的检出率分别是31．3％、39．7％、17．7％。表明PCR技术是检测3种病原作敏感、特异、快速的方法。

PCR反向膜杂交技术检测乙型肝炎病毒

目的探讨PCR反向膜杂交技术在乙型肝炎病毒 (HBVDNA)检测中的应用。方法用PCR反向膜杂交技术定性检测 10 0例血清标本中的HBVDNA ,结果与常规PCR法和酶联免疫吸附测定 (ELISA)方法比较。结果 10 0例血清标本 ,本法阳性率为 5 3 0 % ,常规PCR法为 47 0 %。HBsAg(+)和HBeAg(+)与HBVDNA有很好的相关性。结论该技术能快速、敏感和高度特异地对PCR产物进行鉴定 ,亦可检测HBV的真实感染和复制情况 ,有助于乙型肝炎的临床诊断。