SOX7基因甲基化在骨髓增生异常综合征患者中的预后价值

目的探讨SRY7蛋白(sex determining region Y-box 7,SOX7)基因甲基化在骨髓增生异常综合征(myelodysplatic syndrome,MDS)中的预后价值。方法通过5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-2’-dC)处理及甲基化特异性逆转录-聚合酶链反应(MSP)发现细胞株(TPH-1和SKM-1)存在SOX7基因甲基化,再以161例MDS患者骨髓样本检测SOX7基因甲基化状态,评价其对预后的影响。结果 SOX7基因甲基化存在于THP-1和SKM-1细胞株中,并在5-aza-2’-dC处理后表达上调。59.6%(96/161)MDS患者存在SOX7基因甲基化,而6例正常人无SOX7甲基化。SOX7甲基化阳性率在MDS不同的世界卫生组织(World Health Organization,WHO)亚型中存在差异,有统计学意义(P=0.005);同时随着国际预后积分系统(international prognostic scoring system,IPSS)积分的增加,该甲基化阳性率呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.001)。生存分析提示,SOX7甲基化阳性患者与甲基化阴性患者相比,整体生存时间(overall survival,OS)明显缩短:甲基化阳性者中位生存时间为18.5个月,而甲基化阴性患者的中位生存时间为31.8个月,差异有统计学意义(P=0.012),但对白血病生存(leukemia free survival,LFS)时间无明显影响(P=0.056)。结论SOX7基因甲基化与MDS患者的OS相关,在MDS患者的发病和发展中起了重要作用。

原发性渗出性淋巴瘤1例报告

目的探讨原发性渗出性淋巴瘤(PEL)的临床、组织学特点。方法运用细胞形态学、免疫组化及流式细胞技术(FCM)方法研究1例经临床与病理确诊的PEL患者并结合文献进行讨论。结果该病的临床特点是有体腔积液如腹水、胸腔积液和心包积液,但没有可检测到的肿块样病灶,浆膜渗出液中含高度恶性的淋巴细胞。此病多见于HIV感染的患者,也可发生于HIV血清学阴性的患者。结论进一步对本病的病理特征,临床特点加深了解,对提高本病的鉴别诊断、治疗大有裨益。

外周血片涂抹细胞的实验室解决思路

目的探讨减少外周血片涂抹细胞产生的实验室解决思路。方法收集20例慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者的乙二胺四乙酸二钾抗凝血,使用血液分析仪及自动推染片机根据不同角度及速度自动上样制作外周血片,通过DM96全自动血细胞形态学分析仪进行阅片,计数涂抹细胞数量;在添加不同比例的胎牛血清处理后,比较涂抹细胞的数量变化。结果采用27°角、速度为140 m/s时制片涂抹细胞最理想。胎牛血清与外周血以1∶4的比例处理后,涂抹细胞明显减少。结论当外周血片出现大量涂抹细胞时,可通过选择合适的角度、速度及联用添加胎牛血清的方法来减少涂抹细胞的产生,从而为临床提供更为准确的分类计数结果。

以类白血病反应为首发表现的慢性中性粒细胞白血病二例并文献复习

目的:探讨慢性中性粒细胞白血病(chronic neutrophilic leukemia,CNL)的鉴别诊断及临床特征。方法:回顾性分析2例CNL患者的临床资料、骨髓形态学检查、病理活检及免疫组织化学标志特征,并结合国内外相关文献进行探讨。结果:2例CNL患者均为中老年男性,因白细胞计数升高就诊,外周血以成熟中性粒细胞为主,中性粒细胞碱性磷酸酶(neutrophil alkaline phosphatase,NAP)积分增高;骨髓中有核细胞增生明显活跃,伴中性分叶核粒细胞比例增高;BCR-ABL融合基因及JAK2 V617F基因突变均为阴性。例1患者经多次骨髓检查,且CSF3R T618I突变检测阳性后诊断为CNL,2年半年后其外周血象呈慢性粒-单核细胞白血病样改变,经3个月后因骨痛行胸椎切除术,病理检查提示粒细胞肉瘤,又经1个月后复查骨髓提示急性髓细胞性白血病,予地西他滨联合急性白血病标准方案诱导化疗,骨髓提示未缓解,该患者最终死于脑出血。例2患者经血常规及骨髓检查,考虑为类白血病反应,2年后因脾大加重伴贫血、血清单克隆性IgA-λ增高,复查骨髓提示CNL合并多发性骨髓病(multiple myeloma,MM),予万珂为主方案化疗后,MM、CNL完全缓解。结论:CNL是一种极其罕见类型的慢性白血病,其可与其他血液肿瘤并存,同时存在向AML转化的高风险。以CSF3R基因突变为特征的分子诊断标准,有助于CNL的诊治。

免疫球蛋白重/轻链检测在IgG型多发性骨髓瘤患者微小残留病监测中的作用

目的 观察完全缓解（CR）期IgG型多发性骨髓瘤（MM）患者中血清免疫球蛋白重/轻链（HLC）和游离轻链（FLC）表达水平的变化,探讨HLC在MM患者疗效评价中的敏感性和准确性.方法 选取20例治疗后疗效评估为CR的IgG型MM患者,采用全自动SPAplus特定蛋白分析仪（应用免疫透射比浊法）同时检测患者血清标本HLC及FLC的表达水平,结合其同期血清蛋白电泳（SPE）及免疫固定电泳（IFE）结果,分析HLC在血清免疫球蛋白检测中的敏感性和准确性;同时结合其临床疗效,比较rHLC （IgGκ/IgGλ比值）及rFLC（FLC κ/λ比值）异常与正常者之间的差异.结果 20例患者中男、女各10例,中位年龄56（35～70）岁.20例患者中6例rHLC异常,而rFLC正常;3例rFLC检测异常,而rHLC正常;11例rHLC和rFLC比值均正常.中位随访18个月,6例rHLC异常患者中,4例接受干预治疗者1例复发,未治疗的2例均复发,无病生存时间分别为9.0、3.0、3.0个月.3例rFLC异常患者中,2例接受干预治疗者均未复发,1例未治疗者复发,无病生存时间为1.5个月.11例rHLC和rFLC均正常患者未接受干预治疗,其中3例复发,无病生存时间分别为3.5、5.0、5.5个月.结论 HLC与FLC联合检测,有利于MM患者疗效评估及微小残留病监测的准确性,可以更有效地评估MM患者疾病状态.而rHLC、rFLC异常可提示患者预后不良,早期干预可提高其临床疗效,延长无病生存时间.

植物固醇血症1例患者血小板及肠道菌群改变

植物固醇血症(STSL)作为一种罕见病,其临床表现异质性大,极易漏诊、误诊。STSL经常被误诊为免疫性血小板减少症、Evans综合征或自身免疫性疾病继发的血小板减少,并接受类固醇或脾切除术等错误的治疗方案,导致未经及时有效的救治从而引起致命并发症的发生。本文报道1例伴ABCG8基因突变的STSL,43岁女性患者,主诉阴道异常出血,外院血常规显示血小板减少(9×10^(9)/L),大血小板比例为71.9%,给予激素、丙种球蛋白冲击治疗后,疗效欠佳。给予血小板促生成素治疗1周后,血小板升至正常,但巨大血小板比例仍高。同时患者自诉头晕、头痛,头颅磁共振增强成像提示为急性脑梗死可能。本例患者眼睑部可见黄色瘤,自幼鼻出血、皮肤黏膜易瘀斑、自月经来潮后月经量多,血脂分析及基因结果诊断明确。给予患者依折麦布为主的降脂方案,明显改善了患者血小板高反应性和肠道菌群稳态,目前病情稳定。提示血小板减少症患者外周血涂片巨大血小板比例明显增高、伴口形红细胞增多,应结合病史及血脂检查,以明确病因,及时有效救治。

SETD2基因与骨髓增生异常综合征的相关研究

目的:探讨SETD2基因与骨髓增生异常综合征(MDS)相关临床预后的关系。方法:应用靶向二代基因测序技术,检测我院180例MDS患者的43个MDS相关基因,并观察SETD2基因对患者原始细胞、血红蛋白、生存时间、无进展生存时间以及治疗效果的影响。结果:180例MDS患者中,我们发现SETD2基因突变包括SETD2 p.L2486R,SETD2 p.E1142G,TET2 p.T2388fs和SETD2 p.F1116fs;单核苷酸多态性包括SETD2 p.M761I,SETD2 p.E639K,SETD2 p.P193L,SETD2 p.M1080I,SETD2 p.N1155K和SETD2 p.P1962L,其中,SETD2 p.M761I,SETD2 p.E639K,SETD2 p.P193L和SETD2 p.M1080I四种SNP位点经预测分析具有危害性和致病性。携带危害性SETD2基因异常的患者共14例,其中同时携带TP53基因突变者占50.0%,同时携带TET基因突变者占28.6%,同时携带ASXL1基因突变者占21.4%。携带SETD2基因异常的MDS患者表现为较高的原始细胞水平(P<0.05);并且单变量和多变量生存分析表明,SETD2基因异常与MDS患者总生存时间和无进展生存时间显著相关(P<0.05)。结论:SETD2基因异常与MDS疾病进展迅速以及不良预后密切相关。

同时伴有LDLRAP1及ABCG8基因异常的家族性高胆固醇血症一家系的临床及分子生物学特征

目的探究同时伴有低密度脂蛋白受体衔接蛋白1(LDLRAP1)及胆固醇转运蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体G8(ABCG8)基因异常的家族性高胆固醇血症(FH)一家系的临床及分子生物学特征。方法2020年9月于上海交通大学医学院附属瑞金医院收治1例FH患者,采集该家系成员外周静脉血样本,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C);用高效液相色谱法检测血清豆固醇和谷固醇含量。二代基因测序检测先证者及家系成员基因变异情况。采用Pymol软件对基因变异位点进行致病性分析,并使用Uniprot Modelling软件行蛋白结构建模。结果先证者表现为贫血合并多部位黄色瘤、早发急性冠状动脉综合征。冠状动脉造影示冠状动脉三支严重病变;腹部超声示脾肿大;血涂片示异型红细胞、大血小板散在可见;血清TC、LDL-C、豆固醇和谷固醇浓度均升高[分别为8.54 mmol/L(正常值2.3~5.7 mmol/L)、4.84 mmol/L(正常值1.3~4.3 mmol/L)、44μmol/L(正常值1.0~10μmol/L)、28μmol/L(正常值1.0~15μmol/L)]。基因测序示:LDLRAP1:NM;15627.2:exon 4 c.415 C>T(p.Q139X),该纯合突变形成的蛋白截断体丢失多个稳定蛋白结构区域,不具备正常功能。同时,先证者发现ABCG8基因变异:exon13 c.1895T>C(p.V632A),exon8 c.1199C>A(p.T400K)。2例家系成员HDL-C增高(Ⅱ5:2.33 mmol/L,Ⅱ6:2.96 mmol/L);3例带ABCG8基因变异的成员豆固醇(Ⅱ8:23μmol/L,Ⅱ7:24μmol/L,Ⅰ2:18μmol/L)、谷固醇(Ⅱ8:41μmol/L,Ⅱ7:33μmol/L,Ⅰ2:45μmol/L)轻度增高。结论同时伴有LDLRAP1及ABCG8基因异常的FH患者,可出现植物固醇浓度异常,其临床表现更加复杂,应综合考虑家族史及LDL-C、植物固醇水平及基因检测结果。

应用计算生物组学模型预判难治性急性髓系白血病治疗反应1例并文献复习

目的探讨计算生物组学模型(CBM)在难治性急性髓系白血病(AML)患者治疗中的价值。方法回顾性分析2018年11月收治的1例采用由Cellworks肿瘤治疗应答指数(TRI)检测预测的个性化治疗方案治疗的难治性AML患者临床资料,总结诊疗过程及治疗效果,并复习AML治疗中CBM应用的相关文献。结果患者为43岁女性,伴t(6;11)(q27;q23),确诊后经2次诱导治疗均失败且化疗耐受性差。2019年3月行Cellworks TRI检测,预测最佳方案为克拉屈滨+曲美替尼+阿糖胞苷三药联合方案。患者采用该方案治疗1个疗程后复查达到完全缓解且微小残留病阴性,后成功实施亲源半相合异基因造血干细胞移植术。2020年11月疾病复发,无病生存19个月;2021年4月死亡,总生存时间为28.5个月。结论基于CBM的TRI检测为难治性AML患者提供了新的治疗思路,依据基因组学预测出的个性化治疗建议可能改善患者生存。