Fibronectin 1促进胃癌细胞耐药及其作用机制研究

目的探讨纤连蛋白1(FN1)促进胃癌细胞耐药及其作用机制。方法选择胃癌细胞系MKN45、MKN45/DDP、MKN45/VCR进行pLV-FN1、pLV-NC、FN1 siRNA慢病毒和脂质体3000瞬时转染,将转染pLVFN1的设为FN1过表达组(FN1),转染pLV-NC的为阴性对照组(Vector),转染FN1 siRNA慢病毒的为FN1敲低组(si-FN1),转染脂质体3000的为空白对照组(si-control)。分别采用qRT-PCR、MTT、克隆形成实验、Western blotting检测FN1 mRNA和蛋白的表达,MKN45/DDP细胞增殖、凋亡、集落形成情况及耐药相关蛋白的表达。结果FN1 mRNA和蛋白在MKN45和MKN45/VCR细胞中的表达水平均显著低于MKN45/DDP细胞(P<0.05);FN1敲低组细胞增殖能力显著低于空白对照组(P<0.001),FN1过表达组细胞增殖能力明显高于阴性对照组(P<0.001);FN1敲低组细胞凋亡率明显高于空白对照组(P<0.001),FN1过表达组细胞凋亡率显著低于阴性对照组(P<0.05);FN1敲低组细胞集落形成能力明显低于空白对照组(P<0.001),FN1过表达组细胞集落形成能力显著高于阴性对照组(P<0.001);FN1敲低组MRP-1、p-STAT3、STAT3、p-AKT蛋白表达水平均明显低于空白对照组(P<0.001)。结论FN1的高表达可能参与胃癌化疗耐药的相关过程,下调FN1表达有助于恢复耐药胃癌细胞对化疗的敏感性,有望为改善胃癌化疗疗效提供新的思路和方法。

调强放疗同步多西他赛联合奥沙利铂化疗治疗Ⅲ/Ⅳ期食管癌的临床研究

目的临床观察多西他赛联合奥沙利铂化疗同步调强放疗治疗Ⅲ/Ⅳ期食管癌的疗效。方法87例Ⅲ/Ⅳ期食管癌患者被随机分为对照组(替吉奥单药化疗同步调强放疗:46例)和研究组(多西他赛联合奥沙利铂化疗同步调强放疗:41例)。比较2组近期疗效、1年及2年生存率、不良反应及生活质量。结果研究组完全缓解率(CR)及客观有效率(CR+PR)分别为70.73%和87.90%,优于对照组30.43%和76.09%(P<0.05);研究组1年及2年生存率高于对照组(78.05%,51.21%vs.54.34%,19.57%),差异有统计学意义(P<0.05),而白细胞下降、贫血及消化道反应等不良反应发生率高于对照组(P<0.05),但经对症治疗后患者大部分患者可以完成治疗;放疗结束初期研究组QLQ-OES24评分低于对照组,而3个月后高于对照组(P<0.05)。结论多西他赛联合奥沙利铂为基础的同步放化疗可显著提高Ⅲ/Ⅳ期食管癌患者的近期疗效、生存率及远期生活质量,不良反应可耐受。

血清PG、G-17、CDH-17在胃癌中的表达及其诊断意义

目的探讨血清胃蛋白酶原(PG)、胃泌素(G-17)、肝肠-钙黏连蛋白-17(CDH-17)在胃癌中的表达及其诊断意义。方法选择70例胃癌患者设为观察组,并选择同期体检健康者50例作为对照组,分析血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、CDH-17在胃癌中的变化。结果观察组患者血清PGⅡ、G-17及CDH-17水平显著高于对照组,PGⅠ水平显著低于对照组(P<0.05)。早期胃癌组患者PGⅡ、G-17及CDH-17水平显著低于进展期胃癌组(P<0.05),PGⅠ显著高于进展期胃癌组患者(P<0.05)。将胃癌全组、早期胃癌及进展期胃癌作为因变量,将血清PGⅠ、PGⅡ、G-17及CDH-17分别作为自变量,在相关性分析结果中显示,PGⅡ、G-17、CDH-17和胃癌、早期胃癌及进展期胃癌之间均呈正相关(P<0.05),PGⅠ和胃癌、早期胃癌及进展期胃癌之间均呈负相关(P<0.05)。PGⅠ诊断胃癌的AUC为0.983,95%CI为0.962~1.000;PGⅡ诊断胃癌的AUC为0.797,95%CI为0.716~0.878;G-17诊断胃癌的AUC为0.986,95%CI为0.958~1.000;CDH-17诊断胃癌的AUC为0.928,95%CI为0.880~0.975;PGⅠ+PGⅡ+G-17+CDH-17诊断胃癌的AUC为1.000,95%CI为1.000~1.000。PGⅠ、PGⅡ、G-17、CDH-17单独检测分别和联合检测曲线下面积比较,差异均具有统计学意义(Z=1.546、4.951、1.000、3.000,P均<0.05)。联合检测PGⅠ+PGⅡ+G-17+CDH-17的特异度、准确度分别为91.83%、93.15%。结论在胃癌患者中PGⅠ、PGⅡ、G-17、CDH-17的表达和病情严重程度之间存在着密切关系,为靶向药物治疗胃癌提供了新思路,且联合检测具有较高的特异度、准确度,临床应用价值高。

PI3K/AKT/mTOR通路在结直肠癌中的表达及靶向治疗研究

目的研究磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路在结直肠癌中的表达及靶向治疗。方法将我院2017年4月至2018年4月收治的66例结直肠癌患者纳入观察组,另外选取同期于我院体检健康的志愿者66名纳入对照组。观察组患者入院后均在治疗前通过电子肠镜获取癌组织标本及癌旁组织标本,对照组志愿者入院后通过电子肠镜获取正常结直肠黏膜组织标本,对比癌组织、癌旁组织、正常肠黏膜组织中AKT、mTOR阳性检出率,对比两组AKT、mTOR蛋白水平间的差异,分析不同临床特征(性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移情况、分化程度、TNM分期)的结直肠癌患者AKT、mTOR阳性表达情况。结果观察组AKT、mTOR蛋白水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同组织中AKT、mTOR阳性检出率对比,癌组织>癌旁组织>正常肠黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤大小患者间AKT、mTOR阳性检出率对比差异无统计学意义(P>0.05);淋巴结转移、低分化、TNM分期Ⅳ~Ⅲ期患者的AKT及mTOR阳性检出率显著高于无淋巴结转移、中-高分化、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P>0.05)。结论结直肠癌患者AKT、mTOR蛋白水平呈现出高表达,癌组织内AKT、mTOR阳性检出率高,与淋巴结转移、分化程度、TNM分期关系密切。

LncRNA FoxD2-AS1靶向miR-324-5p对结肠癌SW480细胞增殖和迁移侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FoxD2-AS1是否通过靶向miR-324-5p影响结肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭。方法RT-qPCR检测人正常结肠黏膜上皮细胞株NCM460及结肠癌细胞株SW480、HCT116和HT29中FoxD2-AS1和miR-324-5p表达水平;MTT法检测FoxD2-AS1和miR-324-5p表达对结肠癌SW480细胞增殖活力的影响;Transwell小室实验检测FoxD2-AS1和miR-324-5p表达对结肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响;双荧光素酶报告基因实验检测FoxD2-AS1是否靶向miR-324-5p。结果与NCM460细胞相比,结肠癌各细胞株中FoxD2-AS1表达明显上调(P<0.05),miR-324-5p表达明显下调(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实FoxD2-AS1靶向抑制miR-324-5p的表达;MTT和Transwell小室实验结果表明,干扰FOXD2-AS1和过表达miR-324-5p后结肠癌SW480细胞增殖活力均明显降低,细胞迁移和侵袭能力均明显减弱;与干扰FOXD2-AS1相比,同时干扰FOXD2-AS1和miR-324-5p后细胞增殖、迁移和侵袭能力明显增强(P<0.05)。结论lncRNA FOXD2-AS1通过靶向负调控miR-324-5p的表达影响结肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力。