雌激素与尼古丁对软骨细胞基质代谢影响

雌激素和尼古丁是2种对骨关节炎发病有影响的重要因素,但其影响的具体分子机制仍然存在争议。本研究旨在探讨这2种因素单独和叠加对软骨细胞代谢的影响,从而为骨关节炎的发病机制研究提供一定的参考。鼠胚胎瘤来源的软骨前体细胞系ATDC5在进行铁硒传递蛋白ITS定向诱导能够分化为软骨细胞。研究中对诱导后获得的软骨细胞用雌激素及尼古丁进行了处理。处理后细胞胞外基质蛋白聚糖和二型胶原表达水平分别用甲苯胺蓝染色和免疫组化进行检测,蛋白表达水平和mRNA水平分别进行了Western blot和Real-time PCR验证。研究结果显示尼古丁会造成软骨细胞2种胞外基质分泌的降低,并且促进分解酶MMP13的表达,抑制合成相关蛋白BMP-7的表达。而雌激素能够通过抑制分解酶MMP13和促进基质合成相关蛋白BMP-7的表达来挽回尼古丁对软骨细胞胞外基质的破坏作用。但在mRNA水平,与仅用尼古丁处理相比,雌激素会同时促进mmp13和bmp-7的表达,推测是因为雌激素增强了细胞的代谢效率。这些结果表明,雌激素对受到尼古丁影响的软骨细胞具有保护作用,这可能是骨关节炎初期防治的一个潜在治疗方案。

尼古丁对小鼠精子顶体的影响

目的研究尼古丁对小鼠精子顶体的影响。方法将C57BL/6J品系雄性小鼠随机分为尼古丁组(n=20)和对照组(n=20),尼古丁组每日腹腔注射0.2 mg/100 g尼古丁,对照组注射等体积生理盐水,连续处理5周;采用转录组测序(RNA-Seq)方法检测尼古丁处理前、后的精子RNA转录组表达水平。通过实时定量聚合酶链反应(PCR)验证测序结果,将测序结果进行生物信息学分析;利用试剂盒测定顶体酶活性,络合异硫氰酸荧光素的豌豆凝集素(FITC-PSA)荧光染色检测精子顶体反应率,Western blotting测定顶体酶(溶酶体酶)通路蛋白变化情况。结果对照组reads数为2089729,尼古丁处理组reads数为1739093,共获得8699个转录本;实时定量PCR结果与RNA-Seq结果一致;尼古丁处理后顶体酶活性和顶体反应率显著升高(P<0.05);顶体酶逆转运的CLTC蛋白表达显著低于对照组(P<0.05)。结论尼古丁提高小鼠精子顶体酶的活性和顶体反应率,有可能增加顶体酶的合成。