三化汤化学成分鉴定

目的 利用UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS法对三化汤化学成分进行鉴定。方法 分析采用Waters CORTECS T3色谱柱(2.1 mm×150 mm, 1.6μm);流动相乙腈-0.2%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温30℃;检测波长260 nm;加热电喷雾离子源(HESI);正负离子监测模式;质量扫描范围m/z 100~1 200。采用Xcalibur 2.1软件并结合文献报道、质谱数据对化学成分进行定性鉴别。结果 从三化汤中共鉴定出166个化合物,包括黄酮类、蒽醌及蒽酮类、香豆素类、木脂素类、生物碱类等,其中对照品指认的成分有30种。结论 该方法可实现对三化汤化学成分的快速鉴别,为后续探究该经典名方药效物质基础、建立其质量标准奠定基础。

基于多指标含量测定结合化学计量学评价的石见穿质量研究

目的 以酚酸类成分及水溶性浸出物含量为指标,结合聚类热图、灰色关联度分析与熵权TOPSIS分析等化学计量学方法综合评价不同产地石见穿药材的质量。方法 参照2020年版《中国药典》中的规定测定水溶性浸出物。建立UPLC法测定石见穿药材中丹酚酸B、丹参素、咖啡酸、绿原酸及迷迭香酸5种酚酸类成分含量,采用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);以0.1%甲酸(A)—乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱;检测波长为290 nm;柱温为40℃;流速为0.4 mL/min;进样量为1μL。测定来自广东、广西、山东、安徽、湖北5个产地共20批药材的水溶性浸出物及5种酚酸类成分含量。采用聚类热图、灰色关联度分析与熵权TOPSIS分析对测定结果进行综合评价。结果 不同批次石见穿药材各指标成分含量存在较大差异;聚类热图分析显示20批药材可分成5类;灰色关联度分析与熵权TOPSIS分析均显示产自山东产区的药材其得分排名整体靠前。结论 本研究为石见穿药材的质量评价及产地选择提供参考。

基于网络药理学探讨小承气汤治疗粘连性肠梗阻的作用机制

目的:利用网络药理学方法探讨小承气汤治疗粘连性肠梗阻的作用靶点,并对其进行生物信息学分析。方法:应用中药系统药理学数据库分析平台(TCMSP)筛选出小承气汤中的潜在化学活性物质及相关靶点蛋白;应用GeneCards、OMIM获取粘连性肠梗阻相关靶点,二者相互映射获得药物与疾病共同靶点。利用Cytoscape软件构建“小承气汤成分-靶点-粘连性肠梗阻”网络图。利用String、Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络及筛选关健基因(Hub基因);利用Metascape平台进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。使用PDB、PubChem数据库,PyMOL、ChemBio3D及AutoDock Vina软件进行分子对接。结果:共筛选出小承气汤活性成分40个,小承气汤治疗粘连性肠梗阻潜在靶点126个,富集分析显示GO条目1149条,KEGG通路167条。主要活性成分包括木犀草素、β-谷甾醇等;关键靶点有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Akt Serine/Threonine Kinase 1,AKT1)、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)等;主要涉及癌症的途径通路、人类巨细胞病毒感染通路等通路。分子对接初步验证了小承气汤主要活性化合物与核心靶点有较高的结合活性。结论:小承气汤可能通过炎症性肠病、抗癌等通路机制,发挥治疗粘连性肠梗阻的作用。

基于UPLC-Q-ExactiveOrbitrapMS技术分析经典名方身痛逐瘀汤化学成分

目的应用UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术对身痛逐瘀汤基准样品化学成分进行分析和鉴定。方法采用Waters HSS T3 C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1);结合UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS扫描提供化合物的准确分子量、二级质谱碎片离子信息等,参照软件预测分析、对照品、文献报道等进行化学成分鉴定。结果从身痛逐瘀汤基准样品中共鉴定出151个化学成分,包括黄酮类52个、三萜皂苷类25个、苯酞类19个、含氮类20个、有机酸类11个、香豆素类8个、环烯醚萜类5个及其他11个。结论利用液质联用技术鉴定身痛逐瘀汤基准样品的化合物及结构信息,并初步归纳各类主要化学成分的质谱裂解特点,为身痛逐瘀汤的药效物质基础及质量控制研究提供科学依据。

麸炒枳实炮制工艺研究及质量分析

目的多指标优选麸炒枳实最佳炮制工艺。方法以特征图谱为定性指标,饮片性状为炮制程度判断指标,辛弗林、柚皮苷、新橙皮苷的质量分数为定量指标,选取炒制时间、炒制温度、加麸量为麸炒枳实炮制主要因素,采用正交实验设计与主成分分析法优选麸炒枳实炮制工艺。结果对15批麸炒枳实建立特征图谱,标定共有峰7个,并指认了柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和辛弗林4个化合物。通过正交方差分析与主成分分析,确定麸炒枳实最佳炮制工艺为:每100 kg麸炒枳实用麦麸量为10 kg,炒制温度为220℃,炒制时间为5 min。不同产地生品与其炮制品特征色谱概貌一致,整体分离度较好。结论优选的麸炒枳实炮制工艺切实可行。

基于指纹图谱和化学计量学的不同产地药用大黄的质量评价

目的:建立药用大黄UHPLC指纹图谱,并结合化学计量学进行质量评价。方法:采用Waters CORTECS T3(150 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱;流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速为0.25 mL/min;检测波长为260 nm;柱温为30℃;进样量为1μL。通过聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析对21批药用大黄进行质量评价。结果:建立了药用大黄UHPLC指纹图谱,确定了24个共有峰;聚类分析和主成分分析结果一致;主成分综合得分结果表明同一产地样品质量也存在差异。正交偏最小二乘判别分析将样品按产地的不同分为4类,并筛选出10个VIP值>1的差异性成分。结论:该研究建立的方法稳定可靠,可用于全面评价药用大黄的质量。

基于NIRS技术的丹参配方颗粒水分与指标成分的快速测定方法

目的采用近红外光谱(Near Infrared Spectroscopy,NIRS)技术,结合化学计量学方法,建立丹参配方颗粒水分和丹酚酸B的定量模型,实现对丹参配方颗粒的水分和丹酚酸B含量进行快速检测。方法以烘干法和HPLC法作为参比分析方法,分别测定丹参配方颗粒的水分以及丹酚酸B的含量,运用最小二乘法(PLS)法分别建立NIRS与水分及丹酚酸B含量之间的定量校正模型,并对预测集样品的两个指标进行预测。结果所建NIRS定量模型的相关系数(R^(2))分别为0.856、0.844;采用独立验证集对模型进行外部验证,RMSECV分别为0.161和4.27,RSEP均<5%。所建立的NIRS快速检测方法的准确性、精密度和重复性,结果均良好。结论NIRS分析技术可应用于丹参配方颗粒中水分和丹酚酸B的快速检测。

燀桃仁中D-苦杏仁苷的UPLC含量测定研究

目的建立燀桃仁中D-苦杏仁苷UPLC含量测定方法。方法样品采用甲醇超声处理的方法进行提取,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3(2.1×100 mm,1.8μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.4mL·min^-1,柱温20℃,进样体积1μL,检测波长210nm。结果所采用的提取方法能有效地抑制D-苦杏仁苷的受热转化和降解,且方法能有效地分离L-苦杏仁苷和D-苦杏仁苷这一对差向异构体,D-苦杏仁苷的线性方程为y=0.0390x+0.1741(r=0.9999),进样量在23.015~736.470ng范围内与响应值呈良好的线性关系,平均回收率为101.3%,RSD为1.5%。结论所建立的UPLC含量测定方法简便、准确,能为燀桃仁药材质量标准的提高提供参考。

多指标权重分析法结合正交试验优选醋五灵脂炮制工艺

目的:优选醋五灵脂的炮制工艺。方法:建立超高效液相色谱指纹图谱,以醋五灵脂9个共有峰的主成分分析结果及外观性状为综合评价指标,采用正交试验考察米醋用量、电炒锅功率、炒制时间对醋五灵脂炮制工艺的影响,以综合得分为评价依据优选醋五灵脂炮制工艺。结果:醋五灵脂的最佳炮制工艺为每100 g五灵脂使用米醋10 g,电炒锅功率600 W,炒制时长10 min。结论:优选的醋五灵脂炮制工艺稳定可行,可为其饮片质量控制和产业化生产提供参考。

经典名方小承气汤中化学成分的UPLC-Q-Orbitrap-MS分析

目的采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap-MS)对小承气汤中的化学成分进行快速识别和鉴定。方法采用CORTECS T3色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.6μm),以甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)作为流动相进行梯度洗脱(0~5 min,3%~21%A;5~20 min,21%~36%A;20~32 min,36%~50%A;32~42 min,50%~62%A;42~50 min,62%~85%A;50~60 min,85%~95%A),流速0.2 mL·min^(-1),柱温30℃;采用加热电喷雾离子源(HESI),正、负离子模式检测,扫描模式为Full MS/dd-MS2,扫描范围m/z100~1200,碰撞能量20,40 eV。通过与对照品比对并结合文献报道、质谱数据库信息等对化合物进行鉴别。结果从小承气汤中共鉴别了123个成分,包括33个黄酮类成分,25个蒽醌及蒽酮类成分,23个苯丙素类成分,15个鞣质类成分,10个含氮类成分及其他类化合物17个。其中,有32个成分通过与对照品比对后确认。结论利用UPLC-Q-Orbitrap-MS技术系统地阐明了小承气汤的物质基础,明确其主要化学成分黄酮类、蒽醌及蒽酮类、苯丙素类成分分别来源于枳实、大黄和厚朴,可为该复方的物质基础全面阐释和质量标准合理制定提供科学依据。

不同煎煮方式对麻杏石甘汤6种成分及微量元素含量变化的影响

目的考察麻杏石甘汤中石膏和麻黄的最佳煎煮方式。方法建立超高效液相色谱法(UPLC法)同时测定麻杏石甘汤中麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、甘草素以及甘草酸等6种成分的含量,同时采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS法),测定不同煎煮方式麻杏石甘汤中微量元素的含量。结果麻黄先煎、麻黄与石膏同时先煎及合煎45min均有利于麻黄碱和伪麻黄碱的溶出,而石膏先煎、麻黄与石膏同时先煎均有利于麻杏石甘汤中微量元素的溶出。结论麻黄与石膏共同先煎是麻杏石甘汤中石膏与麻黄的最佳煎煮方式。