子宫内膜异位症及子宫腺肌症患者雌、孕激素受体研究

用葡聚糖—活性炭分离法(DCC)在18例卵巢宫内膜异位症患者的异位内膜组织及13例子宫腺肌症患者的局部腺肌组织中测得雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR),但其阳性结果平均值低于正常宫内膜。18例卵巢宫内膜异位症中,PR阴性6例(33.4％),这可能与部分患者孕激素治疗效果不满意有关;13例子宫腺肌症中PR阳性10例(76.9％),提示对40岁以下患者保留子宫,采用激素治疗的可能性。雌、孕激素受体水平与这两种疾病患者的治疗及预后的关系,值得进一步探讨。

泰素帝联合卡铂用于卵巢癌化疗的近期疗效观察

目的 :观察泰素帝联合卡铂治疗晚期及复发性卵巢癌的近期疗效、不良反应及用药剂量。方法 :6例晚期卵巢上皮癌 (Ⅲ期或Ⅳ期 ,其中 3例为复发性 )患者采用泰素帝静脉、卡铂静脉或腹腔化疗观察每次用药后血液系统、非血液系统的毒副反应 ,至少完成 3个疗程观察疗效。结果 :6例中除 1例完成 2个疗程退出 ,其余 5例患者达完全缓解。 1例出现Ⅳ度白细胞下降 ,3例Ⅲ度 ,3例出现全身骨关节疼痛 ,在减量至 75 %后 ,为Ⅱ度白细胞下降 ,且无全身不适。结论 :泰素帝联合卡铂治疗晚期及复发性卵巢癌疗效较好 ,使用简单 ,毒副反应小。

子宫内膜癌的规范化治疗

子宫内膜癌（endometrial cancer,EC）是发达国家女性生殖道最常见的恶性肿瘤,占女性全身恶性肿瘤的6%,居女性全身恶性肿瘤第4位,占生殖道恶性肿瘤20%～30%。其死亡率为女性全身肿瘤3%,居第6位。

51例绒(毛)膜癌死亡病例死因及预后因素探讨

本文着重对51例绒癌病例的死因和影响预后的因素进行了分析讨论。说明对40岁以上,有肝脑转移者,早期正确的临床、病理诊断,早期采用大剂量多种有效化疗药物,控制肺转移,配合腔内给药、全脑照射及适时适当的手术干涉,可减低死亡率。

创设有利于幼儿心理健康的精神环境

众所周知，幼儿心理发展受遗传和环境的双重影响，环境对幼儿的心理健康的影响是不容忽视的。环境包括物质环境与精神环境。在物质文明日益发展的今天，幼儿园、家庭和社会为幼儿提供的物质环境与过去相比有了很大的改善，与之相比，精神环境就显得有些不尽人意。精神环境对幼儿心理健康的影响是潜移默化、日积月累的，往往容易被教师和家长忽视。要使幼儿的心理处于健康状态，为幼儿创设良好的精神环境是至关重要的。

正确实施幼儿园渗透式艺术教育之我见

实现幼儿园健康、语言、社会、科学、艺术五大领域之间的相互渗透是领域课程发展的趋势,也是领域课程发展的高级阶段。正确实施幼儿园的渗透式艺术教育是学前教育发展的要求,更是学前儿童艺术教育发展的必然需要。本文从实现艺术领域与各领域之间自然、实质的融合;分清主次,把握好渗透的“度”;遵循艺术“审美”与“愉悦”两大原则;保持艺术领域自身的独立性等四个方面探讨了幼儿园渗透式艺术教育的正确实施。

正确实施幼儿园渗透式艺术教育之我见

幼儿园的渗透式艺术教育主要是指渗透于其他领域以及幼儿园其他活动之中的艺术教育。“幼儿园渗透式艺术教育应主要包括四种类型：一是渗透于其他各领域活动中的艺术教育；二是渗透于日常生活中的艺术教育；三是渗透于游戏活动中的艺术教育；四是渗透于节日活动中的艺术教育。”艺术教育有其独特的作用，由于艺术教育自身的某些特点使其在与不同领域的交叉和融合过程中发挥着中介作用，这种中介作用是其他各领域所不能比拟的，这样的中介作用也使得艺术教育与其他各领域之间存在着更多的渗透。不仅如此，艺术活动因其形式和内容的某些特点也使其很容易渗透到幼儿园的其他活动之中。正是艺术教育渗透的广泛性和丰富性使幼儿园的渗透式艺术教育具有独特而重要的价值。

358例子宫内膜癌手术方式及影响预后的危险因素分析

目的：探讨子宫内膜癌的手术方式及影响预后的危险因素。方法：回顾性分析资料完整、初治为手术治疗并经病理学诊断确诊,且进行系统分期手术的358例子宫内膜癌患者的临床情况及手术方式,并进行随访。对可能影响子宫内膜癌患者预后的危险因素进行分析。结果：358例患者中位发病年龄52岁（20~78岁）,3年总体无瘤生存率分别为Ⅰ期97.12%,Ⅱ期91.67%;Ⅲ期85.19%,复发及死亡14例。开腹手术326例（91.06%）,腹腔镜手术32例（8.94%）。与开腹组手术患者比较,腹腔镜组手术时间较长、平均估计术中失血量较少且平均住院时间短,差异有统计学意义（P〈0.05）。单因素分析表明,有内科合并症、手术病理分期晚、仅行盆腔淋巴结取样、脉管癌栓阳性、盆腔和（或）腹主动脉旁淋巴结转移是影响子宫内膜癌患者预后的危险因素;多因素分析表明,盆腔淋巴结转移是影响子宫内膜癌患者预后的独立危险因素（P=0.000,OR=11.901,95%CI3.291~43.039）。结论：子宫内膜癌以开腹手术为主,腹腔镜手术显示了微创的优势。手术病理分期晚期、伴有内科合并症、仅行盆腔淋巴结取样术、脉管癌栓阳性、腹主动脉旁淋巴结转移,特别是有盆腔淋巴结转移的子宫内膜癌患者预后差。

人卵巢癌裸鼠移植瘤和腹水瘤模型的建立及形态学观察

目的 建立人卵巢癌裸鼠移植模型 ,为研究人卵巢癌发病机制、实验治疗提供工具。方法 采用组织学完整的人卵巢癌实体瘤和腹水瘤标本植入裸鼠腹腔和皮下 ,观察成瘤生长和转移以及形态学特征 (光镜、电镜和染色体 )。结果 10例卵巢癌标本 2例实体瘤、1例腹水瘤移植成功 ,实体瘤传至第六代 ,腹水瘤传至第十八代 ,传代移植成功率 10 0% ,移植瘤病理学和电镜观察、染色体核型分析、肿瘤标记物检查均与人体原发肿瘤一致。结论 本研究建立的人卵巢癌实体瘤和腹水瘤裸鼠移植模型与临床患者相似 。

自噬基因Beclin1与上皮性卵巢癌发生、发展的相关性研究

背景与目的:有研究表明自噬的抑制与肿瘤的发生有关,沉默自噬基因Beclin1可导致多种恶性肿瘤的发生。本研究探讨Beclin1基因在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用,并分析其过表达对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法:用免疫组化检测25例正常卵巢组织、25例良性上皮性卵巢肿瘤、19例交界性上皮性卵巢肿瘤及69例上皮性卵巢癌组织的Beclin1表达;构建真核表达载体pcDNA3.1/Beclin1,脂质体法分别将质粒pcDNA3.1/Beclin1、pcDNA3.1转染人卵巢癌细胞株SKOV3,用MTT法分析外源性Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,并用流式细胞仪检测凋亡情况。结果:正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤组织中Beclin1表达的积分光密度(integrated optical density,IOD)值均较高,两者之间的差异无显著性(P>0.05);交界性卵巢肿瘤组织中Beclin1的表达降低,而在上皮性卵巢癌中Beclin1表达的IOD值最低,与正常卵巢组织比较差异有显著性(P<0.05)。pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后细胞生长抑制率为(68.75±5.10)%,而pcDNA3.1转染组为(10.91±4.20)%,两者之间差异有显著性(P<0.05)。pcDNA3.1/Beclin1转染后72h SKOV3细胞的凋亡率为19.07%,高于pcDNA3.1转染组和未转染组,差异有显著性(P<0.05)。结论:Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达下调,可能与上皮性卵巢癌的发生、发展有关;自噬基因Beclin1的过表达可抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖,并诱导其凋亡。

基质金属蛋白酶-2和-9在宫颈癌的表达及其相关性研究

目的 探讨基质金属蛋白酶 - 2和 - 9(MMP- 2和 MMP- 9)在宫颈癌组织中的表达及其与癌浸润和转移的相关性。方法 采用免疫组化 L s AB法检测 6 2例宫颈浸润癌、5例原位癌、10例正常宫颈以及 10例转移淋巴结中 MMP- 2和 MMP- 9蛋白的表达。结果 MMP- 2和 MMP- 9在宫颈浸润癌细胞及癌旁间质细胞中表达显著高于原位癌及正常宫颈上皮 (P<0 .0 5 ) ,MMP- 9与 MMP- 2有弱相关性 ,MMP- 9的阳性表达显著强于 MMP- 2 (P<0 .0 1) ;MMP- 2和 MMP- 9的表达与临床分期、组织学分级、病理类型均无相关性 (P>0 .0 5 ) ;MMP- 9的表达与宫颈癌淋巴转移有关。结论 基质金属蛋白酶 MMP- 2和 MMP- 9在宫颈癌组织中的高表达与宫颈癌的侵袭性行为有关 ,MMP- 9与宫颈癌的侵袭性行为关系更密切 ,可能成为判断早期宫颈癌预后的指标之一。

RNA干涉抑制宫颈癌CaSki细胞株HPV16 E6基因的研究

背景与目的:研究表明宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)E6、E7癌基因密切相关,于是人们采用核酶或HPVE6、E7反义寡核苷酸抑制其表达来治疗宫颈癌,虽然取得了一定的效果,但仍面临基因抑制效率低、维持时间短、工作量大、耗费多等问题。本研究采用最新的RNA干扰技术干扰宫颈癌CaSki细胞中HPV16E6转录,以了解其能否特异性抑制HPV16E6基因及其时效性如何。方法:设计合成针对HPV16E6的荧光标记siRNA,借脂质体转染宫颈癌CaSki细胞,通过荧光照片计数荧光细胞占所有细胞的比例计算转染效率;测定转染后不同时间点的细胞凋亡率;RT-PCR测定HPV16E6mRNA变化,Westernblot和流式细胞仪检测转染前后蛋白表达情况。结果:相差显微镜荧光照片显示细胞转染的效率为81%。HPV16E6siRNA转染细胞后24h、48h、5天凋亡率分别为7.7%、11.8%和37.4%,转染9天时凋亡率下降至12.6%。RT-PCR扩增结果显示,细胞转染前HPV16E6mRNA的量与siRNA阴性对照比较没有显著性差异,但转染后24h、48h、5天和9天分别减少了77%、83%、59%和41%;而作为内对照的β-actinmRNA在转染前后无变化。流式细胞仪定量测定HPV16E6蛋白,结果显示转染后24h、48h和5天,蛋白表达抑制率分别为79.7%、80.4%和71.3%;9天时抑制率有下降,但仍可达57.

自噬基因Beclin 1在宫颈鳞癌中的蛋白表达及其临床意义

目的探讨自噬基因Beclin 1在宫颈鳞癌中的蛋白表达以及与肿瘤发生发展的关系。方法采用免疫组化SP法检测81例宫颈鳞癌、20例宫颈上皮内瘤样病变（CIN，Ⅱ～Ⅲ级）和20例正常宫颈组织中自噬基因Beclin 1的蛋白表达。结果宫颈鳞癌组织中Beclin 1阴性、弱阳性、强阳性表达率依次是43．2％（35／81）、34．6％（28／81）、22．2％（18／81），与正常宫颈和宫颈上皮内瘤样病变组相比，Beclin 1在宫颈鳞癌中的表达显著下调（P=0．011）。宫颈鳞癌中Beclin 1的表达在不同FIGO分期、年龄、宫颈肌层浸润深度、宫颈肿瘤大小、大体类型间的差异无统计学意义。但在有无盆腔淋巴结转移、不同肿瘤分化程度间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论自噬基因Beckn 1在宫颈鳞癌中蛋白表达下调，并与宫颈鳞癌盆腔淋巴结转移和肿瘤分化程度有关。

超排卵对小鼠卵母细胞和胚胎发育潜能的影响

目的比较超排卵对小鼠卵母细胞和胚胎发育潜能的影响。方法建立超排卵妊娠小鼠模型,获取孕4d胚胎,观察获取卵母细胞的数目、受精率、卵裂率、优质胚胎率和囊胚形成率,并与自然周期排卵小鼠的比较。结果超排周期组获取的卵母细胞的数目高于自然周期组;超排周期组的受精率(88.57%)和卵裂率(92.17%)与自然周期组的受精率(92.86%)和卵裂率(96.70%)相似,但超排周期组的优质胚胎率(76.50%)和囊胚形成率(22.50%)低于自然周期组的优质胚胎率(88.64%)和囊胚形成率(43.18%)。结论超排卵能增加卵母细胞和胚胎的数量,不影响受精和卵裂,但会降低优质胚胎率和囊胚形成率,影响卵裂后胚胎的进一步发育的潜能。

羟基磷灰石纳米粒子对卵巢癌作用的体外实验研究

目的探讨羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HAP)纳米粒子对卵巢癌细胞株SKOV3生长的作用。方法通过细胞毒性试验观察HAP纳米粒子对细胞生长的作用,测定HAP纳米粒子的量效曲线和时效曲线。通过丫啶橙/溴化乙啶染色荧光显微镜观察、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期来观察HAP粒子对细胞凋亡的作用。结果HAP纳米粒子对SKOV3细胞生长具有抑制作用,当细胞的抑制率为30%、50%和70%时,该纳米粒子的浓度分别为8.53mg/L、26.52mg/L和61.99mg/L。形态学和定量的检测均证实HAP纳米粒子有诱导细胞凋亡的趋势,其凋亡率为(38.32±17.87)%,而对照组为(11.88±7.69)%,两组间差异显著,P<0.05。并且HAP纳米粒子作用后,S期细胞明显少于对照组,而G0/G1期细胞明显多于对照组,两组间差异显著,P<0.05。结论HAP纳米粒子对卵巢癌细胞株SKOV3的生长具有明显的抑制作用,其作用机制可能是诱导肿瘤细胞凋亡。

bFGF单克隆抗体对卵巢癌移植瘤血管生成的抑制作用

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在卵巢上皮性肿瘤中的表达强度与肿瘤血管生成之间的关系,及其单克隆抗体bFGFMAb对人卵巢癌移植瘤血管生成和肿瘤生长的影响。方法:(1)应用免疫组化法和图像分析系统研究bFGF在正常卵巢组织,良性、交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达部位和强度;以及bFGF的表达强度与肿瘤新生血管的关系;(2)利用卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,每周2次将不同浓度的bFGFMAb注射于瘤体周围,连续8周,每周测量肿瘤体积,绘制移植瘤生长曲线;对移植瘤组织行Ⅷ因子的免疫组化染色,测定肿瘤内微血管密度(MVD)。结果:(1)bFGF主要在卵巢上皮性肿瘤细胞浆内表达,在交界性和恶性肿瘤中,部分细胞同时存在核表达;bFGF在正常卵巢组织,良性、交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达强度逐步增强,同时MVD逐步增高,二者呈正相关(P<0.001);(2)30、20、10μgbFGFMAb组移植瘤体积分别是对照组的31.34%、49.20%和71.25%,MVD分别是对照组的27.80%、52.37%和81.86%(P<0.05),其作用呈浓度依赖性。结论:bFGFMAb能明显抑制卵巢癌的血管生成和肿瘤生长,有望成为卵巢癌生物治疗的新方法。